"CAL-27 Cells(赠送Str鉴定报告)|人舌鳞状上皮细胞癌细胞
细胞背景资料：该细胞１９８２年由J. Gioanni建系，源自一位５６岁白人男性的舌头中倍的病变部位，角蛋白强阳性
细胞形态：上皮细胞样
解冻细胞出现大量细胞碎片的可能原因及推荐解决方案如下：１)冷冻时细胞密度过低：推荐的解决方案：缩短解冻过程中的时间。将细胞取出后，立即将冻存管浸入在３７℃的水浴中，并震荡至全部融化，然后迅速地转移到预热的培养基中；２)不适当的冷冻过程：推荐的解决方案：解冻不同冷冻室总的试管。确保在冻存过程中采用的适当的技术，并确保使用了适量和适合的冷冻液。出现生长缓慢的可能原因及推荐解决方案如下：１)培养瓶的大小：一般解决方案是一些细胞在培养基中倾向于维持一定的密度。将培养物转移到较小的培养瓶中，使细胞密度上升；如，根据培养基的体积，从T７５培养瓶转移到２或３个T２５培养瓶中；２)细胞密度过低：通常解决方案是提GAO未来冷冻物种细胞的冻存密度，或使用较小的培养容器，或解冻多个试管来进行培养。
细胞生长：贴壁
SNU520细胞类似产品：：H2170细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6细胞、MPASMC细胞
SCC-25细胞类似产品：：ZR75-1细胞、HUT 28细胞、RPMI #1846细胞
Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞类似产品：：H211细胞、CLL-CII细胞、bEnd.3[BEND3]细胞
HCC1171细胞类似产品：：Wistar Institute-38细胞、MiaPaCa-2细胞、DSL-6A/C1细胞
HUVSMC细胞类似产品：：H1436细胞、H2081细胞、SKMEL-1细胞
CAL-27 Cells(赠送Str鉴定报告)|人舌鳞状上皮细胞癌细胞
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)
细胞培养过程中，总是会出现各种意想不到的问题，一不留神就会全盘皆输。所谓细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。下面是贴壁细胞的保藏方法，希望对细胞培养初学操作者有所帮助：1)观察细胞状态：贴壁细胞密度达到85-90%，即可以细胞冻存形式进行保藏，拍照，记录细胞状态；2)细胞清洗：培养皿表面消毒后，转移至生物安全柜中，去除培养皿中培养液，加入12mlPBS，轻轻摇晃培养皿清洗细胞，随后吸除PBS清洗液；3)细胞消化：将2ml胰酶加入培养皿中，完全覆盖细胞，置于显微镜下观察（期间禁止摇晃培养皿），当细胞刚开始脱落时，立即转移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余约0.5ml胰酶，转移至培养箱内继续消化，每30秒肉眼观察细胞状态，至细胞成流沙状完全脱落，转移至生物安全柜中，加入12ml完全培养基，终止消化；4)细胞离心：将终止消化后的细胞悬液吹打均匀，吸取至15ml离心管中，1000r/min（110g），离心3min；5)细胞冻存：离心后去除细胞上清液，按照冻存细胞量5*10^5/ml，吸取冻存液重悬细胞沉淀，吹打均匀后分装至相应的冻存管中，进行冻存；6)细胞保藏：冻存管做HAO标记，放至程序降温盒中，于4℃冰箱放置30min，转移至-80℃超低温冰箱过夜，将过夜后的冻存细胞转移至液氮中保藏。
细胞传代方法：１：６传代，２—３天换液一次
EL 4细胞类似产品：：L5178Y细胞、Hs 294T细胞、HuH-28细胞
OCILY3细胞类似产品：：Madison细胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3细胞、HEK AD293细胞
SupB15W细胞类似产品：：SNU387细胞、EOMA细胞、COLO-16细胞
TK 10细胞类似产品：：MC-116细胞、AG06814-N细胞、CAL851细胞
P31/FUJ细胞类似产品：：SNUC2A细胞、NFS-60细胞、MIA-Pa-Ca-2细胞
细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
CAL-27 Cells(赠送Str鉴定报告)|人舌鳞状上皮细胞癌细胞
细胞生长特性：贴壁生长
BHT101细胞类似产品：：NBL-7细胞、MB231细胞、UMUC-3细胞
Hepatoma 22细胞类似产品：：GM03190A细胞、NCI-H1563细胞、OCILY-19细胞
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BT-474细胞类似产品：：T-47-D细胞、Ly10细胞、BC-028细胞
DMS-53细胞类似产品：：HPDEC细胞、Hs 695.T细胞、HL-7702细胞
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间Zui长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请YOU先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做HAO照片记录并联系实验室。
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结１：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加GAO浓度FBS １５-２０%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结２：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。１、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。２、你的冻存液HAO不HAO，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。３、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过７%，大于５%，太多也不HAO。４、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。５、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。６、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。７、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝Zui后换课题，这个见得太多了，别不当会事。
SJ-RH30细胞类似产品：：SCC-7细胞、ZR75-1细胞、HFB细胞
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SW-780细胞类似产品：：U-251 MG细胞、Kasumi 1细胞、ID8细胞
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ME180细胞类似产品：：PNT1-a细胞、L78细胞、Fetal Human Colon细胞
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Madin Darby Canine Kidney细胞类似产品：：M20 [Human melanoma]细胞、SK-MEL5细胞、TM-4细胞
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PF-382细胞类似产品：：HuT-102细胞、Hs888 Lu细胞、SNU-398细胞
PANC-1细胞类似产品：：HIEC-6细胞、HIT T15细胞、Leghorn Male Hepatoma cell line细胞
University of Arizona Cell Culture-812细胞类似产品：：WEHI 231细胞、HCC-1143细胞、NCIH460细胞
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K1735细胞类似产品：：C3H 10T1/2细胞、Hs 742.T细胞、LI7细胞
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DHL-2细胞类似产品：：Normal Rat Kidney细胞、PL11细胞、Fu97细胞
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CFPAC1细胞类似产品：：PJ34细胞、143B TK-细胞、G-402细胞
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Human fetal lung fibroblast 1细胞类似产品：：OCI AML3细胞、LC-1 sq细胞、WM239细胞
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SUM 149细胞类似产品：：Detroit-562细胞、CHL1细胞、HT(H9)细胞
KTC-1细胞类似产品：：RPMI 8226细胞、UMC11细胞、A 375细胞
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Caov-3细胞类似产品：：BLO 11细胞、LUDLU 1细胞、SUM-52细胞
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CAL-27 Cells(赠送Str鉴定报告)|人舌鳞状上皮细胞癌细胞
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A-253细胞类似产品：：RPMI2650细胞、GA-10-Clone-4细胞、SW756细胞
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253J细胞类似产品：：GM3569细胞、Mouse Podocyte Clone-5细胞、RT4P细胞
PY8119细胞类似产品：：Lu-165细胞、LN382细胞、BC-022细胞
HUC-1细胞类似产品：：NCI-H187细胞、Astrocyte type I clone细胞、TE-12细胞
ABE8.1/2细胞类似产品：：Bovine ENDometrial cells细胞、SNU886细胞、MCA38细胞
JIII细胞类似产品：：MDA-MB-468细胞、HEP-3B2细胞、PC.3细胞
NB19-RIKEN细胞类似产品：：MODE-K细胞、KHYG细胞、IOSE-80细胞
3T3 Swiss Albino细胞类似产品：：UCLA RO-81-A-1细胞、HTori-3.1细胞、A-172MG细胞
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