"WEHI-279:小鼠淋巴瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:悬浮
冻存和复苏的原则:慢冻快融》当细胞冷到零度以下,可以产生以下变化:细胞器脱水,细胞中可溶性物质浓度升GAO,并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻,可使细胞逐步脱水,细胞内不致产生大的冰晶;相反,结晶就大,大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序:采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时,1~2℃/min;当温度达-25℃以下时,5~10℃/min;当温度达-100℃时,可迅速放入液氮中。2.简易程序:将冷冻管(管口要朝上)放入纱布袋内,纱布袋系以线绳,通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口,按每分钟温度下降1~2℃的速度,在40min内降至液氮表面过夜,次晨投人液氮中。3.传统程序:冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。细胞冻存方法:1.预先配制冻存液》(1)8%DMSO+细胞生长液(92%血清)2.取对数生长期细胞,经胰酶消化后,加入适量冻存液,用吸管吹打制成细胞悬液(1×10(6)~5×10(6)细胞/ml)。3.加入1ml细胞于冻存管中,密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法:1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后,立即放入37℃水浴中,轻轻摇动冷冻管,使其在1分钟内全部融化(不要超过3分钟)。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养,24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液,以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂,然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
OE-19细胞类似产品::Nthy-ori 3.1细胞、CTLA4Ig-24细胞、JM-1细胞
HCC0038细胞类似产品::U-373MG细胞、Hs688(A)T细胞、J-774细胞
ESC-410细胞类似产品::HOS-143B细胞、FOXNY细胞、HANK-1细胞
HSC-I细胞类似产品::NCI-H69细胞、Co 205细胞、HKC细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:详见相关文献介绍
WEHI-279:小鼠淋巴瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:淋巴母细胞样
HCV-29细胞类似产品::E.L.4细胞、NCI-H-295细胞、Hmy.2 CIR细胞
Hs-578T细胞类似产品::MV411细胞、SGC-996细胞、H-2126细胞
BJA-B-1细胞类似产品::GES1细胞、OVCAR-10细胞、SLMT-1细胞
细胞培养方面注意的几点:无菌意识要强:实验进行前,超净台以紫外灯照射30分钟灭菌,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启超净工作台风扇运转数分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置,其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以70%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域,一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基:不同的细胞可能培养基不同,甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞,有文献就选用neurobase培养基,而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而这种培养基中含有抗氧化剂成分,此时,我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:4℃冰箱全溶后再分装,在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到56℃后,将血清放入,待温度升GAO到56℃后计时,一般5分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须,一般不要作此热处理,因为会造成沉淀物之显著增多,且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
细胞传代后放入培养箱没有摇匀,或者放入时摇匀,但在细胞贴壁前,又移动了培养瓶,频繁开关培养箱引起的振动或者培养瓶中培养液过少,培养箱搁板表面不平整,这些因素会导致细胞生长不均匀。研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。运输过程对细胞有严重影响。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C 太久。一些悬浮细胞抱团生长是正常现象,大部分悬浮细胞在细胞密度很GAO的情况下,很可能会出现部分细胞抱团生长的现象,聚团细胞很容易死亡并演化成絮状物,殃及周围的悬浮细胞,因此在培养悬浮细胞时需控制HAO细胞密度。如果出现了细胞团,可以通过细胞筛去掉部分较大的细胞团,也可以尝试一下方法:将细胞悬液收集到15ml离心管中,静置20min左右,小心取上层细胞上清培养(该方法只能去除部分较大的细胞团)。部分细胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐药株等),这个是正常现象。如果只有少数细胞有内出现极少空泡,则很可能是细胞状态不佳,可以通过调整血清浓度,控制消化,控制传代比例及时间等方法来调整细胞状态;如果大部分细胞出现空泡,且单个细胞内空泡数目偏多,则可能细胞代次较GAO,细胞老化所致,需更换代次较早的细胞。
HCPEpiC细胞类似产品::PT-67细胞、NCIH2172细胞、C2-C12细胞
HEK-EBNA细胞类似产品::SK-ES细胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436细胞
NCIH1437细胞类似产品::H1385细胞、Madison lung细胞、PL11细胞
PC615.3细胞类似产品::HCC827细胞、LIM1215细胞、BEL7402细胞
NRK 49F细胞类似产品::MCA205细胞、YAC-1细胞、T-CAM2细胞
SNU-16细胞类似产品::2E8细胞、JurkatE6-1细胞、X63-Ag8.653细胞
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LAN6细胞类似产品::TE-8细胞、AD-293细胞、U373细胞
NCIH1930细胞类似产品::Hs888Lu细胞、LLC1细胞、NCI-H676细胞
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Tb1Lu细胞类似产品::J-774细胞、SUM-52细胞、BE(2)C细胞
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LS411N细胞类似产品::H-510细胞、GM2219C细胞、MC-CAR细胞
IHC-ST1细胞类似产品::Be-Wo细胞、H-3255细胞、HPC-Y5细胞
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SMA 560细胞类似产品::HPAF-II细胞、H2444细胞、I90细胞
DI TNC-1细胞类似产品::MXI细胞、KP-4细胞、SW948细胞
NCI-H2110细胞类似产品::E6-1细胞、G-292 clone A141B1细胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1细胞
SK-ES细胞类似产品::LK 2细胞、Emory University-3细胞、U-138 MG细胞
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190PT细胞类似产品::Hs 888.T细胞、OCM1A细胞、Calu 3细胞
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NIH:OVCAR3细胞类似产品::NRK 52E细胞、Epstein-Barr-2细胞、SR细胞
NCI-H2196细胞类似产品::MA-104细胞、6-10B细胞、H-1915细胞
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NIH-OVCAR-3细胞类似产品::251 MG细胞、Mono-Mac-6细胞、High-5细胞
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Me-Wo细胞类似产品::CEM细胞、HO1-N-1细胞、SW837细胞
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HS-68细胞类似产品::HCC-1438细胞、CCD-112 CoN细胞、ChaGo-K-1细胞
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SK MES 1细胞类似产品::OVCAR.3细胞、D-283MED细胞、LNCaP C4-2细胞
H-4-II-E细胞类似产品::8505C细胞、SNUC2A细胞、U-373-MG细胞
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NCI-H157细胞类似产品::Tu 212细胞、KG-1细胞、Hx147细胞
J.E6-1细胞类似产品::JROECL 33细胞、MCF-10A细胞、Sp2/0-Ag-14细胞
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H-1792细胞类似产品::Detroit 562细胞、NTERA-2 clone D1细胞、HuPT3细胞
HPAF2细胞类似产品::EB-2细胞、NCI-H1373细胞、NCIH358细胞
RCC 7860细胞类似产品::COLO-205细胞、WEHI231细胞、CAKI 2细胞
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675T细胞类似产品::L-428细胞、VM-CUB-I细胞、FRTL 5细胞
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MDA-MB-175-VII细胞类似产品::SW-1463细胞、KOSC2细胞、NB.4细胞
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MLA144细胞类似产品::HCA7细胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]细胞、Scott and White No. 13细胞
WEHI-279:小鼠淋巴瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
SK-NSH细胞类似产品::COV-362细胞、HCC 38细胞、C4-1细胞
Vero 76细胞类似产品::SK-N-BE(1)细胞、HM细胞、PG-4 S+L-细胞
P-388细胞类似产品::ACC-3细胞、SKNBE2细胞、HLF细胞
3T3-Swiss albino细胞类似产品::RPTEC/TERT1细胞、SVG(P12)细胞、ANA-1细胞
GalK 1细胞类似产品::Homo sapiens No. 578, breast cells细胞、HEB细胞、WiDr细胞
NCIH1781细胞类似产品::Jijoye细胞、NRK52E细胞、Sarcoma OSteogenic-2细胞
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