PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
产品名称：禽脑脊髓炎病毒（AEV）核酸
英文名称：详见说明书
编号： FSP2851
分类：核酸检测试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 产品仅供科研从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
数据采集：
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时，吸收光谱在 471nm，结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm，发射光谱在 530nm。
数据处理:
以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴，以 Ct 值为纵轴，通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
Human POTE-E(POTE-E(POTE Ankyrin Domain Family Member E)) ELISA KitHuman αHSP(Alpha-Hemoglobin Stabilizing Protein) ELISA Kit4-碘-1-甲基-1H-吡唑 细胞RyR受体蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒
Human FDP(Fibrinogen Degradation Product) ELISA KitHuman β2-GP1 Ab IgA(β2-Glycoprotein 1 antibody IgA) ELISA Kit异丙基氯化镁载玻片细胞RyR受体蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
Human POTEG(POTE Ankyrin Domain Family Member G) ELISA KitHuman β2-GP1 Ab IgG(β2-Glycoprotein 1 Antibody IgG) ELISA Kit异丙基氯化镁冰冻切片组织RyR受体蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
Human POTE-D(POTE-D(POTE Ankyrin Domain Family Member D)) ELISA KitHuman β2-GP1 Ab IgM(β2-Glycoprotein 1 Antibody IgM) ELISA Kit异丙基氯化镁石蜡切片组织RyR受体蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
Human FETUB(Fetuin B) ELISA KitHuman β-CTx(Beta Crosslaps) ELISA Kit异丙基氯化镁 载玻片细胞RyR受体蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
Human FG(Fibrinogen) ELISA KitHuman Beta-MSH(beta-Melanocyte Stimulating Hormone) ELISA Kit异丙基氯化镁 冰冻切片组织RyR受体蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
Human FcγR3B(Fc Fragment of IgG Low Affinity IIIb Receptor) ELISA KitHuman γMSH(gama-Melanocyte Stimulating Hormone) ELISA Kit异丙基氯化镁 石蜡切片组织RyR受体蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
Human fFDFT1(Farnesyl Diphosphate Farnesyltransferase 1) ELISA KitHuman TPK1(Tau-Protein Kinase) ELISA Kit异丙基氯化镁 细胞RyR受体蛋白表达比色法定量检测试剂盒
禽脑脊髓炎病毒（AEV）核酸0.025M化钙<Cacl2>5mg91079-40-2Rat Collagenase I Elisa KitHPLC98%0.025M化钙<Cacl2>5mgDNMT3B进口、国产250细胞培养瓶，75cm²，TC处理，红色标准盖，灭菌81029-05-213850-16-396T角蛋白17(KRT17)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%0.025M化钙<Cacl2>5mgDNMT3B2068-80-6高端化学试剂Human protocadherin 1, PCDH1 Elisa Kit进口、国产1.5mg/支*5英文名称：20mg重组人 IL17A & IL17F Heterodimer 蛋白 (His 标签)120462-42-296T核因子κB(NFκB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%凝血酶原时间（PT）测定试剂盒ISI1.0-1.35mgTIMP-42068-80-6高端化学试剂Human Interleukin-2 receptor, IL-2R Elisa Kit
原巴西苏木素凝血酶原时间（PT）测定试剂盒ISI1.0-1.35mg93-35-6Rat Collagenase I Elisa KitHPLC98%凝血酶原时间（PT）测定试剂盒ISI1.0-1.35mgTIMP-4进口、国产1.5mg/支*5英文名称：20mg重组人 IL17A & IL17F Heterodimer 蛋白 (His 标签)120462-42-296T核因子κB(NFκB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%凝血酶原时间（PT）测定试剂盒ISI1.0-1.35mgTIMP-42068-80-6高端化学试剂Human Interleukin-2 receptor, IL-2R Elisa Kit进口、国产250英文名称：25mg重组人 IL23A & 小鼠 IL12B Heterodimer 蛋白 (His 标签)特价供应120462-45-596T核因子κB2(NFκB2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%部分凝血活酶时间(APTT)测定试剂盒<白陶土含Cacl2>5mgERN11783-96-6高端化学试剂Human Interleukin-2 receptor, IL-2R Elisa Kit
部分凝血活酶时间(APTT)测定试剂盒<白陶土含Cacl2>5mg93-35-6Rat phospho Protein Kinase C, P-PKC Elisa KitHPLC98%部分凝血活酶时间(APTT)测定试剂盒<白陶土含Cacl2>5mgERN1进口、国产250英文名称：25mg重组人 IL23A & 小鼠 IL12B Heterodimer 蛋白 (His 标签)特价供应120462-45-596T核因子κB2(NFκB2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%部分凝血活酶时间(APTT)测定试剂盒<白陶土含Cacl2>5mgERN11783-96-6高端化学试剂Human Interleukin-2 receptor, IL-2R Elisa Kit进口、国产250英文名称：25mg重组人 ITIH3 蛋白 (Fc 标签)现货促销120462-46-696TV-Rel网状内皮增生病癌基因同源物B(RELB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%部分凝血活酶时间(APTT)测定试剂盒<白陶土含Cacl2>5mgSt-Ag1783-96-6高端化学试剂Human cutaneous T cell-attracting chemokine, CTACK Elisa Kit
部分凝血活酶时间(APTT)测定试剂盒<白陶土含Cacl2>5mg93-35-6Rat phospho Protein Kinase C, P-PKC Elisa KitHPLC98%部分凝血活酶时间(APTT)测定试剂盒<白陶土含Cacl2>5mgSt-Ag进口、国产250英文名称：25mg重组人 ITIH3 蛋白 (Fc 标签)现货促销120462-46-696TV-Rel网状内皮增生病癌基因同源物B(RELB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%部分凝血活酶时间(APTT)测定试剂盒<白陶土含Cacl2>5mgSt-Ag1783-96-6高端化学试剂Human cutaneous T cell-attracting chemokine, CTACK Elisa Kit进口、国产250英文名称：10mg重组人 GH1 / Growth hormone 1 蛋白特价促销545-46-096T轴突生长诱向因子1(Ntn1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%凝血酶时间(TT)测定试剂盒<含复溶液>5mgAAP5b1783-96-6高端化学试剂Human cutaneous T cell-attracting chemokine, CTACK Elisa Kit
非瑟酮；紫铆素；非瑟素凝血酶时间(TT)测定试剂盒<含复溶液>5mg62499-27-8Rat phospho-extracellular signal-regulated kinase, pERK Elisa KitHPLC98%凝血酶时间(TT)测定试剂盒<含复溶液>5mgAAP5b进口、国产250英文名称：10mg重组人 GH1 / Growth hormone 1 蛋白特价促销545-46-096T轴突生长诱向因子1(Ntn1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%凝血酶时间(TT)测定试剂盒<含复溶液>5mgAAP5b1783-96-6高端化学试剂Human cutaneous T cell-attracting chemokine, CTACK Elisa Kit进口、国产250英文名称：ea重组人 ICAM 5 / Intercellular adhesion molecule 5 蛋白 (ECD, His 标签)466-09-196T轴突生长诱向因子4(Ntn4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%纤维蛋白原(BFI)测定试剂盒<含IBS、定标血浆>5mgPTH1341783-96-6高端化学试剂Human protocadherin 1, PCDH1 Elisa Kit
纤维蛋白原(BFI)测定试剂盒<含IBS、定标血浆>5mg62499-27-8Rat phospho-extracellular signal-regulated kinase, pERK Elisa KitHPLC98%纤维蛋白原(BFI)测定试剂盒<含IBS、定标血浆>5mgPTH134进口、国产250英文名称：ea重组人 ICAM 5 / Intercellular adhesion molecule 5 蛋白 (ECD, His 标签)466-09-196T轴突生长诱向因子4(Ntn4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%纤维蛋白原(BFI)测定试剂盒<含IBS、定标血浆>5mgPTH1341783-96-6高端化学试剂Human protocadherin 1, PCDH1 Elisa Kit进口、国产250英文名称：20mg重组人 GLT8D2 蛋白 (His 标签)特价供应82425-45-496T载脂蛋白A4(APOA4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%纤维蛋白原(BFI)测定试剂盒<含IBS>5mgNT-ProANP617-45-8高端化学试剂Human protocadherin 1, PCDH1 Elisa Kit
纤维蛋白原(BFI)测定试剂盒<含IBS>5mg62499-27-8Rat Cathepsin K, cath-K Elisa KitHPLC98%纤维蛋白原(BFI)测定试剂盒<含IBS>5mgNT-ProANP进口、国产250英文名称：20mg重组人 GLT8D2 蛋白 (His 标签)特价供应82425-45-496T载脂蛋白A4(APOA4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%纤维蛋白原(BFI)测定试剂盒<含IBS>5mgNT-ProANP617-45-8高端化学试剂Human protocadherin 1, PCDH1 Elisa Kit进口、国产250英文名称：30mg重组人 LDLRAD3 蛋白 (ECD, Fc 标签)现货促销16198-01-996TE选择素(SELE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%凝血酶原时间（PT）测定试剂盒ISI1.0-1.3<含复溶液>5mgCCDC49617-45-8高端化学试剂Human Interleukin-2 receptor, IL-2R Elisa Kit
芦荟甙；芦荟大黄素甙凝血酶原时间（PT）测定试剂盒ISI1.0-1.3<含复溶液>5mg68797-35-3Rat Cathepsin K, cath-K Elisa KitHPLC98%凝血酶原时间（PT）测定试剂盒ISI1.0-1.3<含复溶液>5mgCCDC49进口、国产250英文名称：30mg重组人 LDLRAD3 蛋白 (ECD, Fc 标签)现货促销16198-01-996TE选择素(SELE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%凝血酶原时间（PT）测定试剂盒ISI1.0-1.3<含复溶液>5mgCCDC49617-45-8高端化学试剂Human Interleukin-2 receptor, IL-2R Elisa Kit进口、国产250英文名称：1ml重组人 ANTXR2 / CMG2 蛋白 (Fc 标签)特价促销92233-55-196T解整合素金属蛋白酶9(ADAM9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%凝血酶原时间（PT）测定试剂盒ISI1.0-1.3<含复溶液>5mgPDH617-45-8高端化学试剂Human Interleukin-2 receptor, IL-2R Elisa Kit
苍术内酯Ⅰ凝血酶原时间（PT）测定试剂盒ISI1.0-1.3<含复溶液>5mg68797-35-3Rat Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1, AMAC-1 Elisa KitHPLC98%凝血酶原时间（PT）测定试剂盒ISI1.0-1.3<含复溶液>5mgPDH进口、国产250英文名称：1ml重组人 ANTXR2 / CMG2 蛋白 (Fc 标签)特价促销92233-55-196T解整合素金属蛋白酶9(ADAM9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%凝血酶原时间（PT）测定试剂盒ISI1.0-1.3<含复溶液>5mgPDH617-45-8高端化学试剂Human Interleukin-2 receptor, IL-2R Elisa Kit进口、国产英文名称：Amiodarone Related Compound E25mg重组人 NLGN4X 蛋白 (His 标签)1615-94-796T解整合素金属蛋白酶9(ADAM9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%部分凝血活酶时间(APTT)测定试剂盒<白陶土含Cacl2>5mgIS617-45-8高端化学试剂Human cutaneous T cell-attracting chemokine, CTACK Elisa Kit
苍术内酯Ⅱ部分凝血活酶时间(APTT)测定试剂盒<白陶土含Cacl2>5mg68797-35-3Rat Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1, AMAC-1 Elisa KitHPLC98%部分凝血活酶时间(APTT)测定试剂盒<白陶土含Cacl2>5mgIS进口、国产英文名称：Amiodarone Related Compound E25mg重组人 NLGN4X 蛋白 (His 标签)1615-94-796T解整合素金属蛋白酶9(ADAM9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%部分凝血活酶时间(APTT)测定试剂盒<白陶土含Cacl2>5mgIS617-45-8高端化学试剂Human cutaneous T cell-attracting chemokine, CTACK Elisa Kit进口、国产250英文名称：Methylparaben 125mg重组人 GYPC / Glycophorin-C 蛋白 (His 标签)特价供应2318-78-796T解整合素金属蛋白酶9(ADAM9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%凝血酶时间(TT)测定试剂盒<含复溶液>5mgSTOC70-47-3高端化学试剂Human cutaneous T cell-attracting chemokine, CTACK Elisa Kit
储存条件：
仅用于科研14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
