储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 产品仅供科研血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
产品名称:猪蓝耳病病毒通用型(PRRSV-U)核酸试剂盒
英文名称:详见说明书
编号: FSP2880
分类:核酸检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
Human AMPK(Phosphorylated Adenosine Monophosphate Activated Protein Kinase) ELISA KitHuman SH3BP2(SH3 Domain Binding Protein 2) ELISA KitL-异亮酰胺盐酸盐真菌/酵母细胞总RNA分离试剂盒
Human anti AMPH(anti amphiphysin) ELISA KitHuman SAT1(Diamine acetyltransferase 1) ELISA KitL-异亮酰胺盐酸盐石蜡切片组织总RNA分离试剂盒
Human ANG I(Angiotensin I) ELISA KitHuman IFNA2(Inteferon alpha 2a) ELISA KitL-异亮酰胺盐酸盐细胞/组织线粒体RNA分离试剂盒
Human AMPK(Phosphorylated Adenosine Monophosphate Activated Protein Kinase) ELISA KitHuman SCUBE2(Signal peptide, CUB and EGF-like domain-containing protein 2) ELISA KitL-苯丙氨酸TRIZOL试剂
Human ADRP(Adipose Differentiation Related Protein) ELISA KitHuman beta 1-ARA(beta 1 adrenergic receptor autoantibody) ELISA KitL-苯丙氨酸DNA清除试剂盒
Human A-GHR(Acylated Ghrelin) ELISA KitHuman Spexin ELISA KitL-苯丙氨酸桌面DNA清除溶液
Human AGGF1(Angiogenic Factor with G Patch and FHA Domains 1) ELISA KitHuman Wnt6(Protein Wnt-6) ELISA KitL-苯丙氨酸DEPC水
Human his(Histamine) ELISA KitHuman NEXN(Nexilin) ELISA Kit碳酸锂DMDC水
猪蓝耳病病毒通用型(PRRSV-U)核酸试剂盒5-TAMRA尸胺5mg 104372-31-8Rat Follistatin, FS Elisa KitHPLC98%5-TAMRA尸胺5mgHMGCS进口、国产250英文名称:Candelilla Wax250mg重组人 FAM171B / KIAA1946 蛋白 (His 标签)特价供应146018-90-896T胃蛋白酶原C(PGC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%5-TAMRA尸胺5mgHMGCS2133-40-6高端化学试剂Human Interleukin 2, IL-2 Elisa Kit 进口、国产250英文名称:50mg重组人 AGA / ASRG / Aspartylglucosaminidase 蛋白 (His 标签)现货促销495-82-996T前列腺素E合酶(PTGES)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%6-TAMRA 尸胺5mgHMG2133-40-6高端化学试剂Human Interleukin 1α, IL-1α Elisa Kit
6-TAMRA 尸胺5mg 104372-31-8Rat Follistatin, FS Elisa KitHPLC98%6-TAMRA 尸胺5mgHMG进口、国产250英文名称:50mg重组人 AGA / ASRG / Aspartylglucosaminidase 蛋白 (His 标签)现货促销495-82-996T前列腺素E合酶(PTGES)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%6-TAMRA 尸胺5mgHMG2133-40-6高端化学试剂Human Interleukin 1α, IL-1α Elisa Kit 进口、国产250英文名称:Palm Oil (AS)1g重组人 Statherin / STATH 蛋白 (Fc 标签)特价促销537-26-896T前列腺酸性酸酶(ACP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%四甲基罗丹明-5-碘乙酰胺5mgNQO12133-40-6高端化学试剂Human Interleukin 1α, IL-1α Elisa Kit
四甲基罗丹明-5-碘乙酰胺5mg 104-47-2Rat Histone Deacetylase, HD Elisa Kit HPLC98%四甲基罗丹明-5-碘乙酰胺5mgNQO1进口、国产250英文名称:Palm Oil (AS)1g重组人 Statherin / STATH 蛋白 (Fc 标签)特价促销537-26-896T前列腺酸性酸酶(ACP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%四甲基罗丹明-5-碘乙酰胺5mgNQO12133-40-6高端化学试剂Human Interleukin 1α, IL-1α Elisa Kit 进口、国产250英文名称:Paraffin 1g重组人 TMUB2 蛋白 (His 标签)487-27-496T热休克转录因子4(HSF4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%四甲基罗丹明-5(6)-马来酰亚胺(混合物)5mgHCMV-IgA16652-71-4高端化学试剂Human soluble interleukin-1 receptor Ⅱ, IL-1sRⅡ Elisa Kit
四甲基罗丹明-5(6)-马来酰亚胺(混合物)5mg 104-47-2Rat Histone Deacetylase, HD Elisa Kit HPLC98%四甲基罗丹明-5(6)-马来酰亚胺(混合物)5mgHCMV-IgA进口、国产250英文名称:Paraffin 1g重组人 TMUB2 蛋白 (His 标签)487-27-496T热休克转录因子4(HSF4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%四甲基罗丹明-5(6)-马来酰亚胺(混合物)5mgHCMV-IgA16652-71-4高端化学试剂Human soluble interleukin-1 receptor Ⅱ, IL-1sRⅡ Elisa Kit 进口、国产250英文名称:350mg重组人 SUSD4 / Sushi domain-containing protein 4 蛋白 (Fc 标签)特价供应533-08-496T转化生长因子β1(TGFβ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%四甲基罗丹明-5-马来酰亚胺(单一化合物)5mgPC16652-71-4高端化学试剂Human soluble interleukin-1 receptor Ⅱ, IL-1sRⅡ Elisa Kit
四甲基罗丹明-5-马来酰亚胺(单一化合物)5mg 104-47-2Rat E-Selectin Elisa Kit HPLC98%四甲基罗丹明-5-马来酰亚胺(单一化合物)5mgPC进口、国产250英文名称:350mg重组人 SUSD4 / Sushi domain-containing protein 4 蛋白 (Fc 标签)特价供应533-08-496T转化生长因子β1(TGFβ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%四甲基罗丹明-5-马来酰亚胺(单一化合物)5mgPC16652-71-4高端化学试剂Human soluble interleukin-1 receptor Ⅱ, IL-1sRⅡ Elisa Kit 进口、国产250英文名称:Cod Liver Oil1g重组人 SCG2 / Secretogranin II 蛋白 (His 标签)现货促销11051-94-896T髓鞘型脂肪酸结合蛋白(FABP8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%四甲基罗丹明-6-马来酰亚胺(单一化合物)5mgPRE16652-71-4高端化学试剂Human soluble interleukin-1 receptor Ⅰ, IL-1sRⅠ Elisa Kit
四甲基罗丹明-6-马来酰亚胺(单一化合物)5mg 104-49-4Rat E-Selectin Elisa Kit HPLC98%四甲基罗丹明-6-马来酰亚胺(单一化合物)5mgPRE进口、国产250英文名称:Cod Liver Oil1g重组人 SCG2 / Secretogranin II 蛋白 (His 标签)现货促销11051-94-896T髓鞘型脂肪酸结合蛋白(FABP8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%四甲基罗丹明-6-马来酰亚胺(单一化合物)5mgPRE16652-71-4高端化学试剂Human soluble interleukin-1 receptor Ⅰ, IL-1sRⅠ Elisa Kit 进口、国产250英文名称:5ml重组人 BTN3A3 蛋白 (His 标签)特价促销90364-90-296TⅢ型胶原(COL3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%磺基罗丹明B磺酰5mgAP40216-83-9高端化学试剂Human soluble interleukin-1 receptor Ⅰ, IL-1sRⅠ Elisa Kit
磺基罗丹明B磺酰5mg 104-49-4Rat Methylase Elisa KitHPLC98%磺基罗丹明B磺酰5mgAP进口、国产250英文名称:5ml重组人 BTN3A3 蛋白 (His 标签)特价促销90364-90-296TⅢ型胶原(COL3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%磺基罗丹明B磺酰5mgAP40216-83-9高端化学试剂Human soluble interleukin-1 receptor Ⅰ, IL-1sRⅠ Elisa Kit 进口、国产1ml*5支英文名称:Corn Oil (AS)1g重组人 LRG1 蛋白 (His 标签)141626-36-096TⅣ型胶原(COL4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%磺基罗丹明101磺酰5mgLecithin40216-83-9高端化学试剂Human Interleukin 16, IL-16 Elisa Kit
磺基罗丹明101磺酰5mg 104-49-4Rat Methylase Elisa KitHPLC98%磺基罗丹明101磺酰5mgLecithin进口、国产1ml*5支英文名称:Corn Oil (AS)1g重组人 LRG1 蛋白 (His 标签)141626-36-096TⅣ型胶原(COL4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%磺基罗丹明101磺酰5mgLecithin40216-83-9高端化学试剂Human Interleukin 16, IL-16 Elisa Kit 进口、国产250英文名称:Cottonseed Oil (AS)1g重组人 LRG1 蛋白 (Fc 标签)特价供应104632-25-996T中性粒细胞弹性蛋白酶(ELA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%磺基罗丹明101磺酰肼5mgAIV-H5N140216-83-9高端化学试剂Human Interleukin 16, IL-16 Elisa Kit
磺基罗丹明101磺酰肼5mg 104-52-9Rat proliferating cell nuclear antigen antibody, PCNA Elisa KitHPLC98%磺基罗丹明101磺酰肼5mgAIV-H5N1进口、国产250英文名称:Cottonseed Oil (AS)1g重组人 LRG1 蛋白 (Fc 标签)特价供应104632-25-996T中性粒细胞弹性蛋白酶(ELA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%磺基罗丹明101磺酰肼5mgAIV-H5N140216-83-9高端化学试剂Human Interleukin 16, IL-16 Elisa Kit 进口、国产250英文名称:Olive Oil (AS)1g重组人 CGREF1 蛋白 (His 标签)现货促销600-57-796T透明质酸(HA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%磺基罗丹明101尸磺胺5mgPI3K39994-75-7高端化学试剂Human Interleukin 13, IL-13 Elisa Kit
磺基罗丹明101尸磺胺5mg 104-52-9Rat proliferating cell nuclear antigen antibody, PCNA Elisa KitHPLC98%磺基罗丹明101尸磺胺5mgPI3K进口、国产250英文名称:Olive Oil (AS)1g重组人 CGREF1 蛋白 (His 标签)现货促销600-57-796T透明质酸(HA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%磺基罗丹明101尸磺胺5mgPI3K39994-75-7高端化学试剂Human Interleukin 13, IL-13 Elisa Kit 进口、国产250g英文名称:Ammonium Carbonate (AS)2g重组人 CALCB / CGPR / Calcitonin 2 蛋白 (Fc 标签)特价促销66737-54-096T氨基己糖苷酶Aα(HEXα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%AMCA酸 5mgRSV Antigen Ab39994-75-7高端化学试剂Human Interleukin 13, IL-13 Elisa Kit
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
数据采集:
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm,发射光谱在 530nm。
数据处理:
以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴,以 Ct 值为纵轴,通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。