荧光染料的优点:
使用简便;
可以与任何PCR产物结合;
价格便宜;
荧光染料的缺点:
不能区分不同的双链DNA
引物二聚体会影响检测的敏感性
非特异性产物会影响结果的敏感性
引物二聚体和非特异性扩增问题可以通过熔解曲线 (Melting curve) 进行识别,进而通过PCR引物的设计和反应条件的优化得以解决。
总的来说,SYBR Green I方法是一种最基础也最常用的Real-time qPCR实验手段。
产品名称 |
泰勒氏菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒 |
英文名称 |
Taylorella spp. |
货号 |
XGR97291 |
荧光化学物质:
实时荧光定量PCR所使用的荧光物质可分为两种:荧光探针和荧光染料。现将其原理简述如下:
1. TaqMan荧光探针:PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。而新型TaqMan-MGB探针使该技术既可进行基因定量分析,又可分析基因突变(SNP),有望成为基因诊断和个体化用药分析的首选技术平台。
2. SYBR荧光染料:在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料非特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。SYBR仅与双链DNA进行结合,因此可以通过溶解曲线,确定PCR反应是否特异。
3. 分子信标:是一种在5和3末端自身形成一个8个碱基左右的发夹结构的茎环双标记寡核苷酸探针,两端的核酸序列互补配对,导致荧光基团与淬灭基团紧紧靠近,不会产生荧光。PCR产物生成后,退火过程中,分子信标中间部分与特定DNA序列配对,荧光基因与淬灭基因分离产生荧光 。
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括绝对定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNA或RNA的绝对定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
人血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP4/CD36)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:GPIV, FAT, GP3B, GP88, PASIV, SCARB3, BDPLT10, CHDS7, gpⅢb, CD36 Molecule(Thrombospondin Receptor) Human GP4/CD36(Platelet Membrane Glycoprotein Ⅳ) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组GP4/CD36浓度
293xl-null 293XL/null 3-7 x 10e6 cells
293d-a162 293T-Dual™ hSTING-A162 Cells 3-7 x 10e6 cells
293d-h232 293T-Dual™ hSTING-H232 Cells 3-7 x 10e6 cells
293d-mstg 293T-Dual™ mSTING Cells 3-7 x 10e6 cells
293d-r232 293T-Dual™ hSTING-R232 Cells 3-7 x 10e6 cells
氧化型谷胱甘肽(GSSG) 1g/5gN-Aminophthalimide18758N-氨基
胰蛋白酶1:2 25g5-Aminouracil93225-氨基尿嘧啶
乙醇脱氢酶(ADH) 5KUAmoxicillin trihydrate6133羟氨苄青霉素三水合物
乙二醇 Ethylene Glycol 5×25ml3-Amino-methylbenzamide19663-氨基-甲基苯甲酰胺
乙酰辅酶A 5mg2-(2-Aminothiazole-yl)-methoxyiminoacetic acid658721氨噻肟酸
2-Amino-3-hydroxyanthraquinone 中文名:2-氨基-3-羟基蒽醌 分子式:C14H9NO3 sVE-Cadherin 作用: ELISA 规格: 96T 奥地利 Bender
2-Amino-3-Formylchromone 中文名:2-氨基-3-甲酰基色原酮 分子式:C10H7NO3 小鼠 ACTH(mouse ACTH) 作用: ELISA 规格: 96T 美国 Phoenix
2-Amino-3-chloro-1,4-naphthoquinone 中文名:2-氨基-3-氯-1,4-萘醌 分子式:C10H6ClNO2 mouse Activin A 作用: ELISA 规格: 96T 原装进口
2-Amino-3,5-dibromobenzaldehyde 中文名: 分子式:C7H5Br2NO 内皮生长因子A 英文名称: vascuiar endothelial growth factor A 规格: 48T/96T 英文缩写: VEGF-A
泰勒氏菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒2-Amino-2'-nitrodiphenyl sulfide 中文名:2-氨基-2'-硝基二苯基硫醚 分子式:C12H10N2O2S 内皮生长因子C 英文名称: vascuiar endothelial growth factor C 规格: 48T/96T 英文缩写: VEGF-C
产品及特点:
1. 即开即用,用户只需要提供病毒样品。
2. 根据鲍疱疹样病毒探针法荧光定量保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量PCR检测,避免后续污染。
5. 本试剂盒足够50次20μL反应体系的荧光定量PCR。
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。