"MOLM-13:人急性髓系白血病复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:悬浮
绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可。吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足够消化细胞。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37℃消化。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育。不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化HAO了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常HAO,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个性。如果和标准形态不一致,那可能是自己没消化HAO导致的,但如果消化方法正确,仍然成片分布,甚至完全吹打成单细胞悬液,贴壁后仍然成片分布,这是细胞的性,是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布,你的细胞之后会对你越来越不HAO。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
RS 4;11细胞类似产品::MPC5细胞、H-1404细胞、D-341 Med细胞
H-510细胞类似产品::LC-2 ad细胞、FHL124细胞、SK-BR3细胞
WEHI 164细胞类似产品::HFLS-OA细胞、H-250细胞、Neuro-2a细胞
HCC-1428细胞类似产品::BNL-CL.2细胞、HFL1细胞、130-T细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:急性髓系白血病;男性
MOLM-13:人急性髓系白血病复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:淋巴母细胞样
BEL 7402细胞类似产品::HTR-8/SVneo细胞、SW403细胞、NT-2细胞
PC-3细胞类似产品::Lec1细胞、C57 Mouse Tumor 93细胞、H2141细胞
HEK-293 c18细胞类似产品::brain-derived Endothelial cells.3细胞、Caki2细胞、GES-1细胞
细胞传代注意事项:①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次ZuiHAO只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材;②每天观察细胞形态,掌握HAO细胞是否健康的标准:健康细胞的形态饱满,折光性HAO,生长致密时即可传代;③如发现细胞有污染迹象,应立即采取措施,一般应弃置污染的细胞,如果必须挽救,可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗,随后培养基中加入较大量的抗生素,并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持:细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的点,要做HAO建系的维持必须记录HAO细胞档案,换液传代和做HAO细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性:悬浮
细胞传代后放入培养箱没有摇匀,或者放入时摇匀,但在细胞贴壁前,又移动了培养瓶,频繁开关培养箱引起的振动或者培养瓶中培养液过少,培养箱搁板表面不平整,这些因素会导致细胞生长不均匀。研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。运输过程对细胞有严重影响。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C 太久。一些悬浮细胞抱团生长是正常现象,大部分悬浮细胞在细胞密度很GAO的情况下,很可能会出现部分细胞抱团生长的现象,聚团细胞很容易死亡并演化成絮状物,殃及周围的悬浮细胞,因此在培养悬浮细胞时需控制HAO细胞密度。如果出现了细胞团,可以通过细胞筛去掉部分较大的细胞团,也可以尝试一下方法:将细胞悬液收集到15ml离心管中,静置20min左右,小心取上层细胞上清培养(该方法只能去除部分较大的细胞团)。部分细胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐药株等),这个是正常现象。如果只有少数细胞有内出现极少空泡,则很可能是细胞状态不佳,可以通过调整血清浓度,控制消化,控制传代比例及时间等方法来调整细胞状态;如果大部分细胞出现空泡,且单个细胞内空泡数目偏多,则可能细胞代次较GAO,细胞老化所致,需更换代次较早的细胞。
ECV 304细胞类似产品::SK-MEL24细胞、NCI-H596细胞、THLE-2细胞
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NSC-34细胞类似产品::CMK细胞、FRhK-4细胞、SKRC 39细胞
H-1563细胞类似产品::NCI-H2023细胞、MIN6细胞、NCIH1568细胞
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Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A细胞类似产品::H128细胞、HASMC细胞、NCI-H1299细胞
HT3细胞类似产品::FDC-P1细胞、HEK293EBNA细胞、OK细胞
MIO-M1细胞类似产品::PL12细胞、OCI/AML2细胞、ZR7530细胞
Sp2/O-Ag14细胞类似产品::MUVEC细胞、SJ-RH30细胞、H-87细胞
MOLM-13:人急性髓系白血病复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
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L929(NCTC)细胞类似产品::C-26细胞、GP-293细胞、AHH1细胞
HRA 19细胞类似产品::Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative细胞、NCI-H2444细胞、L02细胞
H-1915细胞类似产品::S180细胞、NPC-TW039细胞、Pt-K2细胞
HeLa-229细胞类似产品::HEK 293T/17细胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]细胞、SP2/0 Ag-14细胞
SUM159PT细胞类似产品::DMS153细胞、KMH2细胞、BJA-B-1细胞
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