"MKN74 Cell|人胃癌细胞
细胞背景资料:胃癌;女性
细胞形态:上皮细胞样
细胞接收操作说明:请仔细阅读本操作说明及相应的细胞说明书。本公司细胞发货有四种形式:T25培养瓶(一般是贴壁细胞使用,悬浮细胞也可以)、离心管(悬浮细胞使用多,当然,有些公司也会用这种离心管形式发贴壁细胞,但是,长期经验来说,贴壁细胞容易发生形态变化,估计是细胞培养空间狭小,血清不足导致(Zui主要是怕运输延误导致这些情况发生),个人不建议用离心管形式发贴壁细胞)及干冰(冻存细胞用,主要是冬天天气冷,温度低于4℃的地方,都要考虑冻存细胞)。T25培养瓶:是用T25细胞培养瓶直接发货的形式。收到细胞后,拆开包装T25培养瓶的自封袋,不拆封口膜,表面喷75%酒精消毒后显微镜观察细胞状态(有条件可以拍下此时细胞照片)。将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上,再处理细胞。首先将T25中培养基取出装HAO备用,如细胞密度GAO于80%,可以直接消化传代,相反则加入5-6ml培养基放回培养箱继续培养即可。离心管:是用15ml离心管发货的形式,只用于悬浮细胞发货。收到细胞后消毒处理及将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上,再处理细胞。首先将T25中培养基取出装HAO备用(如果实验室没有T25培养瓶,可以暂时T75培养瓶,加入10-15ml培养基,建议10ml培养基,也可以使用T175培养瓶,加入50-60ml培养基,培养瓶越大,需要的培养基越多。当然如果刚接收到细胞密度不够的话,ZuiHAO不用大瓶子,先用小瓶子养起来再换大的,不然会长得很慢,严重的,会导致细胞死亡等危险),平衡完成后,离心(1000rpm,3min)收集细胞,弃上清,用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中,放回培养箱继续培养。干冰:是用本公司冻存液冻存细胞后,直接用干冰将冻存的细胞冷冻发货的形式。收到细胞后按照细胞复苏的步骤操作即可。
细胞生长:贴壁
OAW-42细胞类似产品::SKNDZ细胞、Granta519细胞、NCIH2085细胞
HAC-84细胞类似产品::Panc-3_27细胞、KYSE30细胞、JHH7细胞
A549-Taxol细胞类似产品::MLM细胞、HT144mel细胞、Tu177细胞
Hs695T细胞类似产品::Rat Basophilic Leukemia-1细胞、H-35细胞、COV-362细胞
OCI-Ly 10细胞类似产品::KYSE 520细胞、HIT clone T15细胞、QGY7701细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
MKN74 Cell|人胃癌细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题,客户遇到的问题从细胞生长角度来说,针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因,我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因:细胞本身的状态》1)细胞传代次数多,细胞老化;2)细胞的接种量:接种量过低,细胞生长缓慢;3)细胞传代时间过晚:细胞中毒,影响传代后的细胞生长;4)胰酶消化时间过长或过短:时间过长,细胞死亡;时间过短,细胞未完全分离而成团,细胞死亡;5)细胞的冻存与复苏:慢冻速融。污染:1)支原体污染;2)霉菌污染;培养基或血清:1)更换血清或培养基之前未进行验证;2)选择的培养基是否合适;3)培养基配制是否准确无误;培养环境:1)CO2供应是否正常;2)培养箱或摇床温度控制是否正确;解决方法:根据以上四个方面的可能原因,做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态:如传代次数、接种量等;2)避免产生污染(用正规、合法、可溯源的血清);3)要用合适的血清或培养基,ZuiHAO经过验证;4)注意实验室的环境;二、培养细胞死亡》可能原因:1)培养箱内无CO2;2)培养箱内温度波动太大;3)细胞冻存或复苏过程中损伤;4)培养液渗透压不正确;5)培养液中有毒代谢产物堆积;解决方法:1)检测培养箱内CO2;2)检查培养箱内温度;3)取新的保存细胞种;4)检测培养液渗透压;5)换入新鲜培养液。
NCI-H1238细胞类似产品::NCI-H1668细胞、BAC1.2F5细胞、SKMEL-31细胞
SNU-C2A细胞类似产品::AAV293细胞、SNU-354细胞、SNU-5细胞
OCIAML3细胞类似产品::BetaTC6细胞、GM2132细胞、HS-5细胞
Ly19细胞类似产品::CRFK细胞、SuperTube细胞、NB9细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性:贴壁
细胞系永生化原理介绍:多数正常细胞的寿命是有限的,能传20-100代,但有些细胞,尤其是来自啮齿类或来自多数肿瘤的细胞,可以产生具有无限寿命的连续细胞系。啮齿类动物细胞在分离时核型是正常的,在传到12代左右以后可能出现危相,多数细胞在这个阶段死亡了,但少数细胞存活下来,并拥有了更GAO的生长率,成为连续细胞系。目前认为永生化是一个多步骤的过程,包括一系列细胞周期的调节基因(如Rb和p53)失活。目前主要从两个方向进行操作,病毒基因致永生化和端粒酶诱导的永生化,其原理如下:SV40 LT基因常用于诱导永生化。这个基因的产物-T抗原,可与Rb和p53结合。这样不仅使细胞增殖的寿命得以延长,同时也限制了如p53这样基因的DNA监控活性,从而使基因组的不稳定性增加,也增加了向永生化发展的进一步突变的机会(如上调端粒酶或下调端粒酶抑制物的活性)。用含可调节启动子的端粒酶基因进行转染,足以形成永生化细胞。这些基因中已被广泛应用的有:EBV用于淋巴母细胞样细胞;SV40 LT用于黏附细胞,如成纤维细胞(Mayne et al., 1996)、 角质形成细胞(Steinberg,1996) 和内皮细胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT则用于间充质干细胞和其他一些细胞。
SO-RB50细胞类似产品::U118-MG细胞、NP69SV40T细胞、H-660细胞
MADB 106细胞类似产品::HCT FET细胞、KMS18细胞、KMS18细胞
Normal Rat, August 3, 1983细胞类似产品::HL-60 clone15细胞、Rat 1细胞、HOK细胞
FL 62891细胞类似产品::HL60细胞、NCI-SNU-216细胞、KPL-1细胞
OCILY-3细胞类似产品::Hs 888Lu细胞、Walker/LLC-WRC256细胞、P3X63 Ag8.653细胞
MCAEC细胞类似产品::GM15452细胞、293T细胞、McA-RH 7777细胞
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PC 61 5.3细胞类似产品::NE1-E6E7细胞、ST2细胞、HT 1197细胞
RSC-96细胞类似产品::SKRC-52细胞、769-P细胞、SUM 52PE细胞
MKN74 Cell|人胃癌细胞
293 Ad5细胞类似产品::MO59J细胞、639V细胞、NCIADR.RES细胞
RCC10 RGB细胞类似产品::HCC1187细胞、HEC-1B细胞、Rat Skin 1细胞
Hs821T细胞类似产品::ATC241细胞、HCC2279细胞、MZ-CRC-1细胞
L- cell细胞类似产品::UMR 106细胞、32D CL3细胞、SK MEL-28细胞
Hs 739.T细胞类似产品::U138-MG细胞、HUVSMC细胞、OVCA 432细胞
JJN-3细胞类似产品::HOC1细胞、CW2细胞、UMUC14细胞
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NCI-H2405细胞类似产品::MDA-MB-134VI细胞、OV3121细胞、MHHCALL2细胞
NCI-H1770细胞类似产品::SKGIIIA细胞、HuH28细胞、TK.10细胞
Balb/c3T3细胞类似产品::IPLB-SF 21AE细胞、DLM8细胞、BL6细胞
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MO59J细胞类似产品::PIG3细胞、LICR-LON-HN6细胞、TE7细胞
Keio University-19-19细胞类似产品::SF539细胞、RPMI no 8226细胞、IHH-4细胞
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KU-19-19细胞类似产品::MM1.S细胞、SK-NEP-1细胞、HT细胞
ME16C细胞类似产品::NCI-H250细胞、Hs-611-T细胞、3T3J2细胞
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OVCAR 8细胞类似产品::CCRF-CEM/S细胞、Ball 1细胞、JIMT细胞
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RPPVEC细胞类似产品::H209细胞、HCT FET细胞、UACC893细胞
H187细胞类似产品::NCI-H748细胞、TE-7细胞、H2342细胞
KNS42细胞类似产品::MV4II细胞、HCC0095细胞、NCI-H526细胞
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Ly18细胞类似产品::NCIH28细胞、TC-1 [Mouse lung]细胞、P3.times.63 Ag8.653细胞
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