"MuM-2C Cell|人眼脉络黑色素瘤细胞
细胞背景资料：脉络膜；黑色素瘤
细胞形态：上皮细胞样
传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些殊的细胞和分化征。传代细胞形成细胞株的Zui大利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。【操作步骤】１)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；２)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；３)置３７℃孵箱或室温(２５℃温度)下进行消化，２~５min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；５)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；６)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO２培养箱中进行培养；７)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般２～３d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】１)掌握HAO细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；２)掌握HAO消化浓度，当消化液浓度过GAO时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。
细胞生长：贴壁
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细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
MuM-2C Cell|人眼脉络黑色素瘤细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)
细胞培养过程中，总是会出现各种意想不到的问题，一不留神就会全盘皆输。所谓细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。下面是贴壁细胞的保藏方法，希望对细胞培养初学操作者有所帮助：1)观察细胞状态：贴壁细胞密度达到85-90%，即可以细胞冻存形式进行保藏，拍照，记录细胞状态；2)细胞清洗：培养皿表面消毒后，转移至生物安全柜中，去除培养皿中培养液，加入12mlPBS，轻轻摇晃培养皿清洗细胞，随后吸除PBS清洗液；3)细胞消化：将2ml胰酶加入培养皿中，完全覆盖细胞，置于显微镜下观察（期间禁止摇晃培养皿），当细胞刚开始脱落时，立即转移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余约0.5ml胰酶，转移至培养箱内继续消化，每30秒肉眼观察细胞状态，至细胞成流沙状完全脱落，转移至生物安全柜中，加入12ml完全培养基，终止消化；4)细胞离心：将终止消化后的细胞悬液吹打均匀，吸取至15ml离心管中，1000r/min（110g），离心3min；5)细胞冻存：离心后去除细胞上清液，按照冻存细胞量5*10^5/ml，吸取冻存液重悬细胞沉淀，吹打均匀后分装至相应的冻存管中，进行冻存；6)细胞保藏：冻存管做HAO标记，放至程序降温盒中，于4℃冰箱放置30min，转移至-80℃超低温冰箱过夜，将过夜后的冻存细胞转移至液氮中保藏。
DH-82细胞类似产品：：PANC-03-27细胞、CMT167细胞、BC-009细胞
MESSADX5细胞类似产品：：MALME 3M细胞、CHL/IU细胞、P3-X63.Ag8.653细胞
H220细胞类似产品：：H-676细胞、L cells细胞、EL 4细胞
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细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性：贴壁
细胞系永生化原理介绍：多数正常细胞的寿命是有限的，能传20-100代，但有些细胞，尤其是来自啮齿类或来自多数肿瘤的细胞，可以产生具有无限寿命的连续细胞系。啮齿类动物细胞在分离时核型是正常的，在传到12代左右以后可能出现危相，多数细胞在这个阶段死亡了，但少数细胞存活下来，并拥有了更GAO的生长率，成为连续细胞系。目前认为永生化是一个多步骤的过程，包括一系列细胞周期的调节基因(如Rb和p53)失活。目前主要从两个方向进行操作，病毒基因致永生化和端粒酶诱导的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于诱导永生化。这个基因的产物-T抗原，可与Rb和p53结合。这样不仅使细胞增殖的寿命得以延长，同时也限制了如p53这样基因的DNA监控活性，从而使基因组的不稳定性增加，也增加了向永生化发展的进一步突变的机会(如上调端粒酶或下调端粒酶抑制物的活性)。用含可调节启动子的端粒酶基因进行转染，足以形成永生化细胞。这些基因中已被广泛应用的有：EBV用于淋巴母细胞样细胞；SV40 LT用于黏附细胞，如成纤维细胞(Mayne et al., 1996)、 角质形成细胞(Steinberg,1996) 和内皮细胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT则用于间充质干细胞和其他一些细胞。
SN12C细胞类似产品：：H727细胞、D283-MED细胞、TJ905细胞
KP-2细胞类似产品：：NBL-S细胞、Colo-206F细胞、NCI-SNU-16细胞
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细胞、Hs 888Lu细胞
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MuM-2C Cell|人眼脉络黑色素瘤细胞
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MuM-2C Cell|人眼脉络黑色素瘤细胞
LLC-MK2细胞类似产品：：Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5细胞、PC3细胞、L-M (TK-)细胞
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GEO细胞类似产品：：NCI-H1373细胞、BSC-40细胞、OCI-LY-7细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-231细胞类似产品：：95D细胞、Hs 940.T细胞、UACC812细胞
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ECC12细胞类似产品：：HEK-EBNA细胞、U-118 MG细胞、Tadarida brasiliensis 1 lung细胞
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G-292, clone A141B1细胞类似产品：：Hs 766.T细胞、SCC-1395细胞、MT4细胞
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