"ARPE-19 Cell|人视网膜色素上皮细胞
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
体内细胞培养及其操作步骤:【瘤细胞悬液接种】1)无菌选取生长良HAO(有光泽,淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞;2)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨,经80~100目筛网过滤成细胞悬液;3)培养细胞应用PBS洗两遍;4)计数并调整细胞浓度至107~108/ml;5)常规消毒后,于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(0.1ml/部位,>106细胞)。初次接种成功率低,细胞数尽可能多一些;6)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期,以后随着传代潜伏期逐渐缩短,Zui后固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤细胞,将这种腹水反复传代,即可成为腹水瘤。初次传代时,腹水常呈血性(含大量红细胞),反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。1)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤,进行细胞计数;2)消毒动物,左下腹穿刺接种106腹水瘤细胞;3)接种腹水瘤细胞后约7~12d,待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9号针头抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水经3000rpm离心15min,收集上清,分装冻存备用。
细胞生长:贴壁
GM03320D细胞类似产品::TK.10细胞、HLEB3细胞、RH35细胞
H2171细胞类似产品::LS513细胞、MCF-7B细胞、CHOK1细胞
MC/9细胞类似产品::A7r5细胞、AMC-HN8细胞、U20-S细胞
HEC-1A细胞类似产品::Oka-C1细胞、H-740细胞、253JB-V细胞
EFO 27细胞类似产品::MIA-Pa-Ca-2细胞、COLO680N细胞、LLC-MK-2细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
ARPE-19 Cell|人视网膜色素上皮细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
传代的操作步骤注意事项:1)操作前要洗手,进入超净台后手要用75%酒精或0.2%新洁尔灭擦试。试剂等瓶口也要擦试。2)点燃酒精灯,操作在火焰附近进行,耐热物品要经常在火焰上烧灼,金属器械烧灼时间不能太长,以免退火,并冷却后才能夹取组织,吸取过营养液的用具不能再烧灼,以免烧焦形成碳膜。3)操作动作要准确敏捷,但又不能太快,以防空气流动,增加污染机会。4)不能用手触已消毒器皿的工作部分,工作台面上用品要布局合理。5)瓶子开口后要尽量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。贴壁细胞传代的操作步骤:1)吸除培养瓶内旧培养液。2)向瓶内加入胰蛋白酶和EDTA混合液少许,以能覆满瓶底为限。3)置温箱中2-5分钟,当发现细胞质回缩,细胞间隙增大后,立即终止消化。4)吸除消化液,向瓶内注入Hanks液数毫升,轻轻转动培养瓶,把残余消化液冲掉。注意加Hanks液冲洗细胞时,动作要轻,以免把已松动的细胞冲掉流失,如用胰蛋白酶液单独消化,吸除胰蛋白酶液后,可不用Hanks液冲洗,直接加入培养液。5)用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞,使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。6)计数板计数后,把细胞悬液分成等份分装入数个培养瓶中,置温箱中培养。悬浮细胞传代的操作步骤:1)吸出细胞培养液,放入离心管中,离心1000rpm5分钟。2)吸掉上清液,加入适量之新鲜培养基,混和均匀后,依稀释比例转移至新的培养瓶中,以正常培养条件培养。
SKG-IIIa细胞类似产品::IOSE80细胞、BC-019细胞、H-2196细胞
HBZY 1细胞类似产品::HOS-MNNG细胞、HEK-293F细胞、REC1细胞
Vx-2细胞类似产品::HuPT3细胞、GL-261细胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50细胞
CCD 966 SK细胞类似产品::A2780 CP70细胞、149PT细胞、BE2-C细胞
细胞传代方法:1:2传代
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性:贴壁生长
细胞系永生化原理介绍:多数正常细胞的寿命是有限的,能传20-100代,但有些细胞,尤其是来自啮齿类或来自多数肿瘤的细胞,可以产生具有无限寿命的连续细胞系。啮齿类动物细胞在分离时核型是正常的,在传到12代左右以后可能出现危相,多数细胞在这个阶段死亡了,但少数细胞存活下来,并拥有了更GAO的生长率,成为连续细胞系。目前认为永生化是一个多步骤的过程,包括一系列细胞周期的调节基因(如Rb和p53)失活。目前主要从两个方向进行操作,病毒基因致永生化和端粒酶诱导的永生化,其原理如下:SV40 LT基因常用于诱导永生化。这个基因的产物-T抗原,可与Rb和p53结合。这样不仅使细胞增殖的寿命得以延长,同时也限制了如p53这样基因的DNA监控活性,从而使基因组的不稳定性增加,也增加了向永生化发展的进一步突变的机会(如上调端粒酶或下调端粒酶抑制物的活性)。用含可调节启动子的端粒酶基因进行转染,足以形成永生化细胞。这些基因中已被广泛应用的有:EBV用于淋巴母细胞样细胞;SV40 LT用于黏附细胞,如成纤维细胞(Mayne et al., 1996)、 角质形成细胞(Steinberg,1996) 和内皮细胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT则用于间充质干细胞和其他一些细胞。
NCI-H524细胞类似产品::DHL8细胞、IMR32细胞、UPCI-SCC090细胞
RBVEC细胞类似产品::OCI AML2细胞、HDLM2细胞、HBZY 1细胞
INS1-E细胞类似产品::PLA801-95D细胞、WEHI 3B细胞、COLO 699细胞
mouse Inner Medullary Collecting Duct-3细胞类似产品::MC/CAR细胞、HEM-L细胞、HuH6细胞
U138MG细胞类似产品::HT3细胞、Y3.AG.1.2.3细胞、MSTO-211 H细胞
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Hs819T细胞类似产品::HS-766-T细胞、U2OS细胞、INS1-E细胞
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ARPE-19 Cell|人视网膜色素上皮细胞
Hs-578Bst细胞类似产品::MN 60细胞、P3-Jiyoye细胞、UMR-106细胞
LS 180细胞类似产品::HT-1080细胞、MODE-K细胞、H-661细胞
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AG06814-N细胞类似产品::H-838细胞、SKNO1细胞、TE8细胞
COR-L51细胞类似产品::C26细胞、MC/9细胞、LM8细胞
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Anip 973细胞类似产品::OE21细胞、CCD-966SK细胞、Co 115细胞
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End1/E6E7细胞类似产品::Vero E6细胞、HECCL-1细胞、H1869细胞
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Embryonic Bovine Tracheal cells细胞类似产品::NCM460细胞、HNE2细胞、DMS 153细胞
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ARPE-19 Cell|人视网膜色素上皮细胞
SKNBE细胞类似产品::PZ-HPV-7细胞、L-132细胞、H-446细胞
PC-2 [Human pancreatic carcinoma]细胞类似产品::SHSY5Y细胞、QBI-293A细胞、NCIH1623细胞
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CaES-17细胞类似产品::MDA453细胞、MNNGHOS细胞、H211细胞
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