"JVM-3:人慢性髓白血病复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:悬浮
可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气的,大家争取做到因材施教,比如试试下面的“四步消化法”。(以难消化细胞为例),具体操作:1)首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍(目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉)。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。(你可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了)3)吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况把握)。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
Pro-5 Lec1.3c细胞类似产品::HuH28细胞、VM Cub 1细胞、HS-294T细胞
NCI-H1436细胞类似产品::LNCaP FGC细胞、V79细胞、H2087细胞
NCI.H522细胞类似产品::PG-4 (S+L-)细胞、GM03573A细胞、NS1-1 Ag4.1细胞
PLC-8024细胞类似产品::aTC1-6细胞、BT-B细胞、AMC-HN8细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:慢性髓白血病;女性
JVM-3:人慢性髓白血病复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:淋巴母细胞样
EM-3细胞类似产品::WERI-Rb-1细胞、SUP T1细胞、CNE-2细胞
HGC-27细胞类似产品::FLS细胞、H510细胞、Roswell Park Memorial Institute 7951细胞
SO-RB50细胞类似产品::U118-MG细胞、NP69SV40T细胞、H-660细胞
培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染),在冻存前1d换液;2)按常规方法把培养细胞制备成悬液,计数,使细胞密度达5×10/ml左右密度,离心,去上清;3)加入配制HAO的冻存液(培养液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10%二甲基亚砜(DMSO)或甘油,可使冰点降低,使细胞内水分在冻结前透出细胞外;4)分装于无菌冻存管中,每管加1.5m悬液;5)旋HAO冻存管并仔细检查,一定要盖紧,做HAO标记;6)冻存:在殊的仪器或简易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min时间内,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度,过快能影响细胞内水分透出,太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套,以免液氮冻伤。【复苏细胞】1)从罐中取出冻存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不时摇动,使其急速融化,30~60s内完成;3)冻存管用70%酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10ml培养液;4)低速离心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培养液洗一次;5)用培养液适当稀释后,装入培养瓶37℃培养,次日更换一次培养液后,继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分,密度应达到10/ml,在融后稀释20倍时,仍能保持5×10/ml数量。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
JVM-3:人慢性髓白血病复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性:悬浮
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良HAO,当补液时,需避免反复吹打。
QGY7703细胞类似产品::Jurkat77细胞、PK-15细胞、SuDHL 5细胞
HFE-145细胞类似产品::VSMC细胞、H1876细胞、T 84细胞
OVHM细胞类似产品::MV-522细胞、NCIH1963细胞、H9c2(2-1)细胞
NCIH847细胞类似产品::SUPM2细胞、Pa16C细胞、H23细胞
NCIH2081细胞类似产品::74Int细胞、HPAFII细胞、Homo sapiens No. 578, breast cells细胞
RL-952细胞类似产品::B16细胞、BEND细胞、TE3A细胞
NK-92细胞类似产品::WPMY1细胞、CAL-62细胞、MDA-MB-361细胞
MSF细胞类似产品::H2227细胞、U87-MG细胞、Panc 10.05细胞
SW403细胞类似产品::V-79细胞、no-11细胞、6T-CEM细胞
L-1210细胞类似产品::Cattle chondrocytes细胞、3T3J2细胞、MJ细胞
AU565细胞类似产品::BV2细胞、COLO-741细胞、RL-952细胞
CCD-112CoN细胞类似产品::PC-3M 2B4细胞、EHEB细胞、RPMI 8402细胞
FTC-133细胞类似产品::SNU-C1细胞、SNU-251细胞、NSC34细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16细胞类似产品::EFM19细胞、DHL-2细胞、U937细胞
PE CA PJ34细胞类似产品::H-716细胞、H-2286细胞、U-hth74细胞
H-2227细胞类似产品::HT1197细胞、HUT 125细胞、J.E6-1细胞
H-2227细胞类似产品::HT1197细胞、HUT 125细胞、J.E6-1细胞
OVCA432细胞类似产品::KU 19-19细胞、REC-1细胞、H-838细胞
RT112细胞类似产品::RS4;11细胞、P 815细胞、HaCaT细胞
OCI/AML-5细胞类似产品::EC-GI-10细胞、253J-Bladder-V细胞、MHCC97-H细胞
HCV 29细胞类似产品::Ly19细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5细胞、OSRC2细胞
N-Tera-2细胞类似产品::RBL-2H3细胞、IEC 18细胞、PC-3M IE8细胞
F-36P细胞类似产品::Hepa 1-6细胞、NB9细胞、PLMVEC细胞
MDAPCa2b细胞类似产品::TE3细胞、JM1细胞、Lieming Xu-2细胞
JVM-3:人慢性髓白血病复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
NCIH2085细胞类似产品::Hs840T细胞、Mino细胞、IEC6细胞
SKLU-1细胞类似产品::SK-Mel1细胞、WEHI 3细胞、D283-MED细胞
SKLU-1细胞类似产品::SK-Mel1细胞、WEHI 3细胞、D283-MED细胞
H82细胞类似产品::FRTL-5细胞、H596细胞、OCM-1细胞
NCI-157细胞类似产品::KP-N-RT细胞、NCIH378细胞、HCC0038细胞
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ZR751细胞类似产品::PK (15)细胞、DI TNC1细胞、CHP-212细胞
COLO 357细胞类似产品::MB-49细胞、PC 61-5-3细胞、AR42J细胞
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NCI-H2066细胞类似产品::Panc_08_13细胞、Hs606T细胞、3T3细胞
Me-Wo细胞类似产品::CEM细胞、HO1-N-1细胞、SW837细胞
CL 1-5细胞类似产品::PANC-1细胞、H-1563细胞、IBMF-7细胞
CHP 126细胞类似产品::H-23细胞、OVCAR.3细胞、Cates-1B细胞
SK-N-BE-2细胞类似产品::ID8/MOSEC细胞、BpRc1细胞、SK-CO-1细胞
NG 108-15细胞类似产品::GM03569B细胞、MDA-MB-436细胞、A431细胞
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NCIH1568细胞类似产品::THEECs细胞、118 MG细胞、RPMC细胞
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2780细胞类似产品::aTC1 Clone 6细胞、T-47D细胞、HCC-1428细胞
BRL3A细胞类似产品::WEHI-164细胞、NTera-2D1细胞、COLO-205细胞
THP-1(ATCC)细胞类似产品::J.E6-1细胞、BLO-11细胞、Vero 76细胞
P3X63 Ag8细胞类似产品::H-2291细胞、FCCH1024细胞、SU-DHL6细胞
RC-2细胞类似产品::HR-1细胞、HPDE细胞、OKT3细胞
HEK293T/17细胞类似产品::SKNSH细胞、University of Arizona Cell Culture-893细胞、SUM149PT细胞
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RT-4细胞类似产品::CCRFCEM细胞、HPDE6c7细胞、ASH-3细胞
PANC-04-03细胞类似产品::MPC-83细胞、ADR-RES细胞、H-II-E-C3细胞
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DH82细胞类似产品::IM-95细胞、SUDHL16细胞、CCRF/CEM细胞
CHO细胞类似产品::MT-2细胞、T98细胞、U-118 MG细胞
OVHM细胞类似产品::MV-522细胞、NCIH2291细胞、GP2-293细胞
Vero C1008细胞类似产品::COLO 206F细胞、SU 86.86细胞、TW01细胞
X63Ag8.653细胞类似产品::HT144mel细胞、Leydig细胞、SW-962细胞
Panc02细胞类似产品::P815细胞、KTA-7细胞、CHOS细胞
IPEC1细胞类似产品::SKNBE2C细胞、hFOB细胞、Mel526细胞
TE 671细胞类似产品::SCC15细胞、RT4细胞、SACCLM细胞
TOV21G细胞类似产品::Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4细胞、PANC-1细胞、SNU398细胞
TE-85细胞类似产品::Calf Pulmonary Artery 47细胞、MDCK Type II细胞、COLO-320细胞
EAhy 926细胞类似产品::SU86_86细胞、SK-MES-1细胞、huH 1细胞
OVCAR8细胞类似产品::RCC4细胞、SKRC-39细胞、Panc4.03细胞
Michigan Cancer Foundation-7细胞类似产品::WM-239细胞、Hs 888Lu细胞、SW-13细胞
NCI-128细胞类似产品::SL1细胞、SW 48细胞、NCIH1651细胞
FHL124细胞类似产品::GCT0404细胞、MADISON LUNG TA-109细胞、HeLa-229细胞
HRCEC细胞类似产品::Calu3细胞、McArdle RH-7777细胞、OCI-Ly 10细胞
KP 4细胞类似产品::Saos2细胞、D341Med细胞、CCD 19Lu细胞
BJAB细胞类似产品::COLO 320 DM细胞、SK-N-BE(2)-M17细胞、tdott细胞
P3-NS1/1Ag 4.1细胞类似产品::SIRC细胞、VERO C 1008细胞、H-2122细胞
CMT167细胞类似产品::NS1/1-Ag4.1细胞、LIM-1215细胞、MC/CAR细胞
SK-N-BE细胞类似产品::ROS 17/2.8细胞、CCD841CoN细胞、KYSE-410细胞
AtT20细胞类似产品::U138MG细胞、HS-766T细胞、PA12细胞
Okayama University Medical School-23细胞类似产品::OC-316细胞、H-2108细胞、ELD-1细胞
Okayama University Medical School-23细胞类似产品::OC-316细胞、H-2108细胞、ELD-1细胞
HCCC-9810细胞类似产品::ES2细胞、CAL-148细胞、MDA-MB-231细胞
COR-L26细胞类似产品::EJ 138细胞、Psi2 DAP细胞、JB-6细胞
A375-SM细胞类似产品::RT4-D6-P2T细胞、HepG2细胞、NCI-H165细胞
HCC1419细胞类似产品::Lymph Node Carcinoma of the prostate细胞、LC-1Sq细胞、SK-RC 52细胞
Strain KB细胞类似产品::6-T CEM细胞、RPMI 8226细胞、H-1792细胞
V79-4细胞类似产品::LAN5细胞、Tissue Culture-1细胞、HPAFII细胞
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BetaTC6细胞类似产品::NIH-OVCAR-3细胞、Hs895.T细胞、A-172细胞
Anglne细胞类似产品::COC1/CDDP细胞、HO-8910 PM细胞、GM03573细胞
OCLY8细胞类似产品::PF-382细胞、Hs940T细胞、U251MG细胞
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MiaPaca.2细胞类似产品::MGHU1细胞、L-428细胞、MDA-MB-330细胞
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D283MED细胞类似产品::Lu99A细胞、HEK293S细胞、DoTc2细胞
JVM-3:人慢性髓白血病复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
PL-5细胞类似产品::CCRF-CEM细胞、UACC-893细胞、NTera2 cl.D1细胞
GM04154细胞类似产品::NE-1细胞、PC9细胞、CEL细胞
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Tb1.Lu细胞类似产品::CPA47细胞、H-1869细胞、L363细胞
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