"Loucy:人淋巴细胞白血病复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:悬浮
冻存和复苏的原则:慢冻快融》当细胞冷到零度以下,可以产生以下变化:细胞器脱水,细胞中可溶性物质浓度升GAO,并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻,可使细胞逐步脱水,细胞内不致产生大的冰晶;相反,结晶就大,大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序:采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时,1~2℃/min;当温度达-25℃以下时,5~10℃/min;当温度达-100℃时,可迅速放入液氮中。2.简易程序:将冷冻管(管口要朝上)放入纱布袋内,纱布袋系以线绳,通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口,按每分钟温度下降1~2℃的速度,在40min内降至液氮表面过夜,次晨投人液氮中。3.传统程序:冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。细胞冻存方法:1.预先配制冻存液》(1)8%DMSO+细胞生长液(92%血清)2.取对数生长期细胞,经胰酶消化后,加入适量冻存液,用吸管吹打制成细胞悬液(1×10(6)~5×10(6)细胞/ml)。3.加入1ml细胞于冻存管中,密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法:1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后,立即放入37℃水浴中,轻轻摇动冷冻管,使其在1分钟内全部融化(不要超过3分钟)。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养,24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液,以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂,然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
CCD18Co细胞类似产品::HLE B-3细胞、NCI-H1385细胞、HBL 100细胞
Tca-83细胞类似产品::Centre Antoine Lacassagne-33细胞、NCI-H1648细胞、NCI-H1355细胞
CF-1 MEF细胞类似产品::Centre Antoine Lacassagne-62细胞、RM1细胞、NCI-H-82细胞
H-1651细胞类似产品::A431/P细胞、SC1细胞、LTEP-sm细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:详见相关文献介绍
Loucy:人淋巴细胞白血病复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:淋巴母细胞样
RenCa细胞类似产品::NIE 115细胞、SVOG细胞、MT-2细胞
HOS-TE85细胞类似产品::SkMel31细胞、MS1细胞、OCI/AML-4细胞
SKLMS1细胞类似产品::SCLC-21H细胞、PLA 802细胞、L5178Y TK+/-3.7.2c细胞
细胞培养无菌操作的演示:凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用75%酒精擦拭瓶子的外表面;靠近酒精灯火焰操作。器皿使用前必须过火灭菌,继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在GAO处,使用时仍要过火。各种操作要靠近酒精灯,动作要轻、准确,不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管,防止交叉污染。玻璃器械洗消:一、新的玻璃器皿的洗消:自来水刷洗,除去灰尘。烘干、泡:烤箱中烘干,然后再浸入5%稀中12小时以除去脏物、铅、等物。刷洗、烘干:12小时后立即用自来水冲洗,再用洗涤剂刷洗,自来水冲干净后用烤箱烘干;泡酸、清洗:用清洁液浸泡12小时,然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗15次,Zui后蒸馏水冲洗3-5次和用双蒸水过3次。烘干、包装:洗干净后先烘干,然后用牛皮纸(油光纸)包装。GAO压消毒:包装HAO的器皿装入GAO压锅内盖HAO盖子,打开开关和安全阀,当蒸气成直线上升时,关闭安全阀,当指针指向15磅时,维持20-30分钟。GAO压消毒后烘干。二、旧的玻璃器皿的洗消:刷洗、烘干:使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中,泡过来苏尔溶液(洗涤剂)的器皿要用清水刷洗干净,然后烘干。泡酸、清洗:烘干后泡入清洁液(酸液),12小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗(避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗),再用蒸馏水冲洗3次。烘干、包装:洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸(油光纸)等包装。
细胞传代方法:2-3天换液1次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
Loucy:人淋巴细胞白血病复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性:悬浮生长
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良HAO,当补液时,需避免反复吹打。
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3细胞类似产品::HCC366细胞、CG4细胞、COLO-680N细胞
NCI-H322T细胞类似产品::Rh30细胞、H-660细胞、BC-PAP细胞
GM2219C细胞类似产品::AK细胞、HEK 293-EBNA细胞、Loucy细胞
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TOV112细胞类似产品::SKHEP-1细胞、DU145细胞、Hs683细胞
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Murine Lung Epithelial-12细胞类似产品::OCI-LY-10细胞、JEG3细胞、HBVP细胞
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Loucy:人淋巴细胞白血病复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
LUDLU1细胞类似产品::OCILY3细胞、CT-26 WT细胞、K562细胞
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Loucy:人淋巴细胞白血病复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
AN3细胞类似产品::Kasumi 1细胞、alpha TC1 clone 6细胞、MNNG/HOS Cl #5细胞
Panc 02.03细胞类似产品::HES [Human embryonic skin fibroblast]细胞、VK2/E6E7细胞、CCD-841CoN细胞
LCLC-103H细胞类似产品::Mouse Forestomach Carcinoma细胞、RPMI 7666细胞、PA-TU-8988S细胞
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PG [Human lung carcinoma]细胞类似产品::NCIH2009细胞、LWnt3A细胞、CL11细胞
LUDLU 1细胞类似产品::HCC9204细胞、CCD841CoTr细胞、NPC-TW-039细胞
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