"Hs 445 Cell|人霍奇金淋巴瘤细胞
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:淋巴母细胞样
传代培养及其操作步骤:原代细胞培养成功以后,需要进行分离培养,否则细胞会因生存空间不足或密度过大,营养障碍,影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株),可以进行细胞克隆,易于保存,但可能丧失一些殊的细胞和分化征。传代细胞形成细胞株的Zui大利处在于提供了大量持久的实验材料,便于实验。【操作步骤】1)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液;2)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜;3)置37℃孵箱或室温(25℃温度)下进行消化,2~5min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察,当发现胞质回缩、细胞间隙增大后,应立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶内加入Hanks液少量,轻轻转动培养瓶,把残留消化液冲掉,然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培养液,终止消化;5)使用弯头吸管,吸取瓶内培养液,按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞,使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔,以防用力过猛损伤细胞;6)用计数板计数后,分别接种于新的培养瓶中,置CO2培养箱中进行培养;7)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般2~3d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面,即可使用;也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】1)掌握HAO细胞消化的时间,消化时间过短时,细胞不宜从瓶壁脱落,过长的消化会导致细胞脱落、损伤;2)掌握HAO消化浓度,当消化液浓度过GAO时,消化时间应缩短,过低时细胞消化时间相对延长。
细胞生长:悬浮
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SUNE1细胞类似产品::MCF-7/ADR-RES细胞、HEC-151细胞、H146细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
Hs 445 Cell|人霍奇金淋巴瘤细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞培养过程中,总是会出现各种意想不到的问题,一不留神就会全盘皆输。所谓细胞虐我千百遍,我待细胞如初恋。下面是贴壁细胞的保藏方法,希望对细胞培养初学操作者有所帮助:1)观察细胞状态:贴壁细胞密度达到85-90%,即可以细胞冻存形式进行保藏,拍照,记录细胞状态;2)细胞清洗:培养皿表面消毒后,转移至生物安全柜中,去除培养皿中培养液,加入12mlPBS,轻轻摇晃培养皿清洗细胞,随后吸除PBS清洗液;3)细胞消化:将2ml胰酶加入培养皿中,完全覆盖细胞,置于显微镜下观察(期间禁止摇晃培养皿),当细胞刚开始脱落时,立即转移至生物安全柜中,除去大部分胰酶,剩余约0.5ml胰酶,转移至培养箱内继续消化,每30秒肉眼观察细胞状态,至细胞成流沙状完全脱落,转移至生物安全柜中,加入12ml完全培养基,终止消化;4)细胞离心:将终止消化后的细胞悬液吹打均匀,吸取至15ml离心管中,1000r/min(110g),离心3min;5)细胞冻存:离心后去除细胞上清液,按照冻存细胞量5*10^5/ml,吸取冻存液重悬细胞沉淀,吹打均匀后分装至相应的冻存管中,进行冻存;6)细胞保藏:冻存管做HAO标记,放至程序降温盒中,于4℃冰箱放置30min,转移至-80℃超低温冰箱过夜,将过夜后的冻存细胞转移至液氮中保藏。
L 428细胞类似产品::SNU475细胞、HCC-1833细胞、QGP1细胞
HUT28细胞类似产品::COLO 320 HSR细胞、KS-1 [Human glioblastoma]细胞、QSG7701细胞
H-7721细胞类似产品::TSU-Pr1细胞、TGBC-11-TKB细胞、HEp-2细胞
CMT64细胞类似产品::LN382细胞、Ramos(RA1)细胞、LMH细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
为了能够在细胞培养实验中成功使动物细胞完HAO的生长繁殖,人们应在开展细胞培养实验时提前做HAO充足的准备工作,从而能够避免由于准备工作的不到位以及对某一环节的疏忽导致实验出现无法进行的情况,事先了解清楚动物细胞培养的主要流程则具有关键作用。那么,GAO质量的动物细胞培养主要具有哪些流程?准备工作:人们在开展动物细胞培养实验时应做HAO充足的实验相关物品准备工作,不仅要对实验器皿进行全面的清洗、干燥和消毒工作,而且还应对培养基与其他相关试剂进行配置、分装和灭菌工作,同时还要对实验室的操作台进行清洁和消毒工作,从而保证实验物品能够不受细菌等物质的污染。取材:当人们完成HAO动物细胞培养实验的准备工作后则应进行取材工作,在这程中需要要求在无菌的环境下提取出动物细胞并经过一系列的处理工作后接入培养器皿中,为了避免接触到有害物质影响实验的成功率应保证在无菌的环境中完成取材工作。培养:为了使动物细胞快速食物进入到生长状态中,人们在进行动物细胞培养实验的培养过程中应将取得的动物细胞接入专用的培养器皿中,同时在培养过程中还应仔细观察以及记录HAO动物细胞每个阶段的生长状况。冻存和复苏:在动物细胞培养的冻存和复苏这个流程中,为了使实验获得的细胞能够保存HAO应进行冻存工作,并且在将细胞收集到冻存管中还应注意加入含有保护剂的培养基中,如需要将冻存的细胞进行复苏时则将从液氮中取出的冻存管放入与人体体温相接近的温水中即可。
32D clone 3细胞类似产品::A875细胞、MDA231-LM2细胞、N-9细胞
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Immortal Pig Intestinal-2I细胞类似产品::CHO Lec1细胞、LM TK negative细胞、Centre Antoine Lacassagne-27细胞
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Normal Rat Kidney细胞类似产品::526 mel细胞、HVSMC细胞、Hepa-RG细胞
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