储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 产品仅供科研血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
产品名称:猪瘟病毒RT-PCR试剂盒试剂盒
英文名称:详见说明书
编号: FSP2820
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
Human PPP1R1A(Protein Phosphatase 1 Regulatory Subunit A) ELISA KitHuman NKA(Neurokinin A) ELISA Kit异丁酸异丁酯 载玻片细胞FSH-BETA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
Human PPOX(Protoporphyrinogen Oxidase) ELISA KitHuman NKB(Neurokinin B) ELISA Kit异丁酸酐 冰冻切片组织FSH-BETA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
Human PPAR-α(Peroxisome ProlifeRator Activated Receptor Alpha) ELISA KitHuman N-MID-OT(N-MID Osteocalcin) ELISA Kit碘 石蜡切片组织FSH-BETA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
Human PRB1(Basic Salivary Proline Rich Protein 1) ELISA KitHuman NPYR1(Neuropeptide Y Receptor Y1) ELISA Kit碘 细胞FSH-BETA蛋白表达比色法定量检测试剂盒
Human PPP1R1A(Protein Phosphatase 1 Regulatory Subunit A) ELISA KitHuman NPYR2(Neuropeptide Y Receptor Y2) ELISA Kit(S,S)-2,2''-异亚丙基双(4-苯基-2-恶唑啉) 细胞FSH-BETA蛋白表达荧光定量检测试剂盒
Human PPAR-γ(Peroxisome ProlifeRator Activated Receptor Gamma) ELISA KitHuman NPYR5(Neuropeptide Y Receptor Y5) ELISA Kit异丙醚 FSH-BETA蛋白表达西方杂交分析试剂盒
Human PK2(Prokineticin 2) ELISA KitHuman NRG-2(Neuregulin 2) ELISA Kit1-碘代萘FSH-BETA蛋白免疫共沉淀分析试剂盒
Human PPOX(Protoporphyrinogen Oxidase) ELISA KitHuman NRG-3(Neuregulin 3) ELISA Kit1-碘代萘FSH-BETA蛋白表达ELISA定量检测试剂盒
猪瘟病毒RT-PCR试剂盒试剂盒杨梅黄酮;杨梅酮A组链球菌菌壁多糖抗体检测试剂盒5mg9001-96-1Mouse Carboxyterminal propeptide of type Ⅰ procollagen, PⅠCP Elisa KitHPLC98%A组链球菌菌壁多糖抗体检测试剂盒5mgPI4P30mgCAS号:透析袋 MD25(8000-14000)D 美国 即用74515-47-296T白介素18(IL18)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%A组链球菌菌壁多糖抗体检测试剂盒5mgPI4P3844-45-9高端化学试剂白介素22(IL22)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)30mgCAS号:透析袋 MD34 ( 3500 D ) 美国 即用9007-49-227740-43-896T干扰素α(IFNα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%A组链球菌多糖抗原检测试剂盒5mgABL13844-45-9高端化学试剂过氧化物酶体增殖物激活受体δ(PPARδ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
A组链球菌多糖抗原检测试剂盒5mg9001-96-1Mouse Carboxyterminal propeptide of type Ⅰ procollagen, PⅠCP Elisa KitHPLC98%A组链球菌多糖抗原检测试剂盒5mgABL130mgCAS号:透析袋 MD34 ( 3500 D ) 美国 即用9007-49-227740-43-896T干扰素α(IFNα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%A组链球菌多糖抗原检测试剂盒5mgABL13844-45-9高端化学试剂过氧化物酶体增殖物激活受体δ(PPARδ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)15mgCAS号:透析袋 MD34 ( 7000 D ) 美国 即用9007-49-215486-24-596T抗载脂蛋白抗体(AAHA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%A激酶PRKA锚定蛋白12检测试剂盒5mgAMCA3844-45-9高端化学试剂组蛋白脱乙酰基酶1(HDAC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
A激酶PRKA锚定蛋白12检测试剂盒5mg9001-96-1Mouse soluble P-selectin, sP-selectin Elisa KitHPLC98%A激酶PRKA锚定蛋白12检测试剂盒5mgAMCA15mgCAS号:透析袋 MD34 ( 7000 D ) 美国 即用9007-49-215486-24-596T抗载脂蛋白抗体(AAHA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%A激酶PRKA锚定蛋白12检测试剂盒5mgAMCA3844-45-9高端化学试剂组蛋白脱乙酰基酶1(HDAC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)100mgCAS号:透析袋 MD34 (8000-14000)D 美国 MD34-14000D 效果一样 即用9007-49-2142474-52-096T淋巴细胞胞浆蛋白2(LCP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%AT丰富结合域1A检测试剂盒5mgALCA3147-14-6高端化学试剂甲状旁腺素受体1(PTHR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
AT丰富结合域1A检测试剂盒5mg9024-43-5Mouse soluble P-selectin, sP-selectin Elisa KitHPLC98%AT丰富结合域1A检测试剂盒5mgALCA100mgCAS号:透析袋 MD34 (8000-14000)D 美国 MD34-14000D 效果一样 即用9007-49-2142474-52-096T淋巴细胞胞浆蛋白2(LCP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%AT丰富结合域1A检测试剂盒5mgALCA3147-14-6高端化学试剂甲状旁腺素受体1(PTHR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)10mgCAS号:透析袋 MD44 ( 3500 D ) 美国 即用73049-39-5143601-07-496TT-细胞激活连接蛋白(LAT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%Apelin ELISA试剂盒5mgACCA3147-14-6高端化学试剂轻肽铁蛋白(FTL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
白藜芦醇苷Apelin ELISA试剂盒5mg9028-67-5Mouse Soluble protein-100, S-100 Elisa KitHPLC98%Apelin ELISA试剂盒5mgACCA10mgCAS号:透析袋 MD44 ( 3500 D ) 美国 即用73049-39-5143601-07-496TT-细胞激活连接蛋白(LAT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%Apelin ELISA试剂盒5mgACCA3147-14-6高端化学试剂轻肽铁蛋白(FTL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)25mgCAS号:透析袋 MD44(7000D ) 美国 即用73049-39-564790-68-796T蛋白酪氨酸酸酶受体H(PTPRH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%Apelin 36检测试剂盒5mgAMCA3147-14-6高端化学试剂骨骼肌慢肌肌钙蛋白T(TNNT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Apelin 36检测试剂盒5mg9028-67-5Mouse Soluble protein-100, S-100 Elisa KitHPLC98%Apelin 36检测试剂盒5mgAMCA25mgCAS号:透析袋 MD44(7000D ) 美国 即用73049-39-564790-68-796T蛋白酪氨酸酸酶受体H(PTPRH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%Apelin 36检测试剂盒5mgAMCA3147-14-6高端化学试剂骨骼肌慢肌肌钙蛋白T(TNNT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)25mgCAS号:透析袋 MD44(8000-14000)D 美国 即用73049-39-552914-31-596T神经氨酸酶(NEU)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%apelin 13检测试剂盒5mgZAL2465-29-4高端化学试剂骨骼肌慢肌肌钙蛋白T(TNNT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
芍药醇;牡丹酚apelin 13检测试剂盒5mg9073-63-6Mouse Interleukin 1, IL-1 Elisa KitHPLC98%apelin 13检测试剂盒5mgZAL25mgCAS号:透析袋 MD44(8000-14000)D 美国 即用73049-39-552914-31-596T神经氨酸酶(NEU)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%apelin 13检测试剂盒5mgZAL2465-29-4高端化学试剂骨骼肌慢肌肌钙蛋白T(TNNT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)1mlCAS号:透析袋 MD55(3500D ) 美国 即用122-88-314351-29-296T原钙黏素α1(PCDHα1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%apelin 12检测试剂盒5mgFH10510-54-0高端化学试剂饥饿素/肥胖抑制素前激素原(GHRL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
丹参酚酸Aapelin 12检测试剂盒5mg9073-63-6Mouse Interleukin 1, IL-1 Elisa KitHPLC98%apelin 12检测试剂盒5mgFH1mlCAS号:透析袋 MD55(3500D ) 美国 即用122-88-314351-29-296T原钙黏素α1(PCDHα1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%apelin 12检测试剂盒5mgFH10510-54-0高端化学试剂饥饿素/肥胖抑制素前激素原(GHRL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)500mgCAS号:透析袋 MD55(7000D ) 美国 即用122-88-3114297-20-096T酯酶Cγ1(PLCγ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%AP-5复合物β亚基检测试剂盒5mgCH25H10510-54-0高端化学试剂20S-蛋白酶体(20S-PSM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
丹参酚酸BAP-5复合物β亚基检测试剂盒5mg75520-41-1Mouse Interleukin 1β, IL-1β Elisa KitHPLC98%AP-5复合物β亚基检测试剂盒5mgCH25H500mgCAS号:透析袋 MD55(7000D ) 美国 即用122-88-3114297-20-096T酯酶Cγ1(PLCγ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%AP-5复合物β亚基检测试剂盒5mgCH25H10510-54-0高端化学试剂20S-蛋白酶体(20S-PSM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)15mgCAS号:透析袋 MD55(8000-14000)D 美国 即用13730-98-8115074-93-696TRas GTP酶激活蛋白1(RASA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%alpha突触核蛋白检测试剂盒5mgFRAA10510-54-0高端化学试剂20S-蛋白酶体(20S-PSM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
alpha突触核蛋白检测试剂盒5mg75520-41-1Mouse Interleukin 1β, IL-1β Elisa KitHPLC98%alpha突触核蛋白检测试剂盒5mgFRAA15mgCAS号:透析袋 MD55(8000-14000)D 美国 即用13730-98-8115074-93-696TRas GTP酶激活蛋白1(RASA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%alpha突触核蛋白检测试剂盒5mgFRAA10510-54-0高端化学试剂20S-蛋白酶体(20S-PSM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)15mgCAS号:透析袋 MD77(8000-14000)D 美国 即用13730-98-8595-15-396TGDP解离抑制因子1(GDI1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%Alpha-D 生育酚/维生素E检测试剂盒5mgFOLR521-31-3高端化学试剂蛋白酶体亚基α1(PSMα1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
数据采集:
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm,发射光谱在 530nm。
数据处理:
以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴,以 Ct 值为纵轴,通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。