蛋白酶K

蛋白酶K

英文名：Proteinase K

别名：Endopeptidase K; Prok; Protease K; Tritirachium album proteinase K

产品名称：蛋白酶K

CAS 登录号：39450-01-6

EINECS 登录号：254-457-8

活性：>30U/mg

0。在组织或细胞核酸分离时，使核酸酶（RNA和DNA）以及反应中其他酶失活

蛋白酶K是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶，从布氏白僵菌（Beauveria bassiana）中纯化得到，用于生物样品中蛋白质的一般降解。该酶有两个ca2+结合位点，它们离酶的活性中心有一定距离，与催化机理并无直接关系。然而，如果从该酶中除去ca2+，由于出现远程的结构变化，催化活性将丧失80%左右，但其剩余活性通常已足以降解在一般情况下污染酸制品的蛋白质。蛋白酶K是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。在较广的pH范围内（pH 4-12.5）均有活性，在尿素和SDS中也较为稳定，还具有降解天然蛋白质的能力。

规格：100毫克普通装或客户定制

比活性值：38 U蛋白

来源种属：酵母菌

分子质量：28,650

（二）、产品检测报告

1、稀释缓冲液

根据需要，利用20mM Tris-HCL 缓冲液（PH 7.5）溶解成20mg/ml的工作浓度。

2、质量说明

活性单位定义

37℃、PH7.5条件下，每分钟可水解底物酪蛋白生成1μmol酪氨酸所需蛋白酶K的量，定义为一个单位。

脱氧核糖核酸酶残留

以λDNA为底物，37℃消化4小时以上，未检测到脱氧核糖核酸酶活性。

核糖核酸酶残留

37℃消化12小时以上，未检测到核糖核酸酶活性。

3、酶纯度测定（SDS-PAGE）

结果：蛋白酶K纯度超过99.2%。

4、酶活性测定

蛋白酶K比活性值

比活性值（U）38

5、酶稳定性测定（-20℃冷冻条件下，12个月的数据）

结果：干粉状态正确储存，一年内酶活性保持不变；溶解状态酶活性一年内降低小于2%。

1、’动物基因组提取（蛋白酶K浓度为20mg/ml）

不影响动物基因组的有效提取√

与不加蛋白酶K的样品相比，能有效降解蛋白质√

2、降解蛋白质能力

与15ug BSA 37℃孵育1小时，BSA可有效降解√

（四）、应用范围

  蛋白酶K的用途广泛，主要的应用行业包括：医疗及基础研究领域：基因诊断试剂盒；基因组DNA提取试剂盒、RNA提取试剂盒中去除DNA和RNA制备中的核酸酶；此外，还应用于：皮革工业（皮革软化及精细化、脱毛和软化、蚕丝脱胶）制备脉冲电泳的染色体DNA；提取组织中非蛋白成分时，降解含有蛋白质杂质；食品、酿造工业：肉类嫩化、酒类澄清；洗涤工业：酶洗衣粉、洗衣液等也有应用。

（五）、贮存和使用

  干粉条件下有效期为24个月，液态时-20℃保存12个月。客户利用缓冲液溶解后，需要-20℃贮存。溶解后，分装成若干份，方便使用，避免反复冻溶。如果需要在2-8℃环境下放置，超过三天，建议过滤除菌或加入抑菌剂如3%叠danhuana，防止微生物污染。

  孵育温度为55至65℃，理想孵育温度为58℃，孵育时间为15分钟至48小时；理想孵育时间为2小时。