PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
产品名称：禽传染性支气管炎病毒(AIBV)核酸
英文名称：详见说明书
编号： FSP2845
分类：核酸检测试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 产品仅供科研从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
数据采集：
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时，吸收光谱在 471nm，结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm，发射光谱在 530nm。
数据处理:
以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴，以 Ct 值为纵轴，通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
Human GJβ1(Gap Junction Protein Beta 1) ELISA KitHuman TAGLN(Transgelin) ELISA Kit铟粉 细胞线粒体复合物V蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒
Human GLP2(Glucagon Like Peptide 2) ELISA KitHuman TALLA-1(T-cell acute lymphoblastic leukemia antigen) ELISA Kit铟粉载玻片细胞线粒体复合物V蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
Human GLUT2(Glucose Transporter 2) ELISA KitHuman TARS(Threonyl tRNA Synthetase, cytoplasmic) ELISA Kit柠檬酸铁冰冻切片组织线粒体复合物V蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
Human GKN1(Gastrokine 1) ELISA KitHuman TBX2(T-Box Protein 2) ELISA Kit(S,S)-(-)-2,2''-异亚丙基双(4-叔丁基-2-噁唑啉)石蜡切片组织线粒体复合物V蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
Human GLUT4(Glucose Transporter 4) ELISA KitHuman TCC C5b-9(Terminal Complement Complex C5b-9) ELISA Kit(S,S)-(-)-2,2''-异亚丙基双(4-叔丁基-2-噁唑啉) 载玻片细胞线粒体复合物V蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
Human GM-CSF Ab(Anti-Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor Antibody) ELISA KitHuman TDP43(Tar DNA Binding Protein 43KDa) ELISA Kit(S,S)-(-)-2,2''-异亚丙基双(4-叔丁基-2-噁唑啉) 冰冻切片组织线粒体复合物V蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
Human Glyoxalase I(GLO1) ELISA KitHuman TGM1(Transglutaminase 1, KeRatinocyte) ELISA Kit异丁酰胺 石蜡切片组织线粒体复合物V蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
Human GNβ1(G Protein Beta 1) ELISA KitHuman TGM3(Transglutaminase 3, Epidermal) ELISA Kit异丁酰胺 细胞线粒体复合物V蛋白表达比色法定量检测试剂盒
禽传染性支气管炎病毒(AIBV)核酸制斑素BE清洗液5mg64-04-0Rat calcium/calmodulin-dependent protein kinase-Ⅱ, CAMK 2 Elisa KitHPLC98%BE清洗液5mgIIF进口、国产250Precast-Gel 非变性预制胶 15% ,10 wells, 1.5 mm115-39-9390362-51-396T基质金属蛋白酶2(MMP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%BE清洗液5mgIIF107-95-9高端化学试剂生长停滞特异性蛋白6(GAS6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)进口、国产250Precast-Gel 变性预制胶 4-15%, 10 wells, 1.5 mm115-39-9122-69-096T基质金属蛋白酶2(MMP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%BE清洗液5mgCD47 p107-95-9高端化学试剂CD14分子(CD14)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
BE清洗液5mg64-04-0Rat calcium/calmodulin-dependent protein kinase-Ⅱ, CAMK 2 Elisa KitHPLC98%BE清洗液5mgCD47 p进口、国产250Precast-Gel 变性预制胶 4-15%, 10 wells, 1.5 mm115-39-9122-69-096T基质金属蛋白酶2(MMP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%BE清洗液5mgCD47 p107-95-9高端化学试剂CD14分子(CD14)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)进口、国产250Precast-Gel 非变性预制胶 4-15%, 10 wells, 1.5 mm34725-61-6581-31-796T基质金属蛋白酶3(MMP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%D-二聚体(D-Dimer)测定试剂盒(不含校对品)5mgBand3p107-95-9高端化学试剂肝素酶(HPA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
桂皮酸；桂酸；皮酸D-二聚体(D-Dimer)测定试剂盒(不含校对品)5mg6994-45-2Rat hepatic lipase, HL Elisa KitHPLC98%D-二聚体(D-Dimer)测定试剂盒(不含校对品)5mgBand3p进口、国产250Precast-Gel 非变性预制胶 4-15%, 10 wells, 1.5 mm34725-61-6581-31-796T基质金属蛋白酶3(MMP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%D-二聚体(D-Dimer)测定试剂盒(不含校对品)5mgBand3p107-95-9高端化学试剂肝素酶(HPA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)进口、国产250gPrecast-Gel 变性预制胶 4-20%, 10 wells, 1.5 mm34725-61-65973-06-896T基质金属蛋白酶3(MMP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%D-二聚体(D-Dimer)测定试剂盒(含校对品)5mgAKA15761-38-3高端化学试剂细胞程序性死亡蛋白1配体2(PDCD1LG2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
桂皮醇；苯丙烯醇；桂醇D-二聚体(D-Dimer)测定试剂盒(含校对品)5mg6994-45-2Rat hepatic lipase, HL Elisa KitHPLC98%D-二聚体(D-Dimer)测定试剂盒(含校对品)5mgAKA进口、国产250gPrecast-Gel 变性预制胶 4-20%, 10 wells, 1.5 mm34725-61-65973-06-896T基质金属蛋白酶3(MMP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%D-二聚体(D-Dimer)测定试剂盒(含校对品)5mgAKA15761-38-3高端化学试剂细胞程序性死亡蛋白1配体2(PDCD1LG2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)进口、国产250Precast-Gel 非变性预制胶 4-20%, 10 wells, 1.5 mm34725-61-62308-85-296Tβ-血小板球蛋白(βTG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%抗凝血酶（AT-Ⅲ）测定试剂盒5mgSCGN15761-38-3高端化学试剂肿瘤坏死因子配体超家族成员14(TNFSF14)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
抗凝血酶（AT-Ⅲ）测定试剂盒5mg70-25-7Rat nicotinic acetylcholine receptor, N-AChR Elisa KitHPLC98%抗凝血酶（AT-Ⅲ）测定试剂盒5mgSCGN进口、国产250Precast-Gel 非变性预制胶 4-20%, 10 wells, 1.5 mm34725-61-62308-85-296Tβ-血小板球蛋白(βTG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%抗凝血酶（AT-Ⅲ）测定试剂盒5mgSCGN15761-38-3高端化学试剂肿瘤坏死因子配体超家族成员14(TNFSF14)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)进口、国产250Precast-Gel 变性预制胶 8-20%, 10 wells, 1.5 mm28631-66-514050-92-196Tβ-血小板球蛋白(βTG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%凝血酶原时间（PT）测定试剂盒ISI1.0-1.35mgTSMP15761-38-3高端化学试剂三叶因子1(TFF1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
凝血酶原时间（PT）测定试剂盒ISI1.0-1.35mgRat nicotinic acetylcholine receptor, N-AChR Elisa KitHPLC98%凝血酶原时间（PT）测定试剂盒ISI1.0-1.35mgTSMP进口、国产250Precast-Gel 变性预制胶 8-20%, 10 wells, 1.5 mm28631-66-514050-92-196Tβ-血小板球蛋白(βTG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%凝血酶原时间（PT）测定试剂盒ISI1.0-1.35mgTSMP15761-38-3高端化学试剂三叶因子1(TFF1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)进口、国产250Precast-Gel 非变性预制胶 8-20%, 10 wells, 1.5 mm28631-66-5482-68-896Tβ-血小板球蛋白(βTG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%部分凝血活酶时间(APTT)测定试剂盒<鞣花酸含Cacl2>5mgESAT-67764-95-6高端化学试剂肿瘤坏死因子受体超家族成员5(TNFRSF5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
芒果甙部分凝血活酶时间(APTT)测定试剂盒<鞣花酸含Cacl2>5mgRat muscarinic acetylcholine receptor, M-AChR Elisa KitHPLC98%部分凝血活酶时间(APTT)测定试剂盒<鞣花酸含Cacl2>5mgESAT-6进口、国产250Precast-Gel 非变性预制胶 8-20%, 10 wells, 1.5 mm28631-66-5482-68-896Tβ-血小板球蛋白(βTG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%部分凝血活酶时间(APTT)测定试剂盒<鞣花酸含Cacl2>5mgESAT-67764-95-6高端化学试剂肿瘤坏死因子受体超家族成员5(TNFRSF5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)进口、国产250Precast-Gel 变性预制胶 8%, 15 wells, 1.5 mm28631-66-519103-54-996T维生素E(VE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%部分凝血活酶时间(APTT)测定试剂盒<白陶土含Cacl2>5mgADAMTS-137764-95-6高端化学试剂转录激活因子6(ATF6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
新芒果甙部分凝血活酶时间(APTT)测定试剂盒<白陶土含Cacl2>5mgRat muscarinic acetylcholine receptor, M-AChR Elisa KitHPLC98%部分凝血活酶时间(APTT)测定试剂盒<白陶土含Cacl2>5mgADAMTS-13进口、国产250Precast-Gel 变性预制胶 8%, 15 wells, 1.5 mm28631-66-519103-54-996T维生素E(VE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%部分凝血活酶时间(APTT)测定试剂盒<白陶土含Cacl2>5mgADAMTS-137764-95-6高端化学试剂转录激活因子6(ATF6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)进口、国产250Precast-Gel 非变性预制胶 8%, 15 wells, 1.5 mm92-31-9295803-03-196T组织金属蛋白酶抑制因子1(TIMP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%凝血酶时间(TT)测定试剂盒<含复溶液>5mgα-HCG7764-95-6高端化学试剂Thy1细胞表面抗原(Thy1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
凝血酶时间(TT)测定试剂盒<含复溶液>5mgRat activated protein C, APC Elisa KitHPLC98%凝血酶时间(TT)测定试剂盒<含复溶液>5mgα-HCG进口、国产250Precast-Gel 非变性预制胶 8%, 15 wells, 1.5 mm92-31-9295803-03-196T组织金属蛋白酶抑制因子1(TIMP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%凝血酶时间(TT)测定试剂盒<含复溶液>5mgα-HCG7764-95-6高端化学试剂Thy1细胞表面抗原(Thy1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)进口、国产250Precast-Gel 变性预制胶 10%,15 wells, 1.5 mm92-31-914031-37-996T成纤维细胞生长因子7(FGF7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%纤维蛋白原(BFI)测定试剂盒<含IBS、定标血浆>5mgHBV197764-95-6高端化学试剂粒细胞集落刺激因子受体(GCSFR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
对羟基苯乙醇; 4-羟基苯乙醇纤维蛋白原(BFI)测定试剂盒<含IBS、定标血浆>5mgRat activated protein C, APC Elisa KitHPLC98%纤维蛋白原(BFI)测定试剂盒<含IBS、定标血浆>5mgHBV19进口、国产250Precast-Gel 变性预制胶 10%,15 wells, 1.5 mm92-31-914031-37-996T成纤维细胞生长因子7(FGF7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%纤维蛋白原(BFI)测定试剂盒<含IBS、定标血浆>5mgHBV197764-95-6高端化学试剂粒细胞集落刺激因子受体(GCSFR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)进口、国产250Precast-Gel 非变性预制胶 10%,15 wells, 1.5 mm92-31-9659738-08-696T免疫球蛋白E(IgE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%纤维蛋白原(BFI)测定试剂盒<含IBS、定标血浆>5mgSMD1115-59-9高端化学试剂白介素17受体A(IL17RA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
储存条件：
仅用于科研14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
