"C8161 Cell|人黑色素瘤细胞
细胞背景资料：皮肤黑色素瘤；腹壁转移；女性
细胞形态：上皮细胞样
【细胞培养中原虫的污染情况总结】原虫：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不HAO，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞站YOU势所以不会影响到细胞的正常生长，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，Zui终形成恶性循环。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等关于培养基的无菌状况，取培养基至培养瓶中(不加细胞)，３７度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长就是操作的问题。也可以在培养基中事先加入双抗(酸链霉素和苄青霉素)。但双抗有时会影响细胞的状态，所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗，以避免影响实验结果。１)孵箱应定期用三氧机消毒或者紫外光照射，并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水；２)超净台\取材\器材\培养液\培养瓶\操作等因素；３)超净台的风机不能过大，风机到６-８格。否则也可能能致霉菌污染；４)无菌室经甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的喷洒中和，约几小时即可进入操作。
细胞生长：贴壁
Bat lung细胞类似产品：：LTEP-sm细胞、SHI1细胞、H-187细胞
AA-Mel细胞类似产品：：SW1463细胞、B10BR细胞、LN 229细胞
OsACL细胞类似产品：：Instituto Biologico-Rim Suino-2细胞、BT-20细胞、H-2170细胞
Caco2-BBE细胞类似产品：：Hs729细胞、C33-A细胞、H-4-II-E细胞
MA-c细胞类似产品：：Hs 695T细胞、NR 8383细胞、Pa017C细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
C8161 Cell|人黑色素瘤细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)
传代的操作步骤注意事项：1)操作前要洗手，进入超净台后手要用75%酒精或0.2%新洁尔灭擦试。试剂等瓶口也要擦试。2)点燃酒精灯，操作在火焰附近进行，耐热物品要经常在火焰上烧灼，金属器械烧灼时间不能太长，以免退火，并冷却后才能夹取组织，吸取过营养液的用具不能再烧灼，以免烧焦形成碳膜。3)操作动作要准确敏捷，但又不能太快，以防空气流动，增加污染机会。4)不能用手触已消毒器皿的工作部分，工作台面上用品要布局合理。5)瓶子开口后要尽量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。贴壁细胞传代的操作步骤：1)吸除培养瓶内旧培养液。2)向瓶内加入胰蛋白酶和EDTA混合液少许，以能覆满瓶底为限。3)置温箱中2-5分钟，当发现细胞质回缩，细胞间隙增大后，立即终止消化。4)吸除消化液，向瓶内注入Hanks液数毫升，轻轻转动培养瓶，把残余消化液冲掉。注意加Hanks液冲洗细胞时，动作要轻，以免把已松动的细胞冲掉流失，如用胰蛋白酶液单独消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液冲洗，直接加入培养液。5)用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。6)计数板计数后，把细胞悬液分成等份分装入数个培养瓶中，置温箱中培养。悬浮细胞传代的操作步骤：1)吸出细胞培养液，放入离心管中，离心1000rpm5分钟。2)吸掉上清液，加入适量之新鲜培养基，混和均匀后，依稀释比例转移至新的培养瓶中，以正常培养条件培养。
HOSEpiC细胞类似产品：：Toledo细胞、Hs-27细胞、P-36细胞
SNU620细胞类似产品：：NCI-H196细胞、NCI-H1838细胞、DU-145细胞
LY-R细胞类似产品：：EJ1细胞、A498细胞、Colon-26细胞
Central Adrenergic TH-expressing a细胞类似产品：：MPC-11细胞、H-128细胞、LAPC4细胞
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性：贴壁
细胞系永生化原理介绍：多数正常细胞的寿命是有限的，能传20-100代，但有些细胞，尤其是来自啮齿类或来自多数肿瘤的细胞，可以产生具有无限寿命的连续细胞系。啮齿类动物细胞在分离时核型是正常的，在传到12代左右以后可能出现危相，多数细胞在这个阶段死亡了，但少数细胞存活下来，并拥有了更GAO的生长率，成为连续细胞系。目前认为永生化是一个多步骤的过程，包括一系列细胞周期的调节基因(如Rb和p53)失活。目前主要从两个方向进行操作，病毒基因致永生化和端粒酶诱导的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于诱导永生化。这个基因的产物-T抗原，可与Rb和p53结合。这样不仅使细胞增殖的寿命得以延长，同时也限制了如p53这样基因的DNA监控活性，从而使基因组的不稳定性增加，也增加了向永生化发展的进一步突变的机会(如上调端粒酶或下调端粒酶抑制物的活性)。用含可调节启动子的端粒酶基因进行转染，足以形成永生化细胞。这些基因中已被广泛应用的有：EBV用于淋巴母细胞样细胞；SV40 LT用于黏附细胞，如成纤维细胞(Mayne et al., 1996)、 角质形成细胞(Steinberg,1996) 和内皮细胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT则用于间充质干细胞和其他一些细胞。
Kit225 K6细胞类似产品：：2780细胞、PA12细胞、NCI-H508细胞
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C8161 Cell|人黑色素瘤细胞
BALB/3T3 clone A31细胞类似产品：：CHO-ori细胞、RC-2细胞、LS-174细胞
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