具有下列特点:
1. 一站式,足够 50 次酶切-连接反应、50 次预扩反应和 1600 次 AFLP PCR(PCR 按 30 uL 体系计算),但不包括 DNA 纯化和带型分析试剂(如 PAGE 电泳试剂和 银染试剂)。
2. 本系列产品提供 EcoRI-MseI 组合,适用于 GC 含量在 50%以上的基因组。对 GC 含量在 50%以下的基因组,需从本公司采购 AFLP(EcoRI-TaqI)组合。
3. 各种参数都经过优化,一次 PCR 所得 AFLP 片段数一般在 10-100 之间,可重复 性好,误差小于 0.6%。4. 本产品适用于基因组在 500 Mb-6000 Mb 的材料(如动物和植物),对于基因组 在 50-500 Mb 的材料(如细菌和真菌)或 50Mb 以下的材料(如质粒,cosmid, BAC,YAC 和 PAC 等),需要分别另购专门的+1 型预扩引物混合液和+3 型 EcoRI 引物(8 种)AFLP 引物对。
服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
微细毛圆线虫探针法荧光定量PCR试剂盒 | Trichostrongylus tenuis | XGR97339 |
【结果分析条件设定】
u 基线(Baseline)设定:应选择该次实验指数扩增前所有样本荧光信号比较稳定的一段区域(所有样本荧光信号无较大波动),起始点(Start)应避开荧光采集起始阶段的信号波动,终止点(End)应比最早出现指数扩增的样本Ct值减少1~3个循环,建议基线设为6~15。
u 阈值(Threshold)设定:将阈值线设定在刚好超过正常阴性质控品扩增曲线的最高点。
【质控标准】
1. 阴性质控品的检测结果应为阴性,无指数扩增期,Ct=40或无Ct;
2. 阳性质控品的检测结果应为阳性,有明显的指数扩增期,Ct值应小于等于35;
3. 以上要求需在一次实验中同时满足,否则该次实验视为无效。
【结果判断】
1. 阳性:有明显的指数扩增期,且Ct<38;
2.可疑:有明显的指数扩增期,且38≤Ct<40,此时样本为可疑样本;对于可疑样本建议复核一次,若复核结果Ct<40且有指数扩增期,则判定为阳性,否则判定为阴性;
3. 阴性:无指数扩增期,Ct=40或无Ct值均判定为阴性样本。
【对检验结果的解释】
1. 实验室环境污染、试剂污染、样品交叉污染会出现假阳性结果;
2. 试剂运输、保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降,可能会导致出现假阴性结果。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
A9(小鼠皮下结缔组织细胞) 5×106cells/瓶×2糖精钠标准溶液(1.00mg/mL,基体:水)Saccharin salt solution质量规格:1.00mg/mL,基体:水
PVRL2 Others Human 人 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 人细胞裂解液 (阳性对照) 桃醛(标准品)γ-Undecanolactone质量规格:0.96
水牛皮肤成纤维样细胞;WB-S5甲基壬基甲酮(标准品)2-Undecanone质量规格:分析标准品
DKKL1 Others Human 人 DKKL1 / Soggy-1 / SGY-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 2′-脱氧胞苷 盐酸盐2′-Deoxycytidine hydrochloride质量规格:0.99
胶原酶(含10mL酶解缓冲液) 1mL1酸氢二铵Ammonium phosphatedi basic质量规格:SP
NRG1 Protein Canine 重组狗 NRG1-alpha 蛋白 (EGF Domain, Fc 标签)2,9-二氯-1,10-菲罗啉(>97.0%(GC)(T))2,9-Dichloro-1,10-phenanthroline质量规格:>97.0%(GC)(T)
MDA-MB-435(人癌高转移细胞) 5×106cells/瓶×2 脑动脉血管平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)3,4,7,8-四甲基-1,10-菲罗啉(>98.0%(HPLC)(T))3,4,7,8-Tetramethyl-1,10-phenanthroline质量规格:>98.0%(HPLC)(T)
间充质干细胞生长添加物-无血清MSCGS-25,5'-硫代双水杨酸(>98.0%(GC)(T))5,5'-Thiodisalicylic Acid质量规格:>98.0%(GC)(T)
微细毛圆线虫探针法荧光定量PCR试剂盒NRXN3 Others Human 人 NRXN3 / Neurexin-3-beta 人细胞裂解液 (阳性对照) 4,4'-二氯二苯砜(>98.0%(GC))4,4'-Dichlorodiphenyl Sulfone质量规格:>98.0%(GC)
COS-1 非洲绿猴SV40转化的肾细胞双[3,5-二溴-4-(2-羟乙氧基)苯基]砜(>96.0%(GC))Bis[3,5-dibromo-4-(2-hydroxyethoxy)phenyl] Sulfone质量规格:>96.0%(GC)
PTX3 Others Human 人 PTX3 / TNFAIP5 人细胞裂解液 (阳性对照) Fmoc-Tyr(tBu)-OHFmoc-O-叔丁基-L-酪酸500克特,98.5%
BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.11,4-二肖基本;队二肖基本 1,4-bqnzqnq 9-94-4
NCR1 Others Rat 大鼠 NCR1 / NK-p46 人细胞裂解液 (阳性对照) 水合安嘌呤(-20℃) Mqthotrqxctq 1929-2-
原代神经胶质细胞特制无血清添加剂Many types of cells包装:1mlDodecane正十二烷20毫克AR,98%
ECV-304细胞,人脐静脉内皮(具有T24细胞特性) 金黄色葡萄球菌 人牙龈成纤维细胞总RNAHGF NA13007-92-6六羰基ChroMiuM hexacarbonyl
EB (NBL-4)细胞,牛胚气管细胞 SW 1088[SW-1088; SW1088](人脑星型胶质瘤细胞) CM-H018人成纤维细胞完全培养基100mL镉黄,英文名或英文缩写:Cadmium sulfide,级别:AR,99.5%,规格:10克
EGF Protein Mouse 重组小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白鳞钼醋铵 cMMONIUM PHOSPHOMOLYBDcTq HYDRcTq 2473-94-3
MKN-28(人胃癌高转移细胞) 5×106cells/瓶×2 脑微血管内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)苄氧羰基甘酸,英文名或英文缩写:CBZ-L-Gly,级别:特,99%,规格:100克
前列腺上皮细胞培养基PEpiCMFORMALDEHYDE-FREERNAGELKIT无RNA胶试剂盒RTsigma
SELE Others Rat 大鼠 E-selectin / ELAM-1 / CD62E 人细胞裂解液 (阳性对照) 3374-22-9DL-半胱酸;DL-2-基-3-;DL-半膀胱基酸;DL-β-;DL-脬基酸DL-Cysteine
实验外包:
1.基因组学:基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学:microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测:HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学:GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型:原代细胞、细胞模型、动物模型构建