"HPAF-II Cell|人胰腺癌细胞
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
养了几年细胞,说一点自己培养细胞方面的看法:1)培养细胞前,可以看看细胞点说明书,包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等;2)不同细胞生长周期不同,有的生长很快,比如说MDA-MB-231,传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了,有的又是别慢,等的人心焦,BT474就是,传代是一分二,复苏起始的时候两周多才能长满,所以就要在培养细胞的过程中多多摸索了;3)对于娇弱的细胞,就得细心呵护了,胰酶消化不能过久,吹得时候要轻柔,离心时候也要注意转速和时间,每天都要去看一下细胞,肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况;4)冻存细胞复苏后第二天ZuiHAO更换一次培养基;5)培养箱隔一段时间彻底用酒精棉擦洗一次;6)养细胞Zui大的教训:不能偷懒!细胞虐我千百遍,我待细胞如初恋。1)不管买的细胞、惠赠的细胞,刚拿到手赶紧做两件事:检测是否有支原体污染; 迅速扩增冻存;2)发现有污染迅速处理掉,别是当你养了很多种细胞时; 细菌污染,真菌污染很容易发现,支原体污染的话,细胞会长的慢,买个支原体检测的kit定期检测一下;3)传代细胞日常的值日清洁是必须的,此外还要定期熏蒸;4)细胞的传代一定要规律,保持相同的confluency和传代时间间隔,不要随心所欲或者拖延;5)注意个人卫生。
细胞生长:贴壁
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细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
HPAF-II Cell|人胰腺癌细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题,客户遇到的问题从细胞生长角度来说,针对细胞培养过程中生长不HAO、甚至死亡的原因,我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不HAO》可能原因:细胞本身的状态》1)细胞传代次数多,细胞老化;2)细胞的接种量:接种量过低,细胞生长缓慢;3)细胞传代时间过晚:细胞中毒,影响传代后的细胞生长;4)胰酶消化时间过长或过短:时间过长,细胞死亡;时间过短,细胞未完全分离而成团,细胞死亡;5)细胞的冻存与复苏:慢冻速融。污染:1)支原体污染;2)霉菌污染;培养基或血清:1)更换血清或培养基之前未进行验证;2)选择的培养基是否合适;3)培养基配制是否准确无误;培养环境:1)CO2供应是否正常;2)培养箱或摇床温度控制是否正确;解决方法:根据以上四个方面的可能原因,做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态:如传代次数、接种量等;2)避免产生污染(用正规、合法、可溯源的血清);3)要用合适的血清或培养基,ZuiHAO经过验证;4)注意实验室的环境;二、培养细胞死亡》可能原因:1)培养箱内无CO2;2)培养箱内温度波动太大;3)细胞冻存或复苏过程中损伤;4)培养液渗透压不正确;5)培养液中有毒代谢产物堆积;解决方法:1)检测培养箱内CO2;2)检查培养箱内温度;3)取新的保存细胞种;4)检测培养液渗透压;5)换入新鲜培养液。
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细胞传代方法:1:2传代
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性:贴壁生长
经过40-50次分裂的渡过第二次死亡危机的细胞,称之为细胞系。如细胞系的生存期有限,则称之为有限细胞系(FiniteCellLine);已获无限繁殖能力的细胞系,称连续或无限细胞系(InfiniteCellLine)。无限细胞系大多已发生异倍化,具异倍体核型,可能成为恶性细胞,因此本质上已是发生转化的细胞系。无限细胞系有永生性(不死性),但仍保留接触抑制和无异体接种致死;有的有永生性,异体接种有致瘤性,说明已恶性化。由某一细胞系分离出来的、在性状上与原细胞系不同的细胞系,称亚系(Subline)。这是现有细胞系中多的一类,中国已建细胞系主要为这类细胞。肿瘤细胞系多由癌瘤建成,多呈类上皮型细胞,常已传几十代或百代以上,并具有不死性和异体接种致瘤性,丧失接触抑制能力。对已建成的各种细胞系或细胞株习惯上都给以名称;细胞的命名无严格统一规定,大多采用有一定意义缩写字或代号表示。但不论什么形式,均不宜太长,以便记忆和了解。
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