小鼠气管和支气管上皮细胞提取物 图片

以下是小鼠气管和支气管上皮细胞提取物 图片的订购信息：

小鼠气管和支气管上皮细胞提取物是从小鼠气管和支气管上皮细胞提取的，小鼠气管和支气管上皮细胞从正常小鼠气管和支气管组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。
总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。公司提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。

cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。

蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备小鼠气管和支气管上皮 组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。

潜在的应用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA选择性剪接；<3>基因克隆与目标测序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白检测与蛋白质组学；<6>芯片研究与表达图谱。
培养操作：
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。      
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。  
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取.
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
实验报告：
一分离与培养：
    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
    6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
甲基丙烯酸羟丙酯Human FETUB(Fetuin B) ELISA Kit

甲基丙烯酸羟丙酯Human fFDFT1(Farnesyl Diphosphate Farnesyltransferase 1) ELISA Kit

2-羟基-4-甲基-3-硝基吡啶Human FG(Fibrinogen) ELISA Kit

2-羟基-4-甲基-3-硝基吡啶Human FGF23(Fibroblast Growth Factor 23) ELISA Kit

4-羟基-3-硝基吡啶Human FGFR2(Fibroblast Growth Factor Receptor 2) ELISA Kit

4-羟基-3-硝基吡啶Human FGFR3(Fibroblast Growth Factor Receptor 3) ELISA Kit

2-羟丙基-β-环糊精Human FGFR4(Fibroblast Growth Factor Receptor 4) ELISA Kit

2-羟丙基-β-环糊精Human FGL1(Fibrinogen Like Protein 1) ELISA Kit

1H-吡唑并[3,4-B]吡啶Human FGL2(Fibrinogen Like Protein 2) ELISA Kit

甲基丙烯酸羟乙酯Human FGα(Fibrinogen Alpha) ELISA Kit

甲基丙烯酸羟乙酯Human FGβ(Fibrinogen Beta) ELISA Kit

1-己炔Human f-Hb(Free Haemoglobin) ELISA Kit

1-己炔Human FLNα(Filamin A, Alpha) ELISA Kit

氟化氢吡啶络合物(Olah试剂)Human FLOT2(Flotillin 2) ELISA Kit

氟化氢吡啶络合物(Olah试剂)Human Flt3L(FMS Like Tyrosine Kinase 3 Ligand) ELISA Kit
小鼠气管和支气管上皮细胞提取物 图片 甲基嘧啶磷异恶草酮 分析标准品，98%α1-Antitrypsin

 霜霉威硫线磷 分析标准品，92%α1-Acid glycoprotein

 密草通 醚磺隆 分析标准品，94%α1-microglobulin

 苯并萤蒽环丙嘧磺隆 分析标准品，96%alpha-2-HS-Glycoprotein

 2,4,5-三氯联苯醚杀鼠醚 分析标准品，99%α2 macroglobulin

 氟氰戊菊酯氯鼠酮 分析标准品，98%Alpha 2 antiplasmin

 禾草敌敌草快 分析标准品，96%alpha-L-fucosidase

 硫线磷2,5-二氯苯氧乙酸标准溶液100μg/ml，溶剂：甲醇N-Acetyl Galactosaminidase, alpha

 异辛烷中7种有机氯农药混和溶液恶醚唑 分析标准品，95%AMPA

 2.4-D丁酯乐果 分析标准品，99.3%α-Amylase

 有机氯农药混合标准溶液乐果标准溶液 10μg/ml,u=5～3%，丙酮α-Defensins

 盐酸呋喃它酮  甲基硫酸新斯的明 98%alpha Actinin 4

 芸苔素内酯二嗪磷 分析标准品,98%α mannosidase