PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
产品名称：布氏杆菌(BS)核酸定量试剂盒
英文名称：详见说明书
编号： FSP2901
分类：核酸检测试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 产品仅供科研从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
数据采集：
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时，吸收光谱在 471nm，结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm，发射光谱在 530nm。
数据处理:
以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴，以 Ct 值为纵轴，通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
Human MTPAP(Poly(A) RNA polymerase, mitochondrial) ELISA KitHuman FAM19A5 ELISA Kit反式-4-羟基-L-脯氨酸甲酯盐酸盐人体SOCS-1基因甲基化检测试剂盒
Human HOGA1(Probable 4-hydroxy-2-oxoglutaRate aldolase, mitochondrial) ELISA KitHuman FAM20 ELISA KitL-环丙基甘氨酸人体SOCS-3基因甲基化检测试剂盒
Human ZNF654(Zinc finger protein 654) ELISA KitHuman FAM3C(Family With Sequence Similarity 3 Member C) ELISA KitL-环丙基甘氨酸人体hMLH1基因甲基化检测试剂盒
Human ERN1(Serine/threonine-protein kinase/endoribonuclease IRE1) ELISA KitHuman FANCA(Fanconi anemia group A protein)L-环丙基甘氨酸人体c－fos基因甲基化检测试剂盒
Human TNN(Tenascin-N) ELISA KitHuman FARSB(Phenylalanine--tRNA ligase beta subunit) ELISA KitL-赖氨酸二盐酸盐大鼠PGES基因甲基化检测试剂盒
Human HBP1(HMG box-containing protein 1) ELISA KitHuman FBXW4(F-box and WD repeat domain containing 4) ELISA KitL-赖氨酸二盐酸盐大鼠COX-1基因甲基化检测试剂盒
Human TSPAN14(Tetraspanin-14) ELISA KitHuman FNIP1(Folliculin-interacting protein 1) ELISA KitL-赖氨酸二盐酸盐小鼠p16基因甲基化检测试剂盒
Human HIST2H2BE(Histone H2B type 2-E) ELISA KitHuman FOXA2(Forkhead box protein A2) ELISA Kit卵磷脂大鼠p16基因甲基化检测试剂盒
布氏杆菌(BS)核酸定量试剂盒FITC-C6-DEVD-FMK20mg 1003043-34-2Rat Anti-Thrombin Ⅲ, AT-Ⅲ Elisa KitHPLC98%FITC-C6-DEVD-FMK20mgFA进口、国产牛奶和乳制品中乳酸菌检测和增菌培养英文名称：Cyclomethicone 4200mg重组人 ARL2BP / BART1 蛋白 (His 标签)特价促销123048-17-996T胰岛素样生长因子1(IGF1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%FITC-C6-DEVD-FMK20mgFA58632-95-4高端化学试剂Human desmogleins 1, DGS-E1 Elisa Kit进口、国产沙门氏菌分离培养英文名称：Cyclomethicone 5200mg重组人 CARHSP1 蛋白 (His 标签)61328-41-496T胰岛素样生长因子2(IGF2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%FITC-C6-LEHD-FMK20mgOVX1123333-53-9高端化学试剂Human CA724 Elisa Kit
FITC-C6-LEHD-FMK20mg 1003043-40-0Rat Anti-Thrombin Ⅲ, AT-Ⅲ Elisa KitHPLC98%FITC-C6-LEHD-FMK20mgOVX1进口、国产沙门氏菌分离培养英文名称：Cyclomethicone 5200mg重组人 CARHSP1 蛋白 (His 标签)61328-41-496T胰岛素样生长因子2(IGF2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%FITC-C6-LEHD-FMK20mgOVX1123333-53-9高端化学试剂Human CA724 Elisa Kit进口、国产分离志贺氏菌属和沙门氏菌英文名称：Cyclomethicone 6200mg重组人 ING4 蛋白 (His 标签)特价供应178468-00-396T胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%Ac-IETD-AFC20mgTPPA123333-53-9高端化学试剂Human CA724 Elisa Kit
Ac-IETD-AFC20mg 1003043-40-0Rat neuropeptide Y, NP-Y Elisa KitHPLC98%Ac-IETD-AFC20mgTPPA进口、国产分离志贺氏菌属和沙门氏菌英文名称：Cyclomethicone 6200mg重组人 ING4 蛋白 (His 标签)特价供应178468-00-396T胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%Ac-IETD-AFC20mgTPPA123333-53-9高端化学试剂Human CA724 Elisa Kit进口、国产细菌总数的测定和分离培养,沙门氏菌分离培养英文名称：20mg重组人 AKR1C2 蛋白 (His 标签)现货促销91590-76-096T载脂蛋白A2(APOA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%Ac-IETD-AMC 20mgCT-IgG123333-53-9高端化学试剂Human neutrophil gelatinase-associated lipocalin, NGAL Elisa Kit
Ac-IETD-AMC 20mg 1003-04-9Rat neuropeptide Y, NP-Y Elisa KitHPLC98%Ac-IETD-AMC 20mgCT-IgG进口、国产细菌总数的测定和分离培养,沙门氏菌分离培养英文名称：20mg重组人 AKR1C2 蛋白 (His 标签)现货促销91590-76-096T载脂蛋白A2(APOA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%Ac-IETD-AMC 20mgCT-IgG123333-53-9高端化学试剂Human neutrophil gelatinase-associated lipocalin, NGAL Elisa Kit进口、国产致病性肠杆菌的分离英文名称：20mg重组人 RCAS1 / EBAG9 蛋白 (His 标签)特价促销118525-37-496T脂联素(ADP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%Ac-IETD-CHO20mgJNK123333-53-9高端化学试剂Human neutrophil gelatinase-associated lipocalin, NGAL Elisa Kit
Ac-IETD-CHO20mg 1003-04-9Rat Growth Hormone Releasing Peptide, GHRP Elisa KitHPLC95%Ac-IETD-CHO20mgJNK进口、国产致病性肠杆菌的分离英文名称：20mg重组人 RCAS1 / EBAG9 蛋白 (His 标签)特价促销118525-37-496T脂联素(ADP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%Ac-IETD-CHO20mgJNK123333-53-9高端化学试剂Human neutrophil gelatinase-associated lipocalin, NGAL Elisa Kit进口、国产病源标本和其他标本中甘露醇阳性金黄色葡萄球菌的选择性分离英文名称：Malic Acid 500mg重组人 MID1IP1 蛋白 (His 标签)53584-43-396T肿瘤坏死因子α(TNFα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%Z-IETD-pNA20mgSMAD-36066-82-6高端化学试剂Human nonsmall cell lung cancer/Lung tumor Antigen, LTA Elisa Kit
Z-IETD-pNA20mg 1003-04-9Rat Growth Hormone Releasing Peptide, GHRP Elisa KitHPLC95%Z-IETD-pNA20mgSMAD-3进口、国产病源标本和其他标本中甘露醇阳性金黄色葡萄球菌的选择性分离英文名称：Malic Acid 500mg重组人 MID1IP1 蛋白 (His 标签)53584-43-396T肿瘤坏死因子α(TNFα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%Z-IETD-pNA20mgSMAD-36066-82-6高端化学试剂Human nonsmall cell lung cancer/Lung tumor Antigen, LTA Elisa Kit进口、国产假单胞菌属分离培养英文名称：Diacetylated Monoglycerides200mg重组人 B3GALTL 蛋白 (His 标签)特价供应83104-86-396T脂质转运蛋白(CETP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%D-氨基虫荧光素20mgmgs6066-82-6高端化学试剂Human nonsmall cell lung cancer/Lung tumor Antigen, LTA Elisa Kit
D-氨基虫荧光素20mg 100306-33-0Rat Gelsolin Elisa KitHPLC95%D-氨基虫荧光素20mgmgs进口、国产假单胞菌属分离培养英文名称：Diacetylated Monoglycerides200mg重组人 B3GALTL 蛋白 (His 标签)特价供应83104-86-396T脂质转运蛋白(CETP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%D-氨基虫荧光素20mgmgs6066-82-6高端化学试剂Human nonsmall cell lung cancer/Lung tumor Antigen, LTA Elisa Kit进口、国产霉菌分离培养和霉菌酵母菌计数英文名称：Monoglycerides125mg重组人 Lysozyme 2 / LYZL2 蛋白 (His 标签)现货促销83104-87-496T神经型一氧化氮合酶(NOS1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%Z-DEVD-AFC 20mgVEGF-Ab6066-82-6高端化学试剂Human tumor marker DR-70 for lung cancer, DR-70TM Elisa Kit
Z-DEVD-AFC 20mg 100306-33-0Rat Gelsolin Elisa KitHPLC95%Z-DEVD-AFC 20mgVEGF-Ab进口、国产霉菌分离培养和霉菌酵母菌计数英文名称：Monoglycerides125mg重组人 Lysozyme 2 / LYZL2 蛋白 (His 标签)现货促销83104-87-496T神经型一氧化氮合酶(NOS1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%Z-DEVD-AFC 20mgVEGF-Ab6066-82-6高端化学试剂Human tumor marker DR-70 for lung cancer, DR-70TM Elisa Kit进口、国产沙门氏菌分离培养英文名称：25mg重组人 IL22 / IL-22 / Interleukin 22 蛋白特价促销167882-66-896T转化生长因子β1(TGFβ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%Z-DEVD-AMC 20mgCXCL56066-82-6高端化学试剂Human tumor marker DR-70 for lung cancer, DR-70TM Elisa Kit
Z-DEVD-AMC 20mg 100306-33-0Rat receptor activator of nuclear factor kappa B ligand, RANKL Elisa KitHPLC95%Z-DEVD-AMC 20mgCXCL5进口、国产沙门氏菌分离培养英文名称：25mg重组人 IL22 / IL-22 / Interleukin 22 蛋白特价促销167882-66-896T转化生长因子β1(TGFβ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%Z-DEVD-AMC 20mgCXCL56066-82-6高端化学试剂Human tumor marker DR-70 for lung cancer, DR-70TM Elisa Kit进口、国产用于梭菌增菌培养英文名称：Piroctone Olamine 200mg重组人 LFA-3 / CD58 蛋白 (His 标签)87064-16-296T丙酮酸脱氢酶酸酶(PDP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%Z-DEVD-pNA20mgTPOR56-12-2高端化学试剂Human fetal sulfoslycoprotein antigen, FSA Elisa Kit
Z-DEVD-pNA20mg 100306-34-1Rat receptor activator of nuclear factor kappa B ligand, RANKL Elisa KitHPLC95%Z-DEVD-pNA20mgTPOR进口、国产用于梭菌增菌培养英文名称：Piroctone Olamine 200mg重组人 LFA-3 / CD58 蛋白 (His 标签)87064-16-296T丙酮酸脱氢酶酸酶(PDP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%Z-DEVD-pNA20mgTPOR56-12-2高端化学试剂Human fetal sulfoslycoprotein antigen, FSA Elisa Kit进口、国产营养要求较高的细菌的培养基及溶血试验，梭菌的检测英文名称：Astemizole200mg重组人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 蛋白特价供应1163728-89-996Tα2-纤溶酶抑制因子(α2PI)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%Z-IETD-AFC20mgGCMC-IgM56-12-2高端化学试剂Human fetal sulfoslycoprotein antigen, FSA Elisa Kit
储存条件：
仅用于科研14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
