"NCI-H2227 Cell|人小细胞肺癌细胞
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
细胞接收操作说明:请仔细阅读本操作说明及相应的细胞说明书。本公司细胞发货有四种形式:T25培养瓶(一般是贴壁细胞使用,悬浮细胞也可以)、离心管(悬浮细胞使用多,当然,有些公司也会用这种离心管形式发贴壁细胞,但是,长期经验来说,贴壁细胞容易发生形态变化,估计是细胞培养空间狭小,血清不足导致(Zui主要是怕运输延误导致这些情况发生),个人不建议用离心管形式发贴壁细胞)及干冰(冻存细胞用,主要是冬天天气冷,温度低于4℃的地方,都要考虑冻存细胞)。T25培养瓶:是用T25细胞培养瓶直接发货的形式。收到细胞后,拆开包装T25培养瓶的自封袋,不拆封口膜,表面喷75%酒精消毒后显微镜观察细胞状态(有条件可以拍下此时细胞照片)。将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上,再处理细胞。首先将T25中培养基取出装HAO备用,如细胞密度GAO于80%,可以直接消化传代,相反则加入5-6ml培养基放回培养箱继续培养即可。离心管:是用15ml离心管发货的形式,只用于悬浮细胞发货。收到细胞后消毒处理及将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上,再处理细胞。首先将T25中培养基取出装HAO备用(如果实验室没有T25培养瓶,可以暂时T75培养瓶,加入10-15ml培养基,建议10ml培养基,也可以使用T175培养瓶,加入50-60ml培养基,培养瓶越大,需要的培养基越多。当然如果刚接收到细胞密度不够的话,ZuiHAO不用大瓶子,先用小瓶子养起来再换大的,不然会长得很慢,严重的,会导致细胞死亡等危险),平衡完成后,离心(1000rpm,3min)收集细胞,弃上清,用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中,放回培养箱继续培养。干冰:是用本公司冻存液冻存细胞后,直接用干冰将冻存的细胞冷冻发货的形式。收到细胞后按照细胞复苏的步骤操作即可。
细胞生长:贴壁
HCC-78细胞类似产品::H358细胞、RPMC细胞、L-Wnt-3A细胞
RPMI 7951细胞类似产品::X63.Ag8.653细胞、H-1876细胞、MDAMB-231细胞
HELA-GFP细胞类似产品::251MG细胞、H-820细胞、YD38细胞
HRPEpiC细胞类似产品::HDQ-P1细胞、WERI细胞、JG细胞
Dami细胞类似产品::VeroC1008细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436细胞、LED-WiDr细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
NCI-H2227 Cell|人小细胞肺癌细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞培养时分布不均匀,通常操作步骤:做细胞生物学实验,细胞铺板大概是我们Zui常见的一个实验。但有时候铺得不是很均匀:要么中间密周围稀,要么周围密中间秃。下面为大家分享几点经验。尽量消化细胞分散成单细胞悬液。对于易于消化的细胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶润洗一遍(25cm2培养瓶或6孔板),弃掉胰酶,37度消化2-3分钟或室温消化5min左右,镜下观察是否细胞消化较为分散。如果不够,延长消化时间。96孔板一般以100微升每孔接种,直接用100微升移液器吸取细胞悬液,沿孔壁(稍离开一点孔底即可,不要离底太GAO)直接接入,移液器不需完全打到Zui大,轻轻按下即可,每铺完一行换一次枪头同时轻轻混匀细胞悬液。都加完后盖上盖子,左手轻轻扶住板的左边,右手轻轻敲击板的右边缘,注意把握力度(我一般轻巧敲三下),太强或次数太多会导致细胞集中成堆,将板顺时针旋转(逆时针效果不HAO),依次敲击剩余三个边,静置约5分钟,放入37度培养箱。6孔板、12孔板或24孔板,可采用将每个孔加入少量无血清培养基,晃动浸润整个孔底,然后用移液枪吸至第二孔,同样方法浸润孔底,其它孔依此类推,这样整个孔底都是湿润的,细胞悬液会平铺在整个孔底,注意加完细胞悬液后要放工作台静置一下。这个方法就是有点慢,但操作熟练了也不慢。也可以采用轻拍的方式,但力度没有96孔板HAO掌握,效果没有96孔板HAO。培养瓶里面加HAO细胞以后(比如传代HAO/分HAO细胞以后),先顺时针摇晃3次,马上逆时针摇晃3次。然后延X轴Y轴分别水平摇动3次。放入CO2培养箱后,平放着培养瓶重复延X轴Y轴分别水平摇动3次。
Vero C1008细胞类似产品::COLO 206F细胞、SU 86.86细胞、TW01细胞
M109细胞类似产品::JAR细胞、RGC5细胞、Hs895.T细胞
OCILY-3细胞类似产品::Hs 888Lu细胞、Walker/LLC-WRC256细胞、P3X63 Ag8.653细胞
COLO320-DM细胞类似产品::HuO9细胞、RBMEC细胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3细胞
细胞传代方法:1:2-1:4传代;每周换液2次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性:该细胞既有悬浮生长,又有贴壁生长
细胞系永生化原理介绍:多数正常细胞的寿命是有限的,能传20-100代,但有些细胞,尤其是来自啮齿类或来自多数肿瘤的细胞,可以产生具有无限寿命的连续细胞系。啮齿类动物细胞在分离时核型是正常的,在传到12代左右以后可能出现危相,多数细胞在这个阶段死亡了,但少数细胞存活下来,并拥有了更GAO的生长率,成为连续细胞系。目前认为永生化是一个多步骤的过程,包括一系列细胞周期的调节基因(如Rb和p53)失活。目前主要从两个方向进行操作,病毒基因致永生化和端粒酶诱导的永生化,其原理如下:SV40 LT基因常用于诱导永生化。这个基因的产物-T抗原,可与Rb和p53结合。这样不仅使细胞增殖的寿命得以延长,同时也限制了如p53这样基因的DNA监控活性,从而使基因组的不稳定性增加,也增加了向永生化发展的进一步突变的机会(如上调端粒酶或下调端粒酶抑制物的活性)。用含可调节启动子的端粒酶基因进行转染,足以形成永生化细胞。这些基因中已被广泛应用的有:EBV用于淋巴母细胞样细胞;SV40 LT用于黏附细胞,如成纤维细胞(Mayne et al., 1996)、 角质形成细胞(Steinberg,1996) 和内皮细胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT则用于间充质干细胞和其他一些细胞。
BT20细胞类似产品::OV-90细胞、MDAMB361细胞、PANC-04-03细胞
D-341 Med细胞类似产品::OVCAR8/ADR细胞、EOC-20细胞、HuCC-T1细胞
LA-N-6细胞类似产品::NCIH1781细胞、HLEC-SRA 01/04细胞、KLN 205细胞
COLO829细胞类似产品::HS-695T细胞、L-02细胞、H341细胞
Sci-1细胞类似产品::Anip-973细胞、EC-9706细胞、ECC 10细胞
NCIH727细胞类似产品::NCI-N87细胞、TN5B14细胞、SW1573细胞
P3/X63-Ag8细胞类似产品::MHCC 97细胞、MOVAS细胞、HCC-366细胞
NCI-H322细胞类似产品::CEM-T4细胞、MCA205细胞、BT 20细胞
WI 38细胞类似产品::GM-346细胞、MOLT-4细胞、Okayama University Medical School-27细胞
RH7777细胞类似产品::KALS-1细胞、HCC-827细胞、NCI-128细胞
NCI-H2227 Cell|人小细胞肺癌细胞
SK ES 01细胞类似产品::MKN45细胞、PSN-1细胞、NCI-H1385细胞
CA-OV-3细胞类似产品::HIT T15细胞、VK2 (E6/E7)细胞、L6565细胞
HCC 2185细胞类似产品::H-1930细胞、P3X63Ag8-6-5-3细胞、N2a细胞
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COLO-679细胞类似产品::TE-6细胞、H283细胞、3T3-442A细胞
EB-2细胞类似产品::Rainbow Trout Embryo细胞、U251n细胞、CHO-S细胞
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H-460细胞类似产品::GLC-82细胞、RT-4细胞、B16F0细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-361细胞类似产品::OCILY10细胞、RCC23细胞、CRFK细胞
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GP5d细胞类似产品::SKES-1细胞、OCI-AML2细胞、Vero细胞
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NHLF细胞类似产品::149PT细胞、A-1847细胞、Anglne细胞
OSRC2细胞类似产品::GL261细胞、Hep 3B2.1-7细胞、CA-OV-3细胞
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NCI-H2227 Cell|人小细胞肺癌细胞
WEHI-279细胞类似产品::P31FUJ细胞、LICCF细胞、PC14细胞
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细胞类似产品::NCIH1299细胞、SUP-B15细胞、C6细胞
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