"HCEC-B4G12 Cell|人角膜内皮细胞
细胞背景资料:角膜;内皮细胞;SV40转化;女性
细胞形态:上皮细胞样
【细胞培养中原虫的污染情况总结】原虫:培养液可轻微浑浊,显微镜下那些细小的点状物数量非常多,轻微活动,细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢,而且细胞状态不HAO,边缘不清楚,细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的,但他们的数量小,细胞站YOU势所以不会影响到细胞的正常生长,只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长,Zui终形成恶性循环。污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等关于培养基的无菌状况,取培养基至培养瓶中(不加细胞),37度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长就是操作的问题。也可以在培养基中事先加入双抗(酸链霉素和苄青霉素)。但双抗有时会影响细胞的状态,所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗,以避免影响实验结果。1)孵箱应定期用三氧机消毒或者紫外光照射,并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水;2)超净台\取材\器材\培养液\培养瓶\操作等因素;3)超净台的风机不能过大,风机到6-8格。否则也可能能致霉菌污染;4)无菌室经甲醛熏蒸消毒后,可用同等量的喷洒中和,约几小时即可进入操作。
细胞生长:贴壁
WI-38细胞类似产品::RD细胞、LMTK-细胞、OCI-AML3细胞
SKNSH细胞类似产品::OVCAR 432细胞、MG63细胞、COLO 684细胞
HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞类似产品::RPMI8402细胞、TE13细胞、Hs 274.T细胞
NSC-34细胞类似产品::CMK细胞、H-2198细胞、Hep G2-Luc细胞
NUGC2细胞类似产品::NCI-H2126细胞、NCI-H865细胞、NCI-SNU-423细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
HCEC-B4G12 Cell|人角膜内皮细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
悬浮细胞不容易转染:悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长,如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染,其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂,脂质体转染是基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞内,而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞GAO出很多倍,所以,脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次,脂质体试剂的毒性较大,这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外,悬浮细胞不易培养,易死亡,也给细胞转染造成了一定的困难。为了提GAO悬浮细胞的转染效率,可以使用非脂质体的转染试剂,如纳米材料的。也可以使用电转染方法,针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的,电击对细胞有一定的损伤,ZuiHAO选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂,可以将电击对细胞的伤害降到Zui低,悬浮细胞不易转染,选对试剂及良HAO的细胞培养环境才是关键。
NB.4细胞类似产品::FHL 124细胞、OV-90细胞、FDCP1细胞
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KPL4细胞类似产品::GT1-1细胞、WML2细胞、ABC1细胞
JB-6 Cl 30细胞类似产品::U-343 MG细胞、EC-109细胞、V79细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性:贴壁
细胞系永生化原理介绍:多数正常细胞的寿命是有限的,能传20-100代,但有些细胞,尤其是来自啮齿类或来自多数肿瘤的细胞,可以产生具有无限寿命的连续细胞系。啮齿类动物细胞在分离时核型是正常的,在传到12代左右以后可能出现危相,多数细胞在这个阶段死亡了,但少数细胞存活下来,并拥有了更GAO的生长率,成为连续细胞系。目前认为永生化是一个多步骤的过程,包括一系列细胞周期的调节基因(如Rb和p53)失活。目前主要从两个方向进行操作,病毒基因致永生化和端粒酶诱导的永生化,其原理如下:SV40 LT基因常用于诱导永生化。这个基因的产物-T抗原,可与Rb和p53结合。这样不仅使细胞增殖的寿命得以延长,同时也限制了如p53这样基因的DNA监控活性,从而使基因组的不稳定性增加,也增加了向永生化发展的进一步突变的机会(如上调端粒酶或下调端粒酶抑制物的活性)。用含可调节启动子的端粒酶基因进行转染,足以形成永生化细胞。这些基因中已被广泛应用的有:EBV用于淋巴母细胞样细胞;SV40 LT用于黏附细胞,如成纤维细胞(Mayne et al., 1996)、 角质形成细胞(Steinberg,1996) 和内皮细胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT则用于间充质干细胞和其他一些细胞。
TSU-Pr1细胞类似产品::H1568细胞、COLO-829细胞、R.K.13细胞
159PT细胞类似产品::NCI-H2122细胞、SuDHL 8细胞、CCD-1112sk细胞
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HCEC-B4G12 Cell|人角膜内皮细胞
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WiDr-TC细胞类似产品::Los Angeles Prostate Cancer-4细胞、SUM-190PT细胞、WIL2 Secreting细胞
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X63细胞类似产品::MPASMC细胞、C8-D1A细胞、SU4细胞
H2141细胞类似产品::Reuber H-35细胞、LP-1细胞、NCI-Hut 125细胞
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RGB细胞类似产品::RL细胞、LTEP a2细胞、SK-MES细胞
EOC20细胞类似产品::COV-434细胞、AgC11x3A细胞、Madin-Darby Canine Kidney细胞
HCEC-B4G12 Cell|人角膜内皮细胞
OE-19细胞类似产品::Nthy-ori 3.1细胞、CTLA4Ig-24细胞、JM-1细胞
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BJ1细胞类似产品::MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞、T241细胞、NCI-H510A细胞
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JROECL21细胞类似产品::OsA-CL细胞、HCMEC(BL12-H)细胞、EBC-1/original细胞
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