"KG-1a:人急性骨髓白血病复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:悬浮
可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气的,大家争取做到因材施教,比如试试下面的“四步消化法”。(以难消化细胞为例),具体操作:1)首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍(目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉)。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。(你可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了)3)吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况把握)。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
OE-33细胞类似产品::MEC1细胞、Hs 934.T细胞、KM12 SM细胞
MC3T3细胞类似产品::P3-NS1/1-Ag4-1细胞、Panc 02细胞、COLO 201细胞
HT1376细胞类似产品::RH30SJ细胞、RL-65细胞、NK62a细胞
Hs839T细胞类似产品::U-87MG ATCC细胞、PANC0203细胞、SK-Hep1细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:急性髓系白血病;男性
KG-1a:人急性骨髓白血病复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:淋巴母细胞样
NTERA2细胞类似产品::NBL-4细胞、NK-92 MI细胞、SW 1353细胞
SU-DHL6细胞类似产品::HuT78细胞、NCI-H661细胞、IOSE-29细胞
EST81细胞类似产品::HCC-1954细胞、WB-F344细胞、OVCAR.3细胞
常见培养细胞预防污染的有效措施:体外培养的细胞受到严重污染时,有时即使想尽各种办法也难以挽回。因此,防止污染,预防是关键。只有将预防措施贯穿于整个细胞培养的始终,才能将发生污染的可能性降到Zui小程度。一般预防可从以下几方面着手:1)添加抗生素:各种抗生素性质不同,对各种微生物的作用也不同,联合应用比单用效果HAO,预防性应用比污染后使用HAO(但迄今尚无对抗支原体抗生素)。但反复使用抗生素会使微生物产生耐药性,且对细胞本身也有一定影响,因此为避免诱导抗药细菌,应定期更换培养系统中的抗生素,或尽可能不用抗生素处理;2)从物品、用品消毒灭菌着手:细胞培养所用物品清洗、消毒要彻底,各种溶液灭菌除菌要仔细,并在取样检菌一周后确认无菌才能使用。同时,在无菌过滤操作中,随着滤过体积的增大,滤膜破损的可能性增加,故应选择Zui后过滤的液体进行检测。定期对二氧化碳培养箱进行消毒。具体操作:75%的酒精搽拭培养箱后,使用可移动的紫外灯至少消毒30min,加入GAO压灭菌过的超纯水于培养箱水槽中保持湿度。也可配制300ml的饱和酸铜加3L灭菌超纯水混合成酸铜溶液加入水槽中。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
KG-1a:人急性骨髓白血病复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性:悬浮
传代24h-48h处于对数期的细胞,在冻存前24h换液;按照常规方法消化,离心,收集细胞沉淀;用血清重悬细胞沉淀,用血球计数板或者细胞计数仪进行细胞计数;配制细胞冻存液,将冻存液加到细胞液中,吹打混匀,控制细胞密度为2×10(6)-5×10(6)/ml;将细胞悬液按照1ml/支分装至已标记HAO的冻存管中,旋紧管盖;将冻存管放入程序冻存盒中,冻存盒立即移至-80°C冰箱中,过夜后将冻存细胞移至液氮中长期保存。冻存管内细胞数目一般不低于2x10(6)cells/ml/vial,融合瘤细胞则以5x10(6)cells/ml/vial为宜。细胞冻存和复苏遵循“慢冻快溶”的原则。取出冷冻管后,须立即放入37°C水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化,并注意水面不可超过冷冻管盖沿,否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时,必须注意安全,预防冷冻管之爆裂。细胞冻存时细胞状态不佳,会严重影响复苏时细胞的活率。一般选择处于对数生长期的细胞进行冻存,冻存前一天细胞ZuiHAO进行换液;消化过度也会严重影响细胞冻存后复苏的活率;冻存细胞时为按照温度梯度进行操作,会严重影响细胞活率。
PL45细胞类似产品::4T1细胞、NHDF细胞、Centre Antoine Lacassagne-12T细胞
D341MD细胞类似产品::SHI-1细胞、Verda reno细胞、COLO-320-HSR细胞
H125细胞类似产品::MOLM16细胞、LLC-WRC 256细胞、RPPVEC细胞
CT 26细胞类似产品::NCI/ADR-RES细胞、CMT 64细胞、GM-346细胞
KYSE70细胞类似产品::TF-1细胞、H-1838细胞、52PE细胞
FC33细胞类似产品::MonoMac1细胞、HEK-A细胞、AM38细胞
L-132细胞类似产品::CAL851细胞、EVSA/T细胞、OCI/AML5细胞
MC-3T3-E1细胞类似产品::NUGC-4细胞、Mo 59J细胞、NCI-SNU-182细胞
Hs 688(A).T细胞类似产品::SCC25细胞、E.G7-OVA细胞、SK LU 1细胞
SNU668细胞类似产品::Malme-3M细胞、H-446细胞、DU 4475细胞
Experimental Mammary Tumour-6细胞类似产品::TE 354.T细胞、bEND.3细胞、QGY7703细胞
RC-4B/C细胞类似产品::SW-948细胞、BA/F3细胞、SK Mel28细胞
Earle's L cells细胞类似产品::MGECs细胞、NCI-SNU-620细胞、JHH7细胞
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IM9细胞类似产品::Chang Cells细胞、W256细胞、FTC133细胞
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KYSE180细胞类似产品::RSC-96细胞、SU4细胞、JROECL21细胞
WM239细胞类似产品::GM03320D细胞、SNU-423细胞、TU 686细胞
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SV40-MES13细胞类似产品::KRC Y细胞、G519细胞、149 PT细胞
BAC1.2F5细胞类似产品::LAD-2细胞、HBVP细胞、VB细胞
BEL7405细胞类似产品::GDM1细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361细胞、CAL33细胞
SVG(P12)细胞类似产品::BPH1细胞、NCI-SNU-886细胞、COLO320-DM细胞
KG-1a:人急性骨髓白血病复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
Ej138细胞类似产品::Hi5细胞、MB-49细胞、G422细胞
Farage Original Line细胞类似产品::IOSE-Van细胞、HO1N1细胞、HEL 299细胞
MDA231-LM2细胞类似产品::NCI H716细胞、MA-782细胞、Reuber H-35细胞
CCRF-CEM/S细胞类似产品::Panc05.04细胞、PANC0403细胞、MLOY4细胞
SK-Mel 1细胞类似产品::Hs 683细胞、KYSE 140细胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1细胞
SNU601细胞类似产品::KYSE0030细胞、WiDr-TC细胞、KPNRTBM1细胞
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HCC 2185细胞类似产品::H-1930细胞、P3X63Ag8-6-5-3细胞、N2a细胞
L5178-R细胞类似产品::Karpas-299细胞、GM3190细胞、P3X63-Ag8.653细胞
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HCT-116细胞类似产品::TGW-I-nu细胞、HS 1.Tes细胞、HCET细胞
HO-8910PM细胞类似产品::3T6细胞、TYKnu细胞、T98G细胞
Caco-2 BBe细胞类似产品::RPMI 6666细胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a细胞、Colo-678细胞
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SNU-878细胞类似产品::HR8348细胞、OCI-Ly 1细胞、NCI-SNU-878细胞
SNU-878细胞类似产品::HR8348细胞、OCI-Ly 1细胞、NCI-SNU-878细胞
HASMC细胞类似产品::HOS TE 85细胞、LIPF178C细胞、OCI Ly1细胞
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NuTu 19细胞类似产品::RGE细胞、PT-K75细胞、HB611细胞
M-14细胞类似产品::SW626细胞、NIH 3T6细胞、BNL-CL.2细胞
SCC 4细胞类似产品::JTC-39细胞、RSC96细胞、Z-138细胞
16-HBEo细胞类似产品::Normal Rat Kidney-49F细胞、OSC-19细胞、NCIH1915细胞
HEK-293A细胞类似产品::ECV-304细胞、U-373 MG细胞、KPL-4细胞
HCC-2935细胞类似产品::746T细胞、MOLT4细胞、253JBV细胞
LC1-Sq细胞类似产品::SCI1细胞、NBL-2细胞、Pa17C细胞
LWnt-3A细胞类似产品::A549 ATCC细胞、Epstein-Barr-3细胞、DMS 114细胞
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HEK-293细胞类似产品::Ramos 2G6.4C10细胞、OCI-Ly19细胞、NPA'87细胞
CCRF/CEM-C7细胞类似产品::SLMT-1细胞、MKN-7细胞、H-1694细胞
LAN6细胞类似产品::TE-8细胞、SKNO1细胞、Pt-K1细胞
H1238细胞类似产品::Dysplastic Oral Keratinocyte细胞、Case 3细胞、293E细胞
COLO-320HSR细胞类似产品::UACC-812细胞、G-401细胞、NIH3T3细胞
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WM 239-A细胞类似产品::BCP1细胞、H-2106细胞、TE353.SK细胞
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IM95细胞类似产品::CORL279细胞、Nakata-1细胞、Panc_04_03细胞
MDA MB 361细胞类似产品::H3255_DA细胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1细胞、HFF-1细胞
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P3JHR-1细胞类似产品::SV40-MES13细胞、NCI-H920细胞、SKNBE细胞
MDAMB415细胞类似产品::293F细胞、SCL-I细胞、MDA436细胞
C3H10T1-2细胞类似产品::V79-1细胞、BT 325细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5细胞
XuanWei Lung Cancer-05细胞类似产品::GM 2132细胞、MFE 280细胞、R D细胞
IMR32细胞类似产品::Tu686细胞、TE8细胞、266 Bl细胞
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NCI-H1882细胞类似产品::HOPC细胞、SEM细胞、SKCO-1细胞
ARH77细胞类似产品::H-9细胞、SNU407细胞、P19细胞
ARH77细胞类似产品::H-9细胞、SNU407细胞、P19细胞
L615细胞类似产品::GM02132C细胞、KOSC-2细胞、Earles's cells细胞
HCC-94细胞类似产品::RPE D407细胞、8226/S细胞、H2081细胞
ROS 17/28细胞类似产品::A-427细胞、BpRcl细胞、Ly19细胞
H-358细胞类似产品::PC-3M细胞、H-2126细胞、MG-63细胞
P31-FUJ细胞类似产品::801-D细胞、HCT 15细胞、SL-29细胞
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CATHa细胞类似产品::KMB17细胞、GM 637细胞、GM 637细胞
UCD-MLA-144细胞类似产品::SW-900细胞、L132细胞、SK MEL 5细胞
CEK细胞类似产品::BEAS 2B细胞、HS 445T细胞、Calu-1细胞
Hs832T细胞类似产品::PA I细胞、SCL I细胞、mIMCD-3细胞
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PG [Human lung carcinoma]细胞类似产品::NCIH2009细胞、LWnt3A细胞、CL11细胞
PC3M细胞类似产品::BMSC/hBMSCs细胞、KM12SM细胞、PNT-1A细胞
KG-1a:人急性骨髓白血病复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
DI-TNC1细胞类似产品::SN12CPM6细胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21细胞、hEM15A细胞
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NIH 3T6细胞类似产品::CP70细胞、H1373细胞、SKNBE(2c)细胞
HFL-1细胞类似产品::CCRF-SB细胞、RCC10RGB细胞、H196细胞
Med 283细胞类似产品::MeT5A细胞、CHO-Lec1细胞、MS751细胞
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