"KHYG-1:人NK细胞淋巴瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:悬浮
可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气的,大家争取做到因材施教,比如试试下面的“四步消化法”。(以难消化细胞为例),具体操作:1)首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍(目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉)。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。(你可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了)3)吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况把握)。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
SKM-1细胞类似产品::HGMC细胞、GM00637H细胞、L cells细胞
Hs940T细胞类似产品::A549/ATCC细胞、OCI AML5细胞、SGC-996细胞
LNCaP FGC细胞类似产品::H446细胞、SMC-1细胞、H1092细胞
H510细胞类似产品::OCI-LY-1细胞、BEL7404细胞、IMR-90细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:NK细胞淋巴瘤/白血病;女性
KHYG-1:人NK细胞淋巴瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:淋巴母细胞样
alpha-TC1-6细胞类似产品::SW-527细胞、CTV-1细胞、SLK细胞
HAVSMC细胞类似产品::HCC95细胞、P3/NS1/1-Ag4-1细胞、Colon-38细胞
PTK 2细胞类似产品::COLO 699细胞、NS1-Ag4/1细胞、hCMEC/D3细胞
细胞培养方面注意的几点:无菌意识要强:实验进行前,超净台以紫外灯照射30分钟灭菌,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启超净工作台风扇运转数分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置,其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以70%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域,一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基:不同的细胞可能培养基不同,甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞,有文献就选用neurobase培养基,而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而这种培养基中含有抗氧化剂成分,此时,我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:4℃冰箱全溶后再分装,在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到56℃后,将血清放入,待温度升GAO到56℃后计时,一般5分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须,一般不要作此热处理,因为会造成沉淀物之显著增多,且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性:悬浮
细胞传代后放入培养箱没有摇匀,或者放入时摇匀,但在细胞贴壁前,又移动了培养瓶,频繁开关培养箱引起的振动或者培养瓶中培养液过少,培养箱搁板表面不平整,这些因素会导致细胞生长不均匀。研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。运输过程对细胞有严重影响。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C 太久。一些悬浮细胞抱团生长是正常现象,大部分悬浮细胞在细胞密度很GAO的情况下,很可能会出现部分细胞抱团生长的现象,聚团细胞很容易死亡并演化成絮状物,殃及周围的悬浮细胞,因此在培养悬浮细胞时需控制HAO细胞密度。如果出现了细胞团,可以通过细胞筛去掉部分较大的细胞团,也可以尝试一下方法:将细胞悬液收集到15ml离心管中,静置20min左右,小心取上层细胞上清培养(该方法只能去除部分较大的细胞团)。部分细胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐药株等),这个是正常现象。如果只有少数细胞有内出现极少空泡,则很可能是细胞状态不佳,可以通过调整血清浓度,控制消化,控制传代比例及时间等方法来调整细胞状态;如果大部分细胞出现空泡,且单个细胞内空泡数目偏多,则可能细胞代次较GAO,细胞老化所致,需更换代次较早的细胞。
P3HRI细胞类似产品::SCL I细胞、CCF-STTG1细胞、MDST8细胞
SKBr3细胞类似产品::Hs-281-T细胞、HFTF细胞、OAW 42细胞
SO-RB50细胞类似产品::U118-MG细胞、NP69SV40T细胞、H-660细胞
UMUC-3细胞类似产品::P388D1细胞、Psi-2 DAP细胞、MOLT 16细胞
GOS3细胞类似产品::NCIH660细胞、H-28细胞、LAN-1细胞
MCF 10A细胞类似产品::OCI-Ly01细胞、HBdSMC细胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2细胞
Hs 888.T细胞类似产品::SPDC-CCL141细胞、LC-MS细胞、TCC-PAN2细胞
H-1944细胞类似产品::SNB.19细胞、H-35细胞、Rat 2细胞
H-250细胞类似产品::H520细胞、Functional Liver Cell-7细胞、OUMS-27细胞
Hu-P-T3细胞类似产品::OCM1细胞、NCI-H28细胞、526mel细胞
RCSMC细胞类似产品::OVCAR.8细胞、H-2073细胞、LAN-5细胞
RPMI No. 1846细胞类似产品::NCI-H2081细胞、MDA-MB-231 #4175细胞、SK-OV-3细胞
MC-4细胞类似产品::SUIT2细胞、PTK-2细胞、CAL-85-1细胞
SKCO 1细胞类似产品::TE32细胞、JJN3细胞、MDA-MB 231细胞
Ketr3细胞类似产品::HRA19细胞、VE细胞、RPMI7666细胞
Walker256细胞类似产品::NCI-H1993细胞、kms 11细胞、624mel细胞
PG-4细胞类似产品::SuDHL 5细胞、786-O细胞、Karpas299细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-415细胞类似产品::GM17219细胞、UACC-812细胞、D-324 Med细胞
MOLM-16细胞类似产品::McA-RH8994细胞、Hs 766T细胞、L-428细胞
KY70细胞类似产品::MC3T3-E1 Subclone 4细胞、SNU398细胞、Malme-3M细胞
IPEC-J2细胞类似产品::NT2细胞、Det. 562细胞、ACC-M细胞
G361mel细胞类似产品::VP 267细胞、HCC-202细胞、HPB/ALL细胞
HuCCT-1细胞类似产品::T-98细胞、AR-42J细胞、RPMI1788细胞
MPP 89细胞类似产品::KY180细胞、Sp 2/0-Ag 14细胞、INS1细胞
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PLCPRF5细胞类似产品::SCL-II细胞、QBC939细胞、L929(NCTC)细胞
SKGT2细胞类似产品::Hs 895 T细胞、SK LU 1细胞、TE 32细胞
SL-29细胞类似产品::MB39细胞、LED-WiDr细胞、E0771细胞
H-1563细胞类似产品::NCI-H2023细胞、MIN6细胞、NCIH1568细胞
MPC 11细胞类似产品::KLE细胞、H1105细胞、SEG-1细胞
ACC-2细胞类似产品::NCIH226细胞、U373 MG细胞、Pt K1 (NBL-3)细胞
SP2-0-Ag14细胞类似产品::KNS-81细胞、Toledo细胞、MHH-CALL2细胞
RK13细胞类似产品::CCLP1细胞、AMJ2C8细胞、H-2444细胞
HuH7细胞类似产品::CAL-120细胞、MeT 5A细胞、M 1细胞
PL 45细胞类似产品::RK 13细胞、HC-11细胞、Human Embryo Lung-1细胞
HN-6细胞类似产品::ANA-1细胞、MDA-MB 453细胞、OSA细胞
NCIH64细胞类似产品::Colo-201细胞、HL-1细胞、HOP62细胞
SNGM细胞类似产品::H2009细胞、RT4-D6-P2T细胞、293-FT细胞
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C57 Mouse Tumor 64细胞类似产品::BALB/3T3细胞、MDAPCa2b细胞、RT-4细胞
H-810细胞类似产品::SKRC-42细胞、COLO-320DM细胞、H 9细胞
B16 subline B78细胞类似产品::SKMEL-2细胞、DMS-273细胞、CALU1细胞
A10细胞类似产品::SK-MEL2细胞、alphaTC clone 6细胞、OV90细胞
MV4-11细胞类似产品::EBTr (NBL-4)细胞、AC16 [Human hybrid]细胞、SKLU01细胞
CWR22R细胞类似产品::EAhy926细胞、A72细胞、SK_N_BE2C细胞
NBLS细胞类似产品::CEF细胞、RT-BM 1细胞、RK 13细胞
T24(ECV304)细胞类似产品::Porcine Kidney-15细胞、Panc 3.27细胞、DI TNC-1细胞
MOLP8细胞类似产品::D341MD细胞、LX-2细胞、McCoy B细胞
UM2细胞类似产品::Pt K1 (NBL-3)细胞、MDA-MB-435S细胞、Molm 14细胞
SBC-5细胞类似产品::SACC-LM细胞、Soleus clone 8细胞、253J-Bladder-V细胞
M109细胞类似产品::JAR细胞、RGC5细胞、Hs895.T细胞
SCC 9细胞类似产品::MLE-12细胞、SK-MEL-24细胞、GM03671C细胞
H-2141细胞类似产品::67NR细胞、TK10细胞、bEND.3细胞
C32 [Human melanoma]细胞类似产品::T/GHA-VSMC细胞、WC00097细胞、SCC-15细胞
NCIH250细胞类似产品::NCIH322细胞、8305-C细胞、SNU-761细胞
DI TNC-1细胞类似产品::MXI细胞、KP-4细胞、SW948细胞
Hx147细胞类似产品::343 MG细胞、BJAB细胞、COLO 394细胞
Michigan Cancer Foundation-12F细胞类似产品::HBL 100细胞、HRCEC细胞、WM-2664细胞
LSECs细胞类似产品::NCI-H295细胞、QGY7701细胞、DHL10细胞
ABE8.1/2细胞类似产品::Bovine ENDometrial cells细胞、RC-K8细胞、FL 62891细胞
ZR75-1细胞类似产品::MSB-1细胞、MMAc-SF细胞、H1373细胞
L929细胞类似产品::NCI-H1792细胞、HuT 78细胞、MDCKII-WT细胞
SO-RB50细胞类似产品::U118-MG细胞、Nthy-ori 3-1细胞、32D.3细胞
SuDHL 2细胞类似产品::DH 82细胞、Ly7细胞、H378细胞
Neuro2a细胞类似产品::DKMG细胞、IPAM-WT细胞、H-1651细胞
LUDLU-1细胞类似产品::HOP62细胞、SY5Y细胞、NCIH1734细胞
CEMC1细胞类似产品::DK-MG细胞、H9c2 (2-1)细胞、MDCK.2细胞
MMAc-Serum Free细胞类似产品::OCI-Ly18细胞、TE-4细胞、KTCTL140细胞
SUDHL5细胞类似产品::T98-G细胞、NEC-8细胞、KP 4细胞
D-324MED细胞类似产品::SF 539细胞、A-875细胞、OE-33细胞
SKMES1细胞类似产品::MG63细胞、NU-GC-4细胞、SW-982细胞
HEK-293细胞类似产品::Ramos 2G6.4C10细胞、OCI-Ly19细胞、NPA'87细胞
Murine Carcinoma-38细胞类似产品::SNU-739细胞、95-D细胞、87MG细胞
Dx5细胞类似产品::NCI-UMC-11细胞、Saos2细胞、GT39细胞
Hs 819.T细胞类似产品::MPVECs细胞、NU-GC-3细胞、M3 Clone M-3细胞
3-LL细胞类似产品::CCD 966 SK细胞、SRS-82细胞、SW-954细胞
KMBC细胞类似产品::MKN-28细胞、TE 85 ClF-5细胞、Neukoplast细胞
NCIH28细胞类似产品::SJRH 30细胞、Tu 177细胞、3 LL细胞
JOSK-M细胞类似产品::SKNO-1细胞、Colo699细胞、HcaF细胞
OVCAR433细胞类似产品::BEL/FU细胞、HBZY-1细胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2细胞
SK-MEL-31细胞类似产品::CHO cell clone K1细胞、Centre Antoine Lacassagne-39细胞、PC 61.5.3细胞
MGHU1细胞类似产品::WM2664细胞、MDA-MB-415细胞、RC-K8细胞
H-2196细胞类似产品::HTori 3细胞、PANC3.27细胞、C1R细胞
NCI-H82细胞类似产品::VSC4.1细胞、PT67细胞、H2108细胞
H1694细胞类似产品::beta TC6细胞、TE671细胞、CCRF/CEM/0细胞
Anip 973细胞类似产品::OE21细胞、CCD-966SK细胞、Co 115细胞
JVM3细胞类似产品::NCI-SNU-761细胞、MDA-MB-231细胞、SH-SY5Y细胞
NCI-H2126细胞类似产品::NCIH1651细胞、BNL-HCC细胞、H-441细胞
HEK-293-F细胞类似产品::201T细胞、NCI-H1048细胞、STO细胞
NCI-H2195细胞类似产品::Menschliche Und Tierische Zellkulture-3细胞、HEK 293 EBNA细胞、VMCUB1细胞
Mino细胞类似产品::EoL-1-cell细胞、LM6细胞、RPMI.8226细胞
SKBR-3细胞类似产品::RPMI 1846细胞、NCIH2085细胞、RT-BM-1细胞
Vero C1008细胞类似产品::COLO 206F细胞、SU 86.86细胞、TW01细胞
OPM2细胞类似产品::KP-N-YN细胞、SKRC 39细胞、RSC-364细胞
SMMC7721细胞类似产品::CTLA4Ig-24细胞、C-6细胞、GM07404细胞
AG06814-J细胞类似产品::BAC1.2F5细胞、Pt K2细胞、LWnt-3A细胞
LTEP-s细胞类似产品::IEC6细胞、CCRF-CEM/S细胞、TR 146细胞
SIRC细胞类似产品::YD-15细胞、RPE-hTERT细胞、NIH 3T3细胞
Rainbow Trout Embryo细胞类似产品::SupB15W细胞、BOWES细胞、TOG细胞
Panc-8_13细胞类似产品::HUV-EC-C细胞、KMST6细胞、NCIH838细胞
HTR8svn细胞类似产品::HCC-9204细胞、Panc3_27细胞、HT-144细胞
WSUDLCL2细胞类似产品::CCC-HPF-1细胞、TE 32细胞、LAN5细胞
HS-766-T细胞类似产品::HuCCT-1细胞、COLO 394细胞、ONS-76细胞
PC-3/M细胞类似产品::184A1细胞、NCM356细胞、H1155细胞
GM01232E细胞类似产品::P3.times.63 Ag8.653细胞、CATH.a细胞、RS 4;11细胞
Cor L88细胞类似产品::NCI-H1573细胞、SW-900细胞、CV1细胞
Ramos-RA1细胞类似产品::H-740细胞、H2052_MM细胞、870细胞
KHYG-1:人NK细胞淋巴瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
CCRF-CEM细胞类似产品::SNU-601细胞、ZR-75-1细胞、OCLY8细胞
MRC-V细胞类似产品::Human Pancreatic Duct Epithelial细胞、HSC 3细胞、HO8910细胞
Normal Rat Kidney-49F细胞类似产品::A-172MG细胞、Tu177细胞、HCC-1419细胞
HCT FET细胞类似产品::NBLAN5T细胞、MDCK supertube细胞、HO1-N-1细胞
RT4P细胞类似产品::Hep 3B2细胞、DMS153细胞、FRhK-4细胞
CAKI1细胞类似产品::Anip 973细胞、159 PT细胞、HTR8svn细胞
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