PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
产品名称:猪链球菌型(SS-)核酸检测试剂盒
英文名称:详见说明书
编号: FSP2876
分类:核酸检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 产品仅供科研从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
数据采集:
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm,发射光谱在 530nm。
数据处理:
以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴,以 Ct 值为纵轴,通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
Human ATGA/TGAB(Anti-Thyroid-Globulin Antibody) ELISA KitHuman Cavin 1(Polymerase I and transcript release factor) ELISA Kit马钱苷GMS10电击感受态细菌转化试剂盒
Human ATXN1(Ataxin 1) ELISA KitHuman D2HGDH(D2-HydroxyglutaRate Dehydrogenase) ELISA KitL-胱氨酸pZERO载体克隆鉴定试剂盒
Human ATF-6(Activating Transcription Factor 6) ELISA KitHuman ER(Total Estrogen Receptor) ELISA KitL-胱氨酸PCR产物末端平滑处理试剂盒
Human Aβ40(Amyloid Beta 40) ELISA KitHuman HIF3A(Hypoxia-inducible factor 3-alpha) ELISA Kit无水醋酸锂DNA产物磷酸化处理试剂盒
Human ATGA/TGAB(Anti-Thyroid-Globulin Antibody) ELISA KitHuman ALPI(Alkaline Phosphatase, Intestinal) ELISA Kit无水醋酸锂载体/DNA产物去磷酸化处理试剂盒
Human ATXN1(Ataxin 1) ELISA KitHuman CPB1(Carboxypeptidase B1) ELISA KitL-鸟氨酸盐酸盐5’端衔接体(LINKER)连接试剂盒
Human Aβ42(Amyloid Beta 42) ELISA KitHuman CPN2(Carboxypeptidase N2) ELISA KitL-鸟氨酸盐酸盐3’端衔接体(LINKER)连接试剂盒
Human ARO(Aromatase) ELISA KitHuman Cr(Creatinine) ELISA KitL-鸟氨酸盐酸盐适配体(ADAPTER)连接试剂盒
猪链球菌型(SS-)核酸检测试剂盒荧光素5mg 103-41-3Rat Endothelial nitric oxide synthase 3, eNOS-3 Elisa KitHPLC98%荧光素5mgglycolipid进口、国产250英文名称:25mg重组人 PRPS2 蛋白 (His 标签)特价供应59219-64-696T干细胞因子受体(SCFR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%荧光素5mgglycolipid1685-33-2高端化学试剂Human Nerve growth factor, NGF Elisa Kit 进口、国产250英文名称:Lumefantrine 100mg重组人 CEP57 / MVA2 蛋白 (GST 标签)现货促销97372-53-796T基质细胞衍生因子1(SDF1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%荧光素二钠盐5mg437171685-33-2高端化学试剂Human Macrophage Inflammatory Protein-3β, MIP-3β Elisa Kit
荧光素二钠盐5mg 103-41-3Rat Endothelial nitric oxide synthase 3, eNOS-3 Elisa KitHPLC98%荧光素二钠盐5mg43717进口、国产250英文名称:Lumefantrine 100mg重组人 CEP57 / MVA2 蛋白 (GST 标签)现货促销97372-53-796T基质细胞衍生因子1(SDF1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%荧光素二钠盐5mg437171685-33-2高端化学试剂Human Macrophage Inflammatory Protein-3β, MIP-3β Elisa Kit 进口、国产250英文名称:25mg重组人 STX7 / Syntaxin 7 蛋白 (His 标签)特价促销85699-62-396T基质细胞衍生因子1(SDF1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%3-氰基-7-羟基香豆素5mgVAV-IgM1685-33-2高端化学试剂Human Macrophage Inflammatory Protein-3β, MIP-3β Elisa Kit
3-氰基-7-羟基香豆素5mg 103-41-3Rat cholest erolester transfer protein, CETP Elisa KitHPLC98%3-氰基-7-羟基香豆素5mgVAV-IgM进口、国产250英文名称:25mg重组人 STX7 / Syntaxin 7 蛋白 (His 标签)特价促销85699-62-396T基质细胞衍生因子1(SDF1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%3-氰基-7-羟基香豆素5mgVAV-IgM1685-33-2高端化学试剂Human Macrophage Inflammatory Protein-3β, MIP-3β Elisa Kit 进口、国产250英文名称:10mg重组人 BRCA2 / BCCIP 蛋白 (His & GST 标签)23455-44-996T转化生长因子α(TGFα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%7-羟基-4-甲基香豆素5mgT6306-52-1高端化学试剂Human Macrophage Inflammatory Protein-3α, MIP-3α Elisa Kit
7-羟基-4-甲基香豆素5mg 1034-49-7Rat cholest erolester transfer protein, CETP Elisa KitHPLC98%7-羟基-4-甲基香豆素5mgT进口、国产250英文名称:10mg重组人 BRCA2 / BCCIP 蛋白 (His & GST 标签)23455-44-996T转化生长因子α(TGFα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%7-羟基-4-甲基香豆素5mgT6306-52-1高端化学试剂Human Macrophage Inflammatory Protein-3α, MIP-3α Elisa Kit 进口、国产250英文名称:Warfarin 200mg重组人 BOLA1 蛋白 (His 标签)特价供应471-66-996T转化生长因子β1(TGFβ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%7-羟基-4-甲基香豆素5mgD-Ser6306-52-1高端化学试剂Human Macrophage Inflammatory Protein-3α, MIP-3α Elisa Kit
7-羟基-4-甲基香豆素5mg 1034-49-7Rat cholest erolester transfer protein, CETP Elisa KitHPLC98%7-羟基-4-甲基香豆素5mgD-Ser进口、国产250英文名称:Warfarin 200mg重组人 BOLA1 蛋白 (His 标签)特价供应471-66-996T转化生长因子β1(TGFβ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%7-羟基-4-甲基香豆素5mgD-Ser6306-52-1高端化学试剂Human Macrophage Inflammatory Protein-3α, MIP-3α Elisa Kit 进口、国产0.1英文名称:Tributyl Phosphine Oxide25mg重组人 NPDC-1 / NPDC1 蛋白 (His 标签)现货促销863-76-396T转化生长因子β1(TGFβ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%7-羟基-4-甲基香豆素5mgCXCL206306-52-1高端化学试剂Human Macrophage Inflammatory Protein-1β, MIP-1β Elisa Kit
7-羟基-4-甲基香豆素5mg 103-49-1Rat cholest erolester transfer protein, CETP Elisa KitHPLC98%7-羟基-4-甲基香豆素5mgCXCL20进口、国产0.1英文名称:Tributyl Phosphine Oxide25mg重组人 NPDC-1 / NPDC1 蛋白 (His 标签)现货促销863-76-396T转化生长因子β1(TGFβ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%7-羟基-4-甲基香豆素5mgCXCL206306-52-1高端化学试剂Human Macrophage Inflammatory Protein-1β, MIP-1β Elisa Kit进口、国产250英文名称:Cabergoline125mg重组人 FAIM3 蛋白 (Fc 标签)特价促销81263-96-996T转化生长因子β1(TGFβ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%7-氨基-4-甲基香豆素;香豆素1205mgCXCL286306-52-1高端化学试剂Human Macrophage Inflammatory Protein-1β, MIP-1β Elisa Kit
7-氨基-4-甲基香豆素;香豆素1205mg 103-49-1Rat heat shock protein 60, hSP-60 Elisa KitHPLC98%7-氨基-4-甲基香豆素;香豆素1205mgCXCL28进口、国产250英文名称:Cabergoline125mg重组人 FAIM3 蛋白 (Fc 标签)特价促销81263-96-996T转化生长因子β1(TGFβ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%7-氨基-4-甲基香豆素;香豆素1205mgCXCL286306-52-1高端化学试剂Human Macrophage Inflammatory Protein-1β, MIP-1β Elisa Kit进口、国产250英文名称:Alfuzosin Hydrochloride150mg重组人 BTN3A3 蛋白 (Fc 标签)84812-00-096T免疫球蛋白样EGF样域酪氨酸激酶1(Tie1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%7-氨基-4-甲基香豆素;香豆素1205mgVacAAb32854-09-4高端化学试剂Human Macrophage Inflammatory Protein-1α, MIP-1α Elisa Kit
7-氨基-4-甲基香豆素;香豆素1205mg 103-63-9Rat heat shock protein 60, hSP-60 Elisa KitHPLC98%7-氨基-4-甲基香豆素;香豆素1205mgVacAAb进口、国产250英文名称:Alfuzosin Hydrochloride150mg重组人 BTN3A3 蛋白 (Fc 标签)84812-00-096T免疫球蛋白样EGF样域酪氨酸激酶1(Tie1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%7-氨基-4-甲基香豆素;香豆素1205mgVacAAb32854-09-4高端化学试剂Human Macrophage Inflammatory Protein-1α, MIP-1α Elisa Kit 进口、国产250英文名称:Bismuth Citrate100mg重组人 LRG1 蛋白特价供应89915-39-996T内皮细胞TEK酪氨酸激酶(Tie2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%7-氨基-4-三氟甲基香豆素;香豆素1515mgN.meningitidis32854-09-4高端化学试剂Human Macrophage Inflammatory Protein-1α, MIP-1α Elisa Kit
7-氨基-4-三氟甲基香豆素;香豆素1515mg 103-63-9Rat malondialchehyche, MDA Elisa KitHPLC98%7-氨基-4-三氟甲基香豆素;香豆素1515mgN.meningitidis进口、国产250英文名称:Bismuth Citrate100mg重组人 LRG1 蛋白特价供应89915-39-996T内皮细胞TEK酪氨酸激酶(Tie2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%7-氨基-4-三氟甲基香豆素;香豆素1515mgN.meningitidis32854-09-4高端化学试剂Human Macrophage Inflammatory Protein-1α, MIP-1α Elisa Kit 进口、国产250英文名称:Sennoside A 20mg重组人 Hexosaminidase B / HEXB 蛋白 (His 标签)现货促销5273-86-996T组织金属蛋白酶抑制因子2(TIMP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%7-氨基-4-三氟甲基香豆素;香豆素1515mgMPO32854-09-4高端化学试剂Human Macrophage-Derived Chemokine, MDC Elisa Kit
7-氨基-4-三氟甲基香豆素;香豆素1515mg 103-63-9Rat malondialchehyche, MDA Elisa KitHPLC98%7-氨基-4-三氟甲基香豆素;香豆素1515mgMPO进口、国产250英文名称:Sennoside A 20mg重组人 Hexosaminidase B / HEXB 蛋白 (His 标签)现货促销5273-86-996T组织金属蛋白酶抑制因子2(TIMP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%7-氨基-4-三氟甲基香豆素;香豆素1515mgMPO32854-09-4高端化学试剂Human Macrophage-Derived Chemokine, MDC Elisa Kit 进口、国产50mg英文名称:Cholic Acid (AS)2g重组人 PLA2G2D / Phospholipase A2 IID 蛋白 (Fc 标签)特价促销559-70-696T组织金属蛋白酶抑制因子3(TIMP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%耐尔蓝A;尼罗蓝酸盐;耐尔蓝5mgBCG-Ab23150-65-4高端化学试剂Human Macrophage-Derived Chemokine, MDC Elisa Kit
储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。