"SACC-LM Cell|涎腺腺样囊性癌细胞
细胞背景资料:涎腺腺样囊性癌
细胞形态:上皮细胞样
体内细胞培养及其操作步骤:【瘤细胞悬液接种】1)无菌选取生长良HAO(有光泽,淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞;2)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨,经80~100目筛网过滤成细胞悬液;3)培养细胞应用PBS洗两遍;4)计数并调整细胞浓度至107~108/ml;5)常规消毒后,于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(0.1ml/部位,>106细胞)。初次接种成功率低,细胞数尽可能多一些;6)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期,以后随着传代潜伏期逐渐缩短,Zui后固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤细胞,将这种腹水反复传代,即可成为腹水瘤。初次传代时,腹水常呈血性(含大量红细胞),反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。1)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤,进行细胞计数;2)消毒动物,左下腹穿刺接种106腹水瘤细胞;3)接种腹水瘤细胞后约7~12d,待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9号针头抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水经3000rpm离心15min,收集上清,分装冻存备用。
细胞生长:贴壁
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ECV304细胞类似产品::Transformed C3H Mouse Kidney-1细胞、RCC10 RGB细胞、RSMC细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
SACC-LM Cell|涎腺腺样囊性癌细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞培养过程中,总是会出现各种意想不到的问题,一不留神就会全盘皆输。所谓细胞虐我千百遍,我待细胞如初恋。下面是贴壁细胞的保藏方法,希望对细胞培养初学操作者有所帮助:1)观察细胞状态:贴壁细胞密度达到85-90%,即可以细胞冻存形式进行保藏,拍照,记录细胞状态;2)细胞清洗:培养皿表面消毒后,转移至生物安全柜中,去除培养皿中培养液,加入12mlPBS,轻轻摇晃培养皿清洗细胞,随后吸除PBS清洗液;3)细胞消化:将2ml胰酶加入培养皿中,完全覆盖细胞,置于显微镜下观察(期间禁止摇晃培养皿),当细胞刚开始脱落时,立即转移至生物安全柜中,除去大部分胰酶,剩余约0.5ml胰酶,转移至培养箱内继续消化,每30秒肉眼观察细胞状态,至细胞成流沙状完全脱落,转移至生物安全柜中,加入12ml完全培养基,终止消化;4)细胞离心:将终止消化后的细胞悬液吹打均匀,吸取至15ml离心管中,1000r/min(110g),离心3min;5)细胞冻存:离心后去除细胞上清液,按照冻存细胞量5*10^5/ml,吸取冻存液重悬细胞沉淀,吹打均匀后分装至相应的冻存管中,进行冻存;6)细胞保藏:冻存管做HAO标记,放至程序降温盒中,于4℃冰箱放置30min,转移至-80℃超低温冰箱过夜,将过夜后的冻存细胞转移至液氮中保藏。
MCA 205细胞类似产品::SW 1417细胞、Vero-E6细胞、SCL1细胞
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SUM-159细胞类似产品::NCI-H1341细胞、HS5细胞、JurkatE6-1细胞
HBL-100细胞类似产品::NS-I/1细胞、SKMel-28细胞、Hs27细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性:贴壁
细胞系永生化原理介绍:多数正常细胞的寿命是有限的,能传20-100代,但有些细胞,尤其是来自啮齿类或来自多数肿瘤的细胞,可以产生具有无限寿命的连续细胞系。啮齿类动物细胞在分离时核型是正常的,在传到12代左右以后可能出现危相,多数细胞在这个阶段死亡了,但少数细胞存活下来,并拥有了更GAO的生长率,成为连续细胞系。目前认为永生化是一个多步骤的过程,包括一系列细胞周期的调节基因(如Rb和p53)失活。目前主要从两个方向进行操作,病毒基因致永生化和端粒酶诱导的永生化,其原理如下:SV40 LT基因常用于诱导永生化。这个基因的产物-T抗原,可与Rb和p53结合。这样不仅使细胞增殖的寿命得以延长,同时也限制了如p53这样基因的DNA监控活性,从而使基因组的不稳定性增加,也增加了向永生化发展的进一步突变的机会(如上调端粒酶或下调端粒酶抑制物的活性)。用含可调节启动子的端粒酶基因进行转染,足以形成永生化细胞。这些基因中已被广泛应用的有:EBV用于淋巴母细胞样细胞;SV40 LT用于黏附细胞,如成纤维细胞(Mayne et al., 1996)、 角质形成细胞(Steinberg,1996) 和内皮细胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT则用于间充质干细胞和其他一些细胞。
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SACC-LM Cell|涎腺腺样囊性癌细胞
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YD-15细胞类似产品::Ketr3细胞、NSC34细胞、Panc-10.05细胞
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CORL23细胞类似产品::DoTc2细胞、Madin Darby Bovine Kidney细胞、RF/6A细胞
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FRTL-5细胞类似产品::Hs-675-T细胞、P3X63Ag8.653细胞、SO-RB50细胞
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