"SK-MEL-3 Cell|人恶性黑色素瘤细胞
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
体内细胞培养及其操作步骤：【瘤细胞悬液接种】１)无菌选取生长良HAO(有光泽，淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞；２)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨，经８０～１００目筛网过滤成细胞悬液；３)培养细胞应用PBS洗两遍；４)计数并调整细胞浓度至１０７～１０８／ml；５)常规消毒后，于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(０.１ml／部位，＞１０６细胞)。初次接种成功率低，细胞数尽可能多一些；６)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期，以后随着传代潜伏期逐渐缩短，Zui后固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤细胞，将这种腹水反复传代，即可成为腹水瘤。初次传代时，腹水常呈血性(含大量红细胞)，反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。１)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤，进行细胞计数；２)消毒动物，左下腹穿刺接种１０６腹水瘤细胞；３)接种腹水瘤细胞后约７~１２d，待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９号针头抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水经３０００rpm离心１５min，收集上清，分装冻存备用。
细胞生长：贴壁
NCTC 929细胞类似产品：：Panc02.03细胞、HPMEC细胞、S3 HeLa细胞
HCC1954 BL细胞类似产品：：Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50细胞、LUDLU 1细胞、BIU-87/Adr细胞
MC3T3-E1 Subclone 14细胞类似产品：：P3/X63/Ag8.653细胞、DMS 273细胞、CHOS细胞
NCI-H1836细胞类似产品：：GRSL细胞、FHL 124细胞、SK-GT-4细胞
C1498细胞类似产品：：293 EBNA细胞、HuCC-T1细胞、GM17346细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
SK-MEL-3 Cell|人恶性黑色素瘤细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，ZuiHAO经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。
COLO-320-HSR细胞类似产品：：OVCA 433细胞、TERT-RPE1细胞、RPTEC/TERT1细胞
RPMI 1788细胞类似产品：：Ca Ski细胞、BIU-87/Adr细胞、GM637A细胞
LICR-LON-HN6细胞类似产品：：NW-38细胞、HOP-62细胞、H2023细胞
MB157细胞类似产品：：SNU-1细胞、18G3.cl 1细胞、SK-ChA-1细胞
细胞传代方法：１：３-１：５传代，２-３天换液１次。
细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性：贴壁生长
细胞系永生化原理介绍：多数正常细胞的寿命是有限的，能传20-100代，但有些细胞，尤其是来自啮齿类或来自多数肿瘤的细胞，可以产生具有无限寿命的连续细胞系。啮齿类动物细胞在分离时核型是正常的，在传到12代左右以后可能出现危相，多数细胞在这个阶段死亡了，但少数细胞存活下来，并拥有了更GAO的生长率，成为连续细胞系。目前认为永生化是一个多步骤的过程，包括一系列细胞周期的调节基因(如Rb和p53)失活。目前主要从两个方向进行操作，病毒基因致永生化和端粒酶诱导的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于诱导永生化。这个基因的产物-T抗原，可与Rb和p53结合。这样不仅使细胞增殖的寿命得以延长，同时也限制了如p53这样基因的DNA监控活性，从而使基因组的不稳定性增加，也增加了向永生化发展的进一步突变的机会(如上调端粒酶或下调端粒酶抑制物的活性)。用含可调节启动子的端粒酶基因进行转染，足以形成永生化细胞。这些基因中已被广泛应用的有：EBV用于淋巴母细胞样细胞；SV40 LT用于黏附细胞，如成纤维细胞(Mayne et al., 1996)、 角质形成细胞(Steinberg,1996) 和内皮细胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT则用于间充质干细胞和其他一些细胞。
293H细胞类似产品：：SMC-1细胞、HEK (AD293)细胞、MSB-1细胞
X63Ag8-653细胞类似产品：：HCMEC(BL12-H)细胞、HCCLM3细胞、GNM细胞
B16F1细胞类似产品：：870细胞、IPLB-Sf21细胞、BALB/3T3 cl. A31细胞
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Laboratory of Allergic Diseases 2细胞类似产品：：SU-DHL-1细胞、Hep 3B2_1-7细胞、GM-215细胞
3T6-Swiss albino细胞类似产品：：PC-9/S1细胞、STC-1细胞、G361细胞
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SK-MEL-3 Cell|人恶性黑色素瘤细胞
SW1990细胞类似产品：：SNU1040细胞、CACO2细胞、C-4I细胞
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KU 19-19细胞类似产品：：Bovine Turbinate细胞、NCIH2141细胞、Caco-2BBe细胞
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HCAEC细胞类似产品：：NCIH522细胞、H.Ep.-2细胞、PLC细胞
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JCA-1细胞类似产品：：NTC-200细胞、H-1975细胞、Fox/NY细胞
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QGY7701细胞类似产品：：U343细胞、CX1细胞、AM细胞
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ZR-75-1细胞类似产品：：H-522细胞、G-Olig2细胞、DMS-114细胞
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ECC1细胞类似产品：：MC3T3-E1 Subclone 24细胞、GM-3573细胞、DKMG细胞
H-716细胞类似产品：：CHL-IU细胞、KYSE140细胞、MGH-U3细胞
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SuDHL 8细胞类似产品：：ACC-M细胞、Duck embryo细胞、SK-MEL-28细胞
SK-MEL-3 Cell|人恶性黑色素瘤细胞
MLM细胞类似产品：：NCI-H1581细胞、NPA-87细胞、GM03320D细胞
Walker-256-TC细胞类似产品：：CWR22R细胞、EFM192细胞、MV(4;11)细胞
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CHAGOK1细胞类似产品：：Caov-3细胞、NCIH1417细胞、H322T细胞
KYSE 520细胞类似产品：：H2122细胞、RC-4B/C细胞、NCIH889细胞
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HCCC9810细胞类似产品：：Hs 840.T细胞、MEL细胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a细胞
Soleus clone 8细胞类似产品：：Rat Glomerular Endothelial细胞、HT 1080细胞、OCI-LY-10细胞
FHL-124细胞类似产品：：SK-MEL3细胞、SkChA-1细胞、LUDLU1细胞
Turbot Embryonic Cell line细胞类似产品：：RAOEC细胞、SKNEP细胞、Caco-2/BBe细胞
MOLP-2细胞类似产品：：NCI-H157细胞、H-510A细胞、HCC-2935细胞
LM TK negative细胞类似产品：：SW1088细胞、P3J细胞、HR1K细胞
AMC-HN-8细胞类似产品：：BEL7405细胞、HMSC细胞、SKMES-1细胞
SW 1088细胞类似产品：：NTera2/D1细胞、Hs888T细胞、ECV 304细胞
3T3-Swiss albino细胞类似产品：：RPTEC/TERT1细胞、SVG(P12)细胞、ANA-1细胞
Lewis-Lung细胞类似产品：：NCIH187细胞、CCRF细胞、HCC-1954细胞
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