氯化三苯基四氮唑

中文名称：红四唑

英文名称:2,3,5-Triphenyl-2H-tetrazolium chloride

中文别名:氯化三苯基四氮唑;2,3,5-三苯基-2H-四唑翁氯化物;2,3,5-三苯基氯化四唑;氯化-2,3,5-三苯基四氮唑;四氮唑红;2,3,5-三苯基氯化四氮唑;三苯基氯化四唑;2,3,5-三苯基-2H-四唑氯;红红四氮唑;红四氮唑(TTC);红四氮唑;四唑红;2,3,5-三苯基-2H-四唑盐酸盐;2,3,5-三苯基-2H-氯化四氮唑

CAS RN:298-96-4

EINECS号:206-071-6

分 子 式:C19H15ClN4

分 子 量;334.802

红四唑性质：TTC是脂溶性光敏感复合物，其溶液无色，对微生物的生长繁殖都或多或少具有抑制的作用，另外，TTC在高温灭菌条件下会被严重破坏掉，从而导致染色效果明显下降。 TTC染色是TTC和活细胞线粒体内的琥珀酸脱氢酶反应，生成红色的三苯基甲臜（TTF），用来表示细胞的活力或者计数。存放或染色时要避光，37度条件下。

红四唑用途:用作分析试剂和色谱分析试剂。

一.残留量检测

添加量：4%

配制方法：称取1gTTC,溶于5mL灭菌蒸馏水中,装褐色瓶内于7℃冰箱保存,临用时用灭菌蒸馏水稀释至5

倍。如遇溶液变为玉色或淡褐色,则不能再用。

判断标准：观察时要迅速,避免光照过久发生干扰。乳中有抗生素存在,则检样中虽加菌液培养物,但因细菌的繁殖受到抑制,因此指示剂TTC不还原,不显色。与此相反,如果没有抗生素存在,则加入菌液即行增殖,TTC被还原，显红色,也就是说检样呈乳的原色时为阳性,呈红色为阴性。

二.菌落总数检测

添加方法：1%，1L培养基加1mL1%的TTC溶液。

添加方法：

方法（一） 在微生物培养结束后，向培养基表面喷洒1%TTC溶液适量，继续培养1～2小时后计数。注意TTC溶液是不需要无菌的，因为1小时之内是不可能生长出肉眼可见菌落的。

方法（二） 在培养基灭菌后、使用前添加TTC溶液，然后再培养观察。

作用：TTC能使菌落显红色，易于区分菌落和样品固态残渣，方便计数。

三.测定种子活力

添加量：0.5%

使用方法：

1. 浸泡 将待测种子在 30 ～ 35 ℃温水中浸种（大麦、小麦 6 小时，玉米 5 小时左右），以增强种胚的呼吸作用。

2. 显色 取吸胀的种子 200 粒，用刀片沿种子胚的中心线纵切为两半，将其中的一半置于 2 只培养皿中，每皿 100 个半粒，加入适量的 0.5% TTC 溶液，以覆盖种子为度。然后置于 30 ℃恒温箱中 1 h 。观察结果，凡胚被染为红色的是活种子。 将另一半在沸水中煮 5 min 杀死胚，作同样染色处理，作为对照观察。

3. 计算活种子的百分率

判断标准：可被种子中的还原性物质（脱氢酶）还原为红色的TTF，使活种子胚着上红色而胚乳不被染色，而死种子完全不被染色。

湖北得安特化工  江茜  15926386139  QQ:2977706496

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