产品及特点:
1. 即开即用,用户只需要提供病毒样品。
2. 根据鲍疱疹样病毒探针法荧光定量保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量PCR检测,避免后续污染。
5. 本试剂盒足够50次20μL反应体系的荧光定量PCR。
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
产品名称 | 斯氏毛滴虫探针法荧光定量PCR试剂盒 |
英文名称 | Trichomonas stableri |
货号 | XGR97329 |
荧光染料的优点:
使用简便;
可以与任何PCR产物结合;
价格便宜;
荧光染料的缺点:
不能区分不同的双链DNA
引物二聚体会影响检测的敏感性
非特异性产物会影响结果的敏感性
引物二聚体和非特异性扩增问题可以通过熔解曲线 (Melting curve) 进行识别,进而通过PCR引物的设计和反应条件的优化得以解决。
总的来说,SYBR Green I方法是一种最基础也最常用的Real-time qPCR实验手段。
荧光化学物质:
实时荧光定量PCR所使用的荧光物质可分为两种:荧光探针和荧光染料。现将其原理简述如下:
1. TaqMan荧光探针:PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。而新型TaqMan-MGB探针使该技术既可进行基因定量分析,又可分析基因突变(SNP),有望成为基因诊断和个体化用药分析的首选技术平台。
2. SYBR荧光染料:在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料非特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。SYBR仅与双链DNA进行结合,因此可以通过溶解曲线,确定PCR反应是否特异。
3. 分子信标:是一种在5和3末端自身形成一个8个碱基左右的发夹结构的茎环双标记寡核苷酸探针,两端的核酸序列互补配对,导致荧光基团与淬灭基团紧紧靠近,不会产生荧光。PCR产物生成后,退火过程中,分子信标中间部分与特定DNA序列配对,荧光基因与淬灭基因分离产生荧光 。
2. 皮肤细胞系统三糖Melezitose hydrate质量规格:>98%,进分
U251人胶质瘤细胞聚乙二醇20000PEG 20000质量规格:BR
人结直肠腺癌细胞;COLO 205 大鼠肾动脉平滑肌细胞完全培养基 100mL2-氨基噻唑(>98%,BR)2-Aminothiazole质量规格:>98%,BR
MLA144 MLA144长臂猿瘤细胞氯化铈七水Cerium (III) chloride, heptahydrate质量规格:>99.9%
CHI3L2 Others Human 人 CHI3L2 / YKL-39 人细胞裂解液 (阳性对照) D-阿拉伯糖醇(标准品)D(+)-Arabitol质量规格:分析标准品
PRKD3 Others Human 人 PKC nu / PRKD3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 地塞米1酸钠(标准品)Dexamethasone Phosphate质量规格:HPLC>98%,标准品
小鼠B细胞杂交瘤细胞;SH3D-蛋氨酸D-Mine质量规格:>98%,BR
RSC96细胞,大鼠雪旺细胞 人肝癌细胞,9204细胞 CL-0136L6(大鼠成肌细胞)5×106cells/瓶×2索非布韦Sofosbuvir (GS-7977)质量规格:>99%,BR
中国仓鼠肺细胞;R 1610 [R1610]D-鸟氨酸盐酸盐D-Ornithine monohydrochloride质量规格:>98%,BR
ACVR2B Others Mouse 小鼠 ACVR2B 人细胞裂解液 (阳性对照) D-苯丙氨酸叔丁酯盐酸盐H-D-Phe-OtBu.HCI质量规格:0.98
YAC-1细胞,瘤细胞 人结肠腺癌细胞,HT-29细胞 CM-H021人前列腺平滑肌细胞完全培养基100mL甾醇;(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Ergosterol
大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞;RBL-1甾醇(90%)质量规格:>90%,BRErgosterol
GFRA1 Others Mouse 小鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 蔓荆子黄素(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Vitexicarpin
雪旺氏细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)芒果苷(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Mangiferin
ICAM1 Others Rat 大鼠 ICAM1 / CD54 人细胞裂解液 (阳性对照) 吗替麦考酚酯-d4质量规格:美国进口Mycophenolate Mofetil-d4
ECM1 Others Mouse 小鼠 ECM1 人细胞裂解液 (阳性对照) L-α-基-β-羟基,英文名或英文缩写:L-Threonine,级别:BR,99%,规格:10克
斯氏毛滴虫探针法荧光定量PCR试剂盒人色素瘤细胞;A875BOC-L-天门冬酸β... Boc-Asp(OBzl)-OH (HPLC,≥99.0) 7536-58-5 5G 通用试剂
IL18RAP Others Cynomolgus 食蟹猴 IL18RAP 人细胞裂解液 (阳性对照) 流醋亚铁铵;马尔氏盐;低铁矾;亚铁铵矾;流醋低铁铵;六水合流醋亚铁铵;流醋亚铁铵;六水合流醋铁铵;六水合流醋铁(Ⅱ)铵 Fqrrous cluM;Fqrrous cMMoniuM sulfctq;Mohr'sclt 7783-82-9
人肝窦内皮细胞完全培养基 100mL5′-CTP,4Na5-胞嘧啶核苷三嶙酸四钠盐溶液5UUSP级,98%
LLC细胞,小鼠肺癌细胞 CHO(中国仓鼠卵巢细胞) 恒河猴肺细胞;RM-L1姆沙伯 P AW DMCSChromosorb P AW-DMCS
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括绝对定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的绝对定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。