PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
产品名称：猪疱疹病毒PCR检测试剂盒
英文名称：详见说明书
编号： FSP2816
分类：PCR检测试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 产品仅供科研从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
数据采集：
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时，吸收光谱在 471nm，结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm，发射光谱在 530nm。
数据处理:
以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴，以 Ct 值为纵轴，通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
Human RLN2(Relaxin-2) ELISA KitHuman MHCC/HLA-C(Major Histocompatibility Complex Class I C) ELISA Kit4-异丙基苯乙腈 细胞ER BETA 蛋白表达荧光定量检测试剂盒
Human PTPRJ(Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type J) ELISA KitHuman MHCG(Major Histocompatibility Complex Class I G) ELISA Kit4-异丙基苯乙腈 ER BETA 蛋白表达西方杂交分析试剂盒
Human PTPN14(protein tyrosine phosphatase, non-receptor type 14) ELISA KitHuman mIgM(Membrane Immumoglobulin M) ELISA Kit氯化亚铁,四水合物ER BETA 蛋白免疫共沉淀分析试剂盒
Human PYGL(Glycogen Phosphorylase, Liver) ELISA KitHuman MIP4α(Macrophage Inflammatory Protein 4 Alpha) ELISA Kit氯化亚铁,四水合物ER BETA 蛋白表达ELISA定量检测试剂盒
Human PYGM(Glycogen Phosphorylase, Muscle) ELISA KitHuman MLCK/MYLK(Myosin Light Chain Kinase) ELISA Kit氯化亚铁,四水合物 细胞INSULIN 蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒
Human PTPRN(Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type N) ELISA KitHuman MMP-10(Matrix Metalloproteinase 10) ELISA Kit氯化亚铁,四水合物载玻片细胞INSULIN 蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
Human pNF-H(Phosphorylated Neurofilament H) ELISA KitHuman MMP-24(Matrix Metalloproteinase 24) ELISA Kit6-碘-4(H)-喹唑啉酮冰冻切片组织INSULIN 蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
Human pro-IL1β(pro interleukin 1 beta) ELISA KitHuman MMP-25(Matrix Metalloproteinase 25) ELISA Kit6-碘-4(H)-喹唑啉酮石蜡切片组织INSULIN 蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
猪疱疹病毒PCR检测试剂盒大豆甙元;黄豆苷元CD30分子检测试剂盒100mg13574-13-5Mouse thyrotropin-releasing hormone, TRH Elisa KitHPLC98%CD30分子检测试剂盒100mgPM50mgCAS号：手套 一次性无粉（丁腈）防护手套 10盒/箱 中号59-14-3480-23-996T胱天蛋白酶1(CASP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%CD30分子检测试剂盒100mgPM989-38-8高端化学试剂溶质载体家族30成员5(SLC30A5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)15mgCAS号：手套 一次性无粉（丁腈）防护手套 10盒/箱 大号957-75-5482-53-196T酪氨酸激酶2(Tyk2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%CD22分子检测试剂盒100mgFL603-45-2高端化学试剂溶质载体家族30成员6(SLC30A6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
染料木黄酮;金雀异黄酮CD22分子检测试剂盒100mg13574-13-5Mouse thyrotropin-releasing hormone, TRH Elisa KitHPLC98%CD22分子检测试剂盒100mgFL15mgCAS号：手套 一次性无粉（丁腈）防护手套 10盒/箱 大号957-75-5482-53-196T酪氨酸激酶2(Tyk2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%CD22分子检测试剂盒100mgFL603-45-2高端化学试剂溶质载体家族30成员6(SLC30A6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)50mgCAS号：手套 丁腈手套 小号957-75-5479-20-996T脂酰肌醇特异性酯酶Cβ1(PLCβ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%CD209分子检测试剂盒20mgBtk523-21-7高端化学试剂肝细胞核因子1β(HNF1β)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
5,7-三羟异黄酮-7-糖苷CD209分子检测试剂盒20mg13726-84-6Mouse corticotropin releasing hormone, CRH Elisa KitHPLC98%CD209分子检测试剂盒20mgBtk50mgCAS号：手套 丁腈手套 小号957-75-5479-20-996T脂酰肌醇特异性酯酶Cβ1(PLCβ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%CD209分子检测试剂盒20mgBtk523-21-7高端化学试剂肝细胞核因子1β(HNF1β)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)50mgCAS号：手套 丁腈手套 大号957-75-5904667-65-896T细胞附着蛋白4(CYTH4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)GC99%CD19分子检测试剂盒250mgWNT3A523-21-7高端化学试剂丙糖酸异构酶1(TPI1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
CD19分子检测试剂盒250mg13726-84-6Mouse corticotropin releasing hormone, CRH Elisa KitGC99%CD19分子检测试剂盒250mgWNT3A50mgCAS号：手套 丁腈手套 大号957-75-5904667-65-896T细胞附着蛋白4(CYTH4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)GC99%CD19分子检测试剂盒250mgWNT3A523-21-7高端化学试剂丙糖酸异构酶1(TPI1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)200mgCAS号：一次性丁腈手套（耐用型，无粉，麻面，深蓝色） S号1022-79-362394-00-796T干扰素调节因子5(IRF5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%CD15分子检测试剂盒20mgHIF523-21-7高端化学试剂墨蝶呤还原酶(SPR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
CD15分子检测试剂盒20mg13726-84-6Mouse Insulin Receptor β, ISR-β Elisa KitHPLC98%CD15分子检测试剂盒20mgHIF200mgCAS号：一次性丁腈手套（耐用型，无粉，麻面，深蓝色） S号1022-79-362394-00-796T干扰素调节因子5(IRF5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%CD15分子检测试剂盒20mgHIF523-21-7高端化学试剂墨蝶呤还原酶(SPR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)25mgCAS号：一次性丁腈手套（耐用型，无粉，麻面，深蓝色） M号1022-79-319013-03-796T细胞附着蛋白相互作用蛋白(CYTIP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)GC98%CD147分子检测试剂盒500mgGL4199-88-6高端化学试剂亮氨酸丰富重复FLII相互作用蛋白1(LRRFIP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
CD147分子检测试剂盒500mg3105-95-1Mouse Insulin Receptor β, ISR-β Elisa KitGC98%CD147分子检测试剂盒500mgGL25mgCAS号：一次性丁腈手套（耐用型，无粉，麻面，深蓝色） M号1022-79-319013-03-796T细胞附着蛋白相互作用蛋白(CYTIP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)GC98%CD147分子检测试剂盒500mgGL4199-88-6高端化学试剂亮氨酸丰富重复FLII相互作用蛋白1(LRRFIP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)10mgCAS号：一次性丁腈手套（耐用型，无粉，麻面，深蓝色） L号611-53-0366450-46-696TB-细胞连接蛋白(BLNK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)Purity98%CD146分子检测试剂盒20mgAGRP4199-88-6高端化学试剂端粒保护1同源物(POT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
CD146分子检测试剂盒20mg3105-95-1Mouse Glycated hemoglobin A1c, GHbA1c Elisa KitPurity98%CD146分子检测试剂盒20mgAGRP10mgCAS号：一次性丁腈手套（耐用型，无粉，麻面，深蓝色） L号611-53-0366450-46-696TB-细胞连接蛋白(BLNK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)Purity98%CD146分子检测试剂盒20mgAGRP4199-88-6高端化学试剂端粒保护1同源物(POT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)300mgCAS号：一次性丁腈手套（耐用型，无粉，麻面，深蓝色） XL号611-53-0142542-89-096TB-淋巴细胞趋化因子1(BLC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%CD134分子检测试剂盒20mgRhoA-GTP115-41-3高端化学试剂含亮氨酸丰富重复蛋白3C(LRRC3C)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
莱苞迪苷ACD134分子检测试剂盒20mg3105-95-1Mouse Glycated hemoglobin A1c, GHbA1c Elisa KitHPLC98%CD134分子检测试剂盒20mgRhoA-GTP300mgCAS号：一次性丁腈手套（耐用型，无粉，麻面，深蓝色） XL号611-53-0142542-89-096TB-淋巴细胞趋化因子1(BLC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%CD134分子检测试剂盒20mgRhoA-GTP115-41-3高端化学试剂含亮氨酸丰富重复蛋白3C(LRRC3C)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)0．2mgCAS号：手套 一次性无粉PVC手套 10盒/箱 小号54-42-255-21-096T生长调节致癌基因β(GROβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)GC95%CD117分子检测试剂盒0.5mlLG115-41-3高端化学试剂FK506结合蛋白样蛋白(FKBPL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
黄芩甙CD117分子检测试剂盒0.5ml13226-98-7Mouse lymphocyte function associated antigen 3, LFA-3 Elisa KitGC95%CD117分子检测试剂盒0.5mlLG0．2mgCAS号：手套 一次性无粉PVC手套 10盒/箱 小号54-42-255-21-096T生长调节致癌基因β(GROβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)GC95%CD117分子检测试剂盒0.5mlLG115-41-3高端化学试剂FK506结合蛋白样蛋白(FKBPL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)500mgCAS号：手套 一次性无粉PVC手套 10盒/箱 中号54-42-259219-65-796T生长调节致癌基因γ(GROγ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)GC98%CD10分子检测试剂盒250mgα-KA115-41-3高端化学试剂无翅型MMTV整合位点家族成员4(WNT4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
野黄芩甙；灯盏花乙素；灯盏花素CD10分子检测试剂盒250mg13226-98-7Mouse lymphocyte function associated antigen 3, LFA-3 Elisa KitGC98%CD10分子检测试剂盒250mgα-KA500mgCAS号：手套 一次性无粉PVC手套 10盒/箱 中号54-42-259219-65-796T生长调节致癌基因γ(GROγ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)GC98%CD10分子检测试剂盒250mgα-KA115-41-3高端化学试剂无翅型MMTV整合位点家族成员4(WNT4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)10mgCAS号：手套 一次性无粉PVC手套 10盒/箱 大号72218-68-9165338-27-296T脂酰肌醇特异性酯酶Cβ3(PLCβ3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%CC趋化因子受体7检测试剂盒20mgBACE14196-99-0高端化学试剂含RCC1和BTB域蛋白2(RCBTB2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
储存条件：
仅用于科研14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
