PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
产品名称：口蹄疫病毒O型(FMDV-O)核酸检测试剂盒
英文名称：详见说明书
编号： FSP2894
分类：核酸检测试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 产品仅供科研从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
数据采集：
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时，吸收光谱在 471nm，结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm，发射光谱在 530nm。
数据处理:
以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴，以 Ct 值为纵轴，通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
Human IFITM10(Interferon-induced transmembrane protein 10) ELISA KitHuman APLP2(Amyloid-like protein 2) ELISA KitL-抗坏血酸RNA电泳样品处理液
Human IL2RG(Cytokine receptor common subunit gamma) ELISA KitHuman APPL2(DCC-Interacting Protein 13-Beta) ELISA Kit维生素C分子生物级溴化乙锭（Ethidium Bromide）染色液（1毫克/毫升）或（10毫克/毫升）
Human DSG3(Desmoglein-3) ELISA KitHuman ARHGDIB(Rho GDP-dissociation inhibitor 2) ELISA KitL-谷氨酸SYBR绿色荧光核酸染色试剂盒（配制25毫升/次）
Human NOX1(NADPH oxidase 1) ELISA KitHuman ARNTL(Aryl hydrocarbon receptor nuclear translocator-like protein 1) ELISA KitL-谷氨酸SYBR绿色荧光核酸染色（20X）
Human LAD1(Ladinin-1) ELISA KitHuman ASTL(Astacin-like metalloendopeptidase) ELISA KitL-谷氨酸溴酚蓝（BROMPHENOL BLUE）溶液（100毫克/毫升）
Human ITGA5(Integrin alpha-5) ELISA KitHuman ATG7(Autophagy-related protein 7) ELISA KitL-缬氨酰胺盐酸盐DNA银染试剂盒
Human XBP1(X-box-binding protein 1) ELISA KitHuman ATPB(ATP synthase subunit beta) ELISA KitL-缬氨酰胺盐酸盐细胞荧光素酶活性化学发光法定量检测试剂盒
Human DKK2(Dickkopf-related protein 2) ELISA KitHuman AXL(Tyrosine-protein kinase receptor UFO) ELISA KitL-缬氨酰胺盐酸盐细胞β-半乳糖苷酶活性原位染色试剂盒
口蹄疫病毒O型(FMDV-O)核酸检测试剂盒酚红钠盐 20mg 108-37-2Rat prostate specific antigen, PSA Elisa KitHPLC98%酚红钠盐 20mgIL-8进口、国产一般细菌培养英文名称：75mg重组人 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白 (His 标签)特价供应916917-28-796T雄烯二酮(ASD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%酚红钠盐 20mgIL-869242-40-6高端化学试剂Human brain natriuretic peptide, BNP Elisa Kit进口、国产一般细菌培养英文名称：Dantrolene200mg重组人 NCF-2 / NCF2 / P67phox 蛋白 (His & GST 标签)现货促销97230-46-196T胱天蛋白酶14(CASP14)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%酚红钠盐 20mgβGAL69242-40-6高端化学试剂Human cytokeratin 20, CK20 Elisa Kit
酚红钠盐 20mg 108448-77-7Rat prostate specific antigen, PSA Elisa KitHPLC98%酚红钠盐 20mgβGAL进口、国产一般细菌培养英文名称：Dantrolene200mg重组人 NCF-2 / NCF2 / P67phox 蛋白 (His & GST 标签)现货促销97230-46-196T胱天蛋白酶14(CASP14)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%酚红钠盐 20mgβGAL69242-40-6高端化学试剂Human cytokeratin 20, CK20 Elisa Kit进口、国产用于靛基质试验英文名称：Rifabutin50mg重组人 Biotinidase / Biotinase / BTD 蛋白 (His 标签)特价促销620-61-196T胱天蛋白酶14(CASP14)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%B-藻红蛋白20mgSBPase69242-40-6高端化学试剂Human cytokeratin 20, CK20 Elisa Kit
B-藻红蛋白20mg 108448-77-7Rat ovarian cancer marker-CA125 Elisa KitHPLC98%B-藻红蛋白20mgSBPase进口、国产用于靛基质试验英文名称：Rifabutin50mg重组人 Biotinidase / Biotinase / BTD 蛋白 (His 标签)特价促销620-61-196T胱天蛋白酶14(CASP14)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%B-藻红蛋白20mgSBPase69242-40-6高端化学试剂Human cytokeratin 20, CK20 Elisa Kit进口、国产副溶血性弧菌的选择性增菌培养英文名称：Methicillin Sodium (AS)500mg重组人 GMPR / GMPR1 蛋白 (His 标签)41682-24-096T胱天蛋白酶14(CASP14)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%交联藻蓝蛋白20mgSM-IgG20274-89-9高端化学试剂human Beta-Endorphin, β-EP Elisa Kit
交联藻蓝蛋白20mg 108448-77-7Rat ovarian cancer marker-CA125 Elisa KitHPLC98%交联藻蓝蛋白20mgSM-IgG进口、国产副溶血性弧菌的选择性增菌培养英文名称：Methicillin Sodium (AS)500mg重组人 GMPR / GMPR1 蛋白 (His 标签)41682-24-096T胱天蛋白酶14(CASP14)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%交联藻蓝蛋白20mgSM-IgG20274-89-9高端化学试剂human Beta-Endorphin, β-EP Elisa Kit进口、国产常用细菌斜面传代英文名称：Oxacillin Sodium 200mg重组人 NAPG / Gamma SNAP 蛋白 (His 标签)特价供应106647-14-796T表睾酮(ET)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%C-藻蓝蛋白20mgsSEMA7A20274-89-9高端化学试剂human Beta-Endorphin, β-EP Elisa Kit
C-藻蓝蛋白20mg 108-52-1Rat mammary carcinoma Marker-CA153 Elisa KitHPLC98%C-藻蓝蛋白20mgsSEMA7A进口、国产常用细菌斜面传代英文名称：Oxacillin Sodium 200mg重组人 NAPG / Gamma SNAP 蛋白 (His 标签)特价供应106647-14-796T表睾酮(ET)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%C-藻蓝蛋白20mgsSEMA7A20274-89-9高端化学试剂human Beta-Endorphin, β-EP Elisa Kit进口、国产供分离营养要求较高的致病菌用英文名称：50mg重组人 CSEN / Calsenilin / KCNIP3 蛋白 (His 标签)现货促销329361-25-396T雌二醇(E2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%别藻蓝蛋白20mgβ-cm107-35-7高端化学试剂Human N-terminal pro-brain natriuretic peptide, NT-proBNP Elisa Kit
别藻蓝蛋白20mg 108-52-1Rat mammary carcinoma Marker-CA153 Elisa KitHPLC98%别藻蓝蛋白20mgβ-cm进口、国产供分离营养要求较高的致病菌用英文名称：50mg重组人 CSEN / Calsenilin / KCNIP3 蛋白 (His 标签)现货促销329361-25-396T雌二醇(E2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%别藻蓝蛋白20mgβ-cm107-35-7高端化学试剂Human N-terminal pro-brain natriuretic peptide, NT-proBNP Elisa Kit进口、国产结核杆菌的培养,计数保存,照光试验,药物敏感性测定及菌型鉴定英文名称：Sulfamethoxazole 200mg重组人 PSME3 / PA28-gamma 蛋白 (His 标签)特价促销105317-67-796T1,25-二羟基维生素D3(DHVD3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%R-藻红蛋白20mgJEV-IgG Ab107-35-7高端化学试剂Human N-terminal pro-brain natriuretic peptide, NT-proBNP Elisa Kit
R-藻红蛋白20mg 108-52-1Rat Gastrointestinalcancer Marker-CA199 Elisa KitHPLC98%R-藻红蛋白20mgJEV-IgG Ab进口、国产结核杆菌的培养,计数保存,照光试验,药物敏感性测定及菌型鉴定英文名称：Sulfamethoxazole 200mg重组人 PSME3 / PA28-gamma 蛋白 (His 标签)特价促销105317-67-796T1,25-二羟基维生素D3(DHVD3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%R-藻红蛋白20mgJEV-IgG Ab107-35-7高端化学试剂Human N-terminal pro-brain natriuretic peptide, NT-proBNP Elisa Kit进口、国产分枝杆菌的分离培养英文名称：Mestranol200mg重组人 COMMD8 蛋白 (His 标签)184288-35-596T衰变加速因子(DAF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%6-氨基己醇20mgGliadin-IgA107-35-7高端化学试剂Human Pro Atrial Natriuretic Peptide, Pro-ANP Elisa Kit
6-氨基己醇20mg 108-85-0Rat Gastrointestinalcancer Marker-CA199 Elisa KitHPLC98%6-氨基己醇20mgGliadin-IgA进口、国产分枝杆菌的分离培养英文名称：Mestranol200mg重组人 COMMD8 蛋白 (His 标签)184288-35-596T衰变加速因子(DAF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%6-氨基己醇20mgGliadin-IgA107-35-7高端化学试剂Human Pro Atrial Natriuretic Peptide, Pro-ANP Elisa Kit 进口、国产分枝杆菌的分离培养英文名称：Methylene Blue 250mg重组人 PA28A / PSME1 蛋白 (His 标签)特价供应59952-97-596T骨钙素(OC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%6-氨基己醇20mgPF-4；CXCL43144-16-9高端化学试剂Human Pro Atrial Natriuretic Peptide, Pro-ANP Elisa Kit
6-氨基己醇20mg 108-85-0Rat heme oxygenase 1, HO-1 Elisa KitHPLC95%6-氨基己醇20mgPF-4；CXCL4进口、国产分枝杆菌的分离培养英文名称：Methylene Blue 250mg重组人 PA28A / PSME1 蛋白 (His 标签)特价供应59952-97-596T骨钙素(OC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%6-氨基己醇20mgPF-4；CXCL43144-16-9高端化学试剂Human Pro Atrial Natriuretic Peptide, Pro-ANP Elisa Kit 进口、国产分离培养和鉴别气单胞菌英文名称：L-Threonine 200mg重组人 Phosphomannomutase 2 / PMM2 / CDG1 蛋白 (His 标签)现货促销79103-90-596T骨钙素(OC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%N-BOC-尸胺20mgHLA-Dr153144-16-9高端化学试剂Human cytokeratin 13, CK-13 Elisa Kit
N-BOC-尸胺20mg 108-85-0Rat heme oxygenase 1, HO-1 Elisa KitHPLC98%N-BOC-尸胺20mgHLA-Dr15进口、国产分离培养和鉴别气单胞菌英文名称：L-Threonine 200mg重组人 Phosphomannomutase 2 / PMM2 / CDG1 蛋白 (His 标签)现货促销79103-90-596T骨钙素(OC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%N-BOC-尸胺20mgHLA-Dr153144-16-9高端化学试剂Human cytokeratin 13, CK-13 Elisa Kit进口、国产曲霉菌分离培养英文名称：L-Valine 200mg重组人 PSME2 / PA28b 蛋白 (His 标签)特价促销120406-37-396T骨钙素(OC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%N-BOC-尸胺20mgERα3144-16-9高端化学试剂Human cytokeratin 13, CK-13 Elisa Kit
储存条件：
仅用于科研14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
