5周标准鼠单抗/多抗制备佐剂

通过5周2针的标准免疫程序制备小鼠单克隆和多克隆抗体，ELISA滴度（Cutoff值为0.1000）可达到1:10000-1:10000000。

1.    用生理盐水将抗原稀释到2倍最终浓度（按每针次50μl用量配制）。

备注：推荐使用的抗原用量为

（1）免疫原性较强的灭活全病毒或全细菌以及病毒样颗粒抗原每针次1-5μg；

（2）免疫原性较弱的亚单位蛋白抗原每针次5-20μg；

（3）偶联了载体蛋白的小分子抗原每针次20-50μg。

2.    充分混匀佐剂，无菌条件下取出所需用量（按每针次50μl）与抗原按体积比1:1迅速混匀。

备注：本佐剂产生沉淀属正常现象，与抗原混合操作越快越好。

3.    通过后腿小腿肌肉注射免疫小鼠（

），每只小鼠注射100μl。

备注：本佐剂与抗原混合后产生沉淀属正常现象，抽入针管前应充分混匀，抽入针管后应尽快注射。

4.    第21天按同样方式加强免疫1针。

备注：每次佐剂和抗原现配现用。

5.    第35天采微量尾血进行ELISA测定，抗体滴度应在1:10000-1:10000000范围内，随后即可采全血或按常规方法进行抗原冲击免疫和脾细胞融合。