PLC/PRF/5 Cell|人肝癌亚力山大细胞

"PLC/PRF/5 Cell|人肝癌亚力山大细胞

细胞背景资料：该细胞系分泌乙肝病毒表面抗原（HBsAg）。 此细胞系原先被支原体污染，后用BM-cycline去除支原体

细胞形态：上皮细胞样

传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些殊的细胞和分化征。传代细胞形成细胞株的Zui大利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。【操作步骤】１)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；２)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；３)置３７℃孵箱或室温(２５℃温度)下进行消化，２~５min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；５)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；６)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO２培养箱中进行培养；７)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般２～３d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】１)掌握HAO细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；２)掌握HAO消化浓度，当消化液浓度过GAO时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。

细胞生长：贴壁

PaCa2细胞类似产品：：NTera-2D1细胞、118MG细胞、OCILY19细胞

SNU-484细胞类似产品：：T.T细胞、D341细胞、HPBALL细胞

CL34细胞类似产品：：HuP-T4细胞、M4e细胞、Molm 13细胞

Jiyoye(P-2003)细胞类似产品：：Cloudman S91 melanoma clone M-3细胞、RBMEC细胞、HCC1954BL细胞

SW579细胞类似产品：：H64细胞、ECV304细胞、H-460细胞

细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源

PLC/PRF/5 Cell|人肝癌亚力山大细胞

[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)

预防细胞污染的注意事项：实验进行前，超净台用紫外灯照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超净台台面，并开启超净台风扇运转10min左右再开始实验操作。实验用品用75%酒精擦拭后才能放入超净台内；实验用品用完应移出超净台，以利于气流的流通。实验完成后用75%酒精擦拭超净台台面。每次操作只处理一种细胞；即使不同细胞使用相同的培养基也不要共享同一瓶培养基，避免细胞间的交叉污染。操作时小心取用无菌的物品，避免污染。勿碰触吸管尖头，不小心碰触后应立即更换；不要在打开的容器瓶口正上方操作，容器打开后，倾斜45°操作，操作完成后及时盖上瓶盖。CO2培养箱的清洁是较易被忽视的地方，应1-2个月对培养箱定期进行清洁消毒。先用75%酒精擦拭培养箱内壁、隔板、水盘2-3次，用双蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，后紫外灯照射4h以上。水盘内加入无菌水（应每周更换），待培养箱内温度、湿度、CO2浓度稳定后再放入细胞。定期清洗或更换超净台过滤膜、预滤网。

SP-2/0-AG14细胞类似产品：：LAD2细胞、MN60细胞、KP-N-NS细胞

IM-9细胞类似产品：：SW948细胞、CPA47细胞、NCL-H548细胞

SW-756细胞类似产品：：CD-18细胞、H250细胞、PTK2细胞

CORL88细胞类似产品：：H-1819细胞、Vx2细胞、MESSA/Dx5细胞

细胞传代方法：１：２传代

细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库

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细胞生长特性：贴壁生长

经过40-50次分裂的渡过第二次死亡危机的细胞，称之为细胞系。如细胞系的生存期有限，则称之为有限细胞系（FiniteCellLine）；已获无限繁殖能力的细胞系，称连续或无限细胞系（InfiniteCellLine）。无限细胞系大多已发生异倍化，具异倍体核型，可能成为恶性细胞，因此本质上已是发生转化的细胞系。无限细胞系有永生性（不死性），但仍保留接触抑制和无异体接种致死；有的有永生性，异体接种有致瘤性，说明已恶性化。由某一细胞系分离出来的、在性状上与原细胞系不同的细胞系，称亚系（Subline）。这是现有细胞系中多的一类，中国已建细胞系主要为这类细胞。肿瘤细胞系多由癌瘤建成，多呈类上皮型细胞，常已传几十代或百代以上，并具有不死性和异体接种致瘤性，丧失接触抑制能力。对已建成的各种细胞系或细胞株习惯上都给以名称；细胞的命名无严格统一规定，大多采用有一定意义缩写字或代号表示。但不论什么形式，均不宜太长，以便记忆和了解。

RL95细胞类似产品：：MMVECs细胞、P30/0HK细胞、OCI/AML-2细胞

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PLC/PRF/5 Cell|人肝癌亚力山大细胞

Vero 76 clone E-6细胞类似产品：：SK HEP 01细胞、JEKO细胞、SKNSH细胞

MAC1细胞类似产品：：MuM-2B细胞、HCC-1428细胞、SACC-LM细胞

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HEP-3B2细胞类似产品：：CNE-2Z细胞、OCLY8细胞、KMM-1细胞

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