PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
产品名称:牛腺病毒型(BAV-)核酸定量试剂盒
英文名称:详见说明书
编号: FSP2919
分类:核酸检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 产品仅供科研从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
数据采集:
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm,发射光谱在 530nm。
数据处理:
以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴,以 Ct 值为纵轴,通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
Human TFR2(Transferrin receptor protein 2) ELISA KitMouse Flt3L(FMS Like Tyrosine Kinase 3 Ligand) ELISA Kit2-氨基茴香硫醚人体HLA-DPB1 RFLP基因分析试剂盒
Human GP5(Platelet glycoprotein V) ELISA KitMouse FOLR1(Folate receptor alpha) ELISA Kit4-甲基-2-戊醇人体Interleukin-4-receptor alpha RFLP基因分析试剂盒
Human KL(Klotho) ELISA KitMouse GAS6(Growth Arrest Specific Protein 6) ELISA Kit3-氯磺酰基-2-噻吩甲酸甲酯人体c-Ki-ras RFLP基因分析试剂盒
Human ULBP2(NKG2D ligand 2) ELISA KitMouse G-CSF(Granulocyte Colony Stimulating Factor) ELISA Kit3-氯磺酰基-2-噻吩甲酸甲酯人体MMP3 RFLP基因分析试剂盒
Human SEPT5(Septin-5) ELISA KitMouse GDF15(Growth Differentiation Factor 15) ELISA Kit1-(3-甲氧基吡啶-2-基)乙酮人体MMP9 RFLP基因分析试剂盒
Human TPH2(Tryptophan 5-hydroxylase 2) ELISA KitMouse GDNF(Glial Cell Line Derived Neurotrophic Factor) ELISA Kit1-(3-甲氧基吡啶-2-基)乙酮人体TNF-βRFLP基因分析试剂盒
Human TPH1(Tryptophan 5-hydroxylase 1) ELISA KitMouse GM-CSF(Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor) ELISA Kit1-(3-甲氧基吡啶-2-基)乙酮Borrelia burgdorferi RFLP基因分析试剂盒
Human NDST2(Bifunctional heparan sulfate N-deacetylase/N-sulfotransferase 2) ELISA KitMouse IFNγ(Interferon Gamma) ELISA Kit麦芽三糖Toxoplasma gondii RFLP基因分析试剂盒
牛腺病毒型(BAV-)核酸定量试剂盒代黄素T20mg 102-92-1Rat Interleukin 13, IL-13 Elisa KitHPLC95%代黄素T20mgGHRP-6进口、国产单增李氏菌的选择性分离英文名称:Fluvoxamine Maleate 200mg重组人 ERP72 / PDIA4 蛋白 (His 标签)特价促销76470-16-196T成纤维细胞生长因子4(FGF4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%代黄素T20mgGHRP-687-32-1高端化学试剂Human Helicobacter pylori cytotoxin-associated gene A protein IgG, HP-CagA-IgG Elisa Kit进口、国产单增李氏菌的选择性分离英文名称:Tioconazole Related Compound A25mg重组人 ERP72 / PDIA4 蛋白 (Fc 标签)3776-39-496T成纤维细胞生长因子6(FGF6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%NeuroGreen™ 淀粉质检测剂I20mgELA487-32-1高端化学试剂Human Mucin-7, MUC7 Elisa Kit
NeuroGreen™ 淀粉质检测剂I20mg 102-92-1Rat Interleukin 13, IL-13 Elisa KitHPLC95%NeuroGreen™ 淀粉质检测剂I20mgELA4进口、国产单增李氏菌的选择性分离英文名称:Tioconazole Related Compound A25mg重组人 ERP72 / PDIA4 蛋白 (Fc 标签)3776-39-496T成纤维细胞生长因子6(FGF6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%NeuroGreen™ 淀粉质检测剂I20mgELA487-32-1高端化学试剂Human Mucin-7, MUC7 Elisa Kit进口、国产李氏菌的增菌培养英文名称:Acetylcysteine200mg重组人 TMEM27 蛋白 (Fc 标签)特价供应99615-01-796T成纤维细胞生长因子9(FGF9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%NeuroGreen™ 淀粉质检测剂II20mgCPK;CK87-32-1高端化学试剂Human Mucin-7, MUC7 Elisa Kit
NeuroGreen™ 淀粉质检测剂II20mg 10294-28-7Rat Interleukin 15, IL-15 Elisa Kit HPLC95%NeuroGreen™ 淀粉质检测剂II20mgCPK;CK进口、国产李氏菌的增菌培养英文名称:Acetylcysteine200mg重组人 TMEM27 蛋白 (Fc 标签)特价供应99615-01-796T成纤维细胞生长因子9(FGF9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%NeuroGreen™ 淀粉质检测剂II20mgCPK;CK87-32-1高端化学试剂Human Mucin-7, MUC7 Elisa Kit进口、国产李氏菌动力观察,H抗原位相变异试验;化氢、动力、吲哚试验英文名称:Mefenamic Acid 200mg重组人 CLDN11 / Claudin-11 蛋白 (Fc 标签)现货促销149457-83-096T成纤维细胞生长因子9(FGF9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%NeuroRed™淀粉质检测剂I20mgsTf87-32-1高端化学试剂human tranGSlutaminase 2C polypeptide, TGM2 Elisa Kit
NeuroRed™淀粉质检测剂I20mg 10294-28-7Rat Interleukin 15, IL-15 Elisa Kit HPLC95%NeuroRed™淀粉质检测剂I20mgsTf进口、国产李氏菌动力观察,H抗原位相变异试验;化氢、动力、吲哚试验英文名称:Mefenamic Acid 200mg重组人 CLDN11 / Claudin-11 蛋白 (Fc 标签)现货促销149457-83-096T成纤维细胞生长因子9(FGF9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%NeuroRed™淀粉质检测剂I20mgsTf87-32-1高端化学试剂human tranGSlutaminase 2C polypeptide, TGM2 Elisa Kit进口、国产单增李氏菌选择性分离英文名称:10mg重组人 CFHR1 蛋白 (His 标签)特价促销462636-74-496TFMS样酪氨酸激酶3(Flt3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%LLF20mgCEA543-24-8高端化学试剂human tranGSlutaminase 2C polypeptide, TGM2 Elisa Kit
LLF20mgleft-right determination factor 2,LEFTY2 ELISA Kit 10294-29-8Rat Interleukin 16, IL-16 Elisa Kit HPLC95%LLF20mgCEA进口、国产单增李氏菌选择性分离英文名称:10mg重组人 CFHR1 蛋白 (His 标签)特价促销462636-74-496TFMS样酪氨酸激酶3(Flt3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%LLF20mgCEA543-24-8高端化学试剂human tranGSlutaminase 2C polypeptide, TGM2 Elisa Kit进口、国产李氏菌的增菌培养英文名称:Saccharin Sodium 100mg重组人 CLEC4N / CLEC6A / Dectin-2 蛋白 (Fc 标签)154461-64-0高端化学试剂中性粒细胞激活蛋白3(NAP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%>98%20mgGPX543-24-8高端化学试剂Human procollagen Ⅰ N-terminal peptide, PⅠNP Elisa Kit
>98%20mgL-Carnitine ELISA Kit 10294-29-8Rat Interleukin 16, IL-16 Elisa Kit HPLC95%>98%20mgGPX进口、国产李氏菌的增菌培养英文名称:Saccharin Sodium 100mg重组人 CLEC4N / CLEC6A / Dectin-2 蛋白 (Fc 标签)154461-64-0高端化学试剂中性粒细胞激活蛋白3(NAP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%>98%20mgGPX543-24-8高端化学试剂Human procollagen Ⅰ N-terminal peptide, PⅠNP Elisa Kit进口、国产李氏菌的增殖英文名称:Oxytetracycline 200mg重组人 Arginosuccinase / ASL 蛋白 (His & GST 标签)特价供应154418-15-2高端化学试剂中性粒细胞激活蛋白3(NAP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%>99.0%(GC)20mgLp-PLA2543-24-8高端化学试剂Human procollagen Ⅰ N-terminal peptide, PⅠNP Elisa Kit
>99.0%(GC)20mgTFPI-2 ELISA Kit 10294-40-3Rat Interleukin 17, IL-17 Elisa Kit HPLC95%>99.0%(GC)20mgLp-PLA2进口、国产李氏菌的增殖英文名称:Oxytetracycline 200mg重组人 Arginosuccinase / ASL 蛋白 (His & GST 标签)特价供应154418-15-2高端化学试剂中性粒细胞激活蛋白3(NAP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%>99.0%(GC)20mgLp-PLA2543-24-8高端化学试剂Human procollagen Ⅰ N-terminal peptide, PⅠNP Elisa Kit进口、国产大肠杆菌和产气杆菌的鉴别英文名称:100mg重组人 CDCP1 / CD318 蛋白 (Fc 标签)现货促销949926-49-2高端化学试剂粒细胞集落刺激因子(GCSF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%>99.0%(GC)20mgPAI-214907-27-8高端化学试剂Human Cross-linked Carboxy-terminal telopeptide of type Ⅰ collagen, ⅠCTP Elisa Kit
>99.0%(GC)20mgTFPI ELISA Kit 10294-40-3Rat Interleukin 17, IL-17 Elisa Kit HPLC95%>99.0%(GC)20mgPAI-2进口、国产大肠杆菌和产气杆菌的鉴别英文名称:100mg重组人 CDCP1 / CD318 蛋白 (Fc 标签)现货促销949926-49-2高端化学试剂粒细胞集落刺激因子(GCSF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%>99.0%(GC)20mgPAI-214907-27-8高端化学试剂Human Cross-linked Carboxy-terminal telopeptide of type Ⅰ collagen, ⅠCTP Elisa Kit进口、国产细菌脲酶检测,肠杆菌鉴别英文名称:Quinacrine Hydrochloride 200mg重组人 PPIase / FKBP7 蛋白 (His 标签)特价促销170384-75-5高端化学试剂胶质细胞系来源神经营养因子(GDNF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%96%20mgMMP-214907-27-8高端化学试剂Human Cross-linked Carboxy-terminal telopeptide of type Ⅰ collagen, ⅠCTP Elisa Kit
96%20mgmajor histocompatibility complex class I chain-related gene A,MICA ELISA Kit 103008-51-1Rat soluble interleukin-1 receptor Ⅰ, IL-1sRⅠ Elisa Kit HPLC95%96%20mgMMP-2进口、国产细菌脲酶检测,肠杆菌鉴别英文名称:Quinacrine Hydrochloride 200mg重组人 PPIase / FKBP7 蛋白 (His 标签)特价促销170384-75-5高端化学试剂胶质细胞系来源神经营养因子(GDNF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%96%20mgMMP-214907-27-8高端化学试剂Human Cross-linked Carboxy-terminal telopeptide of type Ⅰ collagen, ⅠCTP Elisa Kit进口、国产用于鉴别肠道细菌KCN抑制试验英文名称:Quercetin 500mg重组人 MAG / GMA / Siglec-4 蛋白 (Fc 标签)94656-46-9高端化学试剂生长激素(GH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%>98.0%(GC)20mgSCUBE218598-63-5高端化学试剂Human C-telopeptide of type Ⅰ collagen, CTX-Ⅰ Elisa Kit
>98.0%(GC)20mgtissue polypeptide specific antigen,TPS ELISA Kit 103008-51-1Rat soluble interleukin-1 receptor Ⅰ, IL-1sRⅠ Elisa Kit HPLC95%>98.0%(GC)20mgSCUBE2进口、国产用于鉴别肠道细菌KCN抑制试验英文名称:Quercetin 500mg重组人 MAG / GMA / Siglec-4 蛋白 (Fc 标签)94656-46-9高端化学试剂生长激素(GH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%>98.0%(GC)20mgSCUBE218598-63-5高端化学试剂Human C-telopeptide of type Ⅰ collagen, CTX-Ⅰ Elisa Kit进口、国产肠杆菌科细菌的甲基红和VP试验英文名称:Procainamide Hydrochloride 200mg重组人 MSLN / Mesothelin 蛋白 (His 标签)特价供应6216-81-5高端化学试剂生长激素(GH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%99%20mgADV18598-63-5高端化学试剂Human C-telopeptide of type Ⅰ collagen, CTX-Ⅰ Elisa Kit
储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。