PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
产品名称：猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)核酸检测试剂盒
英文名称：详见说明书
编号： FSP2882
分类：核酸检测试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 产品仅供科研从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
数据采集：
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时，吸收光谱在 471nm，结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm，发射光谱在 530nm。
数据处理:
以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴，以 Ct 值为纵轴，通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
Human SCAMP1(Secretory carrier-associated membrane protein 1) ELISA KitHuman A16-IgM(Coxsackie virus A16-Immunoglobulin M) ELISA Kit氘代氢化锂铝一步法RT－PCR试剂盒
Human SKP2(S-phase kinase-associated protein 2) ELISA KitHuman HP-IgG(Helicobcter Pylori-Immunoglobulin G) ELISA Kit氘代氢化锂铝直接细胞克隆两步法逆转录PCR试剂盒
Human SPAG1(Sperm-associated antigen 1) ELISA KitHuman MP-IgG(Mycoplasma pneumoniae-Immunoglobulin G) ELISA KitL-瓜氨酸两步法RT－PCR荧光定量试剂盒
Human CHID1(Chitinase domain-containing protein 1) ELISA KitHuman MP-IgM(Mycoplasma pneumoniae-Immunoglobulin M) ELISA KitL-瓜氨酸逆转录RT试剂盒
Human DUSP1(Dual specificity protein phosphatase 1) ELISA KitHuman CP-IgG(chlamydia pneumoniae-Immunoglobulin G) ELISA KitL-叔亮氨醇体外RNA转录合成试剂盒
Human PARP2(Poly [ADP-ribose] polymerase 2) ELISA KitHuman CP-IgM(chlamydia pneumoniae-Immunoglobulin M) ELISA KitL-叔亮氨醇体外加帽RNA转录合成试剂盒
Human GPX3(Glutathione peroxidase 3) ELISA KitHuman MV-IgG(Measles virus-Immunoglobulin G) ELISA KitL-叔亮氨醇RNasin（核糖核酸酶抑制剂）
Human CTSF(Cathepsin F) ELISA KitHuman MV-IgM(Measles virus-Immunoglobulin M) ELISA KitL-苹果酸MMLV（H点突变）
猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)核酸检测试剂盒2-氨基吖啶酮 5mg 104-86-9Rat Glycogen phosphorylase BB, GP-BB Elisa KitHPLC98%2-氨基吖啶酮 5mgEP2进口、国产200英文名称：25mg重组人 S100A4 蛋白 (His 标签)特价供应20310-89-896T转化生长因子β2(TGFβ2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%2-氨基吖啶酮 5mgEP26600-40-4高端化学试剂Human insulin-like growth factors binding protein 4, IGFBP-4 Elisa Kit 进口、国产250英文名称：15mg重组人 CD81 / TAPA-1 蛋白现货促销17008-65-096T转录因子20(TCF20)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%EDANS酸5mgTDR6600-40-4高端化学试剂Human insulin-like growth factors binding protein 3, IGFBP-3 Elisa Kit
EDANS酸5mg 104-86-9Rat Glycogen phosphorylase BB, GP-BB Elisa KitHPLC98%EDANS酸5mgTDR进口、国产250英文名称：15mg重组人 CD81 / TAPA-1 蛋白现货促销17008-65-096T转录因子20(TCF20)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%EDANS酸5mgTDR6600-40-4高端化学试剂Human insulin-like growth factors binding protein 3, IGFBP-3 Elisa Kit 进口、国产250英文名称：15mg重组人 STC2 / Stanniocalcin 2 蛋白 (His 标签)特价促销19865-76-096T干扰素β(IFNβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%EDANS酸5mgNestin 2013-12-9高端化学试剂Human insulin-like growth factors binding protein 3, IGFBP-3 Elisa Kit
EDANS酸5mg 104-86-9Rat Thyroxine antibody, TAb Elisa KitHPLC98%EDANS酸5mgNestin进口、国产250英文名称：15mg重组人 STC2 / Stanniocalcin 2 蛋白 (His 标签)特价促销19865-76-096T干扰素β(IFNβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%EDANS酸5mgNestin 2013-12-9高端化学试剂Human insulin-like growth factors binding protein 3, IGFBP-3 Elisa Kit 进口、国产100英文名称：Methyl Ethyl Ketone1.2ml×3ampules重组人 KEAP1 / INRF2 蛋白 (His & GST 标签)20958-18-396T心钠肽(ANP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%EDANS钠盐5mgART1 2013-12-9高端化学试剂Human insulin-like growth factors binding protein 2, IGFBP-2 Elisa Kit
EDANS钠盐5mg 104-93-8Rat Thyroxine antibody, TAb Elisa KitHPLC98%EDANS钠盐5mgART1进口、国产100英文名称：Methyl Ethyl Ketone1.2ml×3ampules重组人 KEAP1 / INRF2 蛋白 (His & GST 标签)20958-18-396T心钠肽(ANP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%EDANS钠盐5mgART1 2013-12-9高端化学试剂Human insulin-like growth factors binding protein 2, IGFBP-2 Elisa Kit 进口、国产100英文名称：2-Butanol1.2ml×3ampules重组人 ESM1 / Endocan 蛋白 (His 标签)特价供应24915-04-696T抗缪勒管激素(AMH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%EDANS钠盐5mgYFV-IgM 2013-12-9高端化学试剂Human insulin-like growth factors binding protein 2, IGFBP-2 Elisa Kit
EDANS钠盐5mg 104-93-8Rat thyroid stimulating hormone receptor antidoby, TRAb Elisa KitHPLC98%EDANS钠盐5mgYFV-IgM进口、国产100英文名称：2-Butanol1.2ml×3ampules重组人 ESM1 / Endocan 蛋白 (His 标签)特价供应24915-04-696T抗缪勒管激素(AMH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%EDANS钠盐5mgYFV-IgM 2013-12-9高端化学试剂Human insulin-like growth factors binding protein 2, IGFBP-2 Elisa Kit 进口、国产100英文名称：2-Methyl-1-propanol1.2ml×3ampules重组人 CCL23 / MIP 3 蛋白现货促销33627-28-096T丝氨酸蛋白酶1(PRSS1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%EDANS C2 马来酰亚胺5mgHBD-130327-56-0高端化学试剂Human insulin-like growth factors binding protein 1, IGFBP-1 Elisa Kit
EDANS C2 马来酰亚胺5mg 104-93-8Rat thyroid stimulating hormone receptor antidoby, TRAb Elisa KitHPLC98%EDANS C2 马来酰亚胺5mgHBD-130进口、国产100英文名称：2-Methyl-1-propanol1.2ml×3ampules重组人 CCL23 / MIP 3 蛋白现货促销33627-28-096T丝氨酸蛋白酶1(PRSS1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%EDANS C2 马来酰亚胺5mgHBD-130327-56-0高端化学试剂Human insulin-like growth factors binding protein 1, IGFBP-1 Elisa Kit 进口、国产BR英文名称：Flumazenil200mg重组人 Beta-amyloid 38 / Beta-APP38 蛋白 (aa 672-709, His & GST 标签)特价促销110241-19-596T着丝粒蛋白I(CENPI)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%EDANS 碘乙酰胺5mgHBxAg327-56-0高端化学试剂Human insulin-like growth factors binding protein 1, IGFBP-1 Elisa Kit
EDANS 碘乙酰胺5mg 105-09-9Rat catecholamine, CA Elisa KitHPLC98%EDANS 碘乙酰胺5mgHBxAg进口、国产BR英文名称：Flumazenil200mg重组人 Beta-amyloid 38 / Beta-APP38 蛋白 (aa 672-709, His & GST 标签)特价促销110241-19-596T着丝粒蛋白I(CENPI)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%EDANS 碘乙酰胺5mgHBxAg327-56-0高端化学试剂Human insulin-like growth factors binding protein 1, IGFBP-1 Elisa Kit 进口、国产BR英文名称：Terbinafine Hydrochloride 200mg重组人 Beta-amyloid 39 / Beta-APP39 蛋白 (aa 672-710, His & GST 标签)86377-52-896T免疫球蛋白G4(IgG4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%8-氨基芘-1,3,6-三磺酸三钠盐5mgHAS1327-56-0高端化学试剂Human insulin-like growth factors 2, IGF-2 Elisa Kit
8-氨基芘-1,3,6-三磺酸三钠盐5mg 105-09-9Rat catecholamine, CA Elisa KitHPLC98%8-氨基芘-1,3,6-三磺酸三钠盐5mgHAS1进口、国产BR英文名称：Terbinafine Hydrochloride 200mg重组人 Beta-amyloid 39 / Beta-APP39 蛋白 (aa 672-710, His & GST 标签)86377-52-896T免疫球蛋白G4(IgG4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%8-氨基芘-1,3,6-三磺酸三钠盐5mgHAS1327-56-0高端化学试剂Human insulin-like growth factors 2, IGF-2 Elisa Kit 进口、国产BR英文名称：20mg重组人 CD47 蛋白 (Fc 标签)特价供应294674-09-296T补体1抑制因子(C1INH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%mBBr 5mgHAS3327-57-1高端化学试剂Human insulin-like growth factors 2, IGF-2 Elisa Kit
mBBr 5mg 105-11-3Rat Interleukin 27, IL-27 Elisa KitHPLC98%mBBr 5mgHAS3进口、国产BR英文名称：20mg重组人 CD47 蛋白 (Fc 标签)特价供应294674-09-296T补体1抑制因子(C1INH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%mBBr 5mgHAS3327-57-1高端化学试剂Human insulin-like growth factors 2, IGF-2 Elisa Kit 进口、国产蛋白组级英文名称：Carisoprodol1g重组人 TNFR2 / CD120b / TNFRSF1B 蛋白 (aa 1-268, 196 Met/Arg, His 标签)现货促销149507-55-196T前列腺素F受体(FP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%bBBr5mgUdgIgA327-57-1高端化学试剂Human insulin-like growth factors 1, IGF-1 Elisa Kit
bBBr5mg 105-11-3Rat Interleukin 27, IL-27 Elisa KitHPLC98%bBBr5mgUdgIgA进口、国产蛋白组级英文名称：Carisoprodol1g重组人 TNFR2 / CD120b / TNFRSF1B 蛋白 (aa 1-268, 196 Met/Arg, His 标签)现货促销149507-55-196T前列腺素F受体(FP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%bBBr5mgUdgIgA327-57-1高端化学试剂Human insulin-like growth factors 1, IGF-1 Elisa Kit 进口、国产BR英文名称：Ceftazidime Pentahydrate300mg重组人 PROC1 / Protein C / PROC 蛋白 (His 标签)特价促销508182-41-096T前列腺素E受体2(EP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%Dansyl 尸胺5mgHAS1327-57-1高端化学试剂Human insulin-like growth factors 1, IGF-1 Elisa Kit
储存条件：
仅用于科研14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
