PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
产品名称：猪蓝耳病病毒PCR试剂盒检测试剂盒
英文名称：详见说明书
编号： FSP2804
分类：PCR检测试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 产品仅供科研从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
数据采集：
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时，吸收光谱在 471nm，结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm，发射光谱在 530nm。
数据处理:
以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴，以 Ct 值为纵轴，通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
Human TP63(Tumor Protein p63) ELISA KitHuman GPR37(G Protein Coupled Receptor 37) ELISA Kit六甲基二硅胺烷 细胞HISTONE H3蛋白表达荧光定量检测试剂盒
Human UBD(Ubiquitin D) ELISA KitHuman GPRC5A(G Protein Coupled Receptor, Family C, Group 5, Member A) ELISA Kit1,6-己二胺 HISTONE H3蛋白表达西方杂交分析试剂盒
Human tPA(Plasminogen Activator, Tissue) ELISA KitHuman GR(Glutathione Reductase) ELISA Kit2-羟基-3-甲基吡啶HISTONE H3蛋白免疫共沉淀分析试剂盒
Human TPA(Tissue Polypeptide Antigen) ELISA KitHuman Grb10(Growth Factor Receptor Bound Protein 10) ELISA Kit2-羟基-3-甲基吡啶HISTONE H3蛋白表达ELISA定量检测试剂盒
Human TrxR1(Thioredoxin Reductase 1) ELISA KitHuman Grb2(Growth Factor Receptor Bound Protein 2) ELISA KitH-Asp(OMe)-OH 细胞NF KAPPA B P65蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒
Human TPS(Tryptase) ELISA KitHuman GRIN2A(Glutamate Receptor, Ionotropic, N-Methyl-D-Aspartate 2A) ELISA KitH-Asp(OMe)-OH载玻片细胞NF KAPPA B P65蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
Human TNPO2(Transportin 2) ELISA KitHuman GRIN2B(Glutamate Receptor, Ionotropic, N-Methyl-D-Aspartate 2B) ELISA Kit血晶素冰冻切片组织NF KAPPA B P65蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
Human TPPP(Tubulin Polymerization Promoting Protein) ELISA KitHuman GROβ(Growth Regulated Oncogene Beta) ELISA Kit血晶素石蜡切片组织NF KAPPA B P65蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
猪蓝耳病病毒PCR试剂盒检测试剂盒P53抗体ELISA试剂盒20mg137862-53-4Mouse nitric oxide synthase, NOS Elisa KitHPLC98%P53抗体ELISA试剂盒20mgVZV-IgM15mgCAS号：滤膜 醋酸纤维素滤膜 (50片/盒）0.22um 直径25mm58-96-8150812-12-796T钙网蛋白(CRT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%P53抗体ELISA试剂盒20mgVZV-IgM81-88-9高端化学试剂维甲酸X受体α(RXRα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)25mgCAS号：滤膜 醋酸纤维素滤膜 (50片/盒）0.22um 直径50mm58-96-891296-87-696T肽基脯氨酰顺反式异构酶NIMA相互作用蛋白4(PIN4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%P2蛋白抗体检测试剂盒250mgRock54827-17-7高端化学试剂叉头框蛋白P3(FOXP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
P2蛋白抗体检测试剂盒250mg585-34-2Mouse nitric oxide synthase, NOS Elisa KitHPLC98%P2蛋白抗体检测试剂盒250mgRock25mgCAS号：滤膜 醋酸纤维素滤膜 (50片/盒）0.22um 直径50mm58-96-891296-87-696T肽基脯氨酰顺反式异构酶NIMA相互作用蛋白4(PIN4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%P2蛋白抗体检测试剂盒250mgRock54827-17-7高端化学试剂叉头框蛋白P3(FOXP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)15mgCAS号：滤膜 醋酸纤维素滤膜 (50片/盒）0.22um 直径100mm58-96-8308066-66-296T鸟氨酸氨基甲酰转移酶(OCT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%P2蛋白抗体检测试剂盒250mgHBeAb54827-17-7高端化学试剂酪蛋白κ(CSN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
P2蛋白抗体检测试剂盒250mg585-34-2Mouse inducible nitric oxide synthase, iNOS Elisa KitHPLC98%P2蛋白抗体检测试剂盒250mgHBeAb15mgCAS号：滤膜 醋酸纤维素滤膜 (50片/盒）0.22um 直径100mm58-96-8308066-66-296T鸟氨酸氨基甲酰转移酶(OCT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%P2蛋白抗体检测试剂盒250mgHBeAb54827-17-7高端化学试剂酪蛋白κ(CSN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)15mgCAS号：滤膜 醋酸纤维素滤膜 (50片/盒）0.22um 2cm×8cm58-97-9135062-02-196T肽基脯氨酰异构酶E(PPIE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%P27蛋白检测试剂盒100mgHBcAb54827-17-7高端化学试剂酪蛋白α(CSN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
P27蛋白检测试剂盒100mg1414-45-5Mouse inducible nitric oxide synthase, iNOS Elisa KitHPLC98%P27蛋白检测试剂盒100mgHBcAb15mgCAS号：滤膜 醋酸纤维素滤膜 (50片/盒）0.22um 2cm×8cm58-97-9135062-02-196T肽基脯氨酰异构酶E(PPIE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%P27蛋白检测试剂盒100mgHBcAb54827-17-7高端化学试剂酪蛋白α(CSN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)100mgCAS号：滤膜 醋酸纤维素滤膜（50片/盒）0.45um 直径50mm58-97-9127-17-396T纤调蛋白(FMOD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%P0蛋白抗体检测试剂盒250mgALR54827-17-7高端化学试剂肌肽合酶1(CARNS1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
P0蛋白抗体检测试剂盒250mg1414-45-5Mouse Endothelial nitric oxide synthase, eNOS Elisa KitHPLC98%P0蛋白抗体检测试剂盒250mgALR100mgCAS号：滤膜 醋酸纤维素滤膜（50片/盒）0.45um 直径50mm58-97-9127-17-396T纤调蛋白(FMOD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%P0蛋白抗体检测试剂盒250mgALR54827-17-7高端化学试剂肌肽合酶1(CARNS1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)50mgCAS号：滤膜 水系 25mm（200张/盒）0.22um 3387-36-867-99-296T山梨醇脱氢酶(SDH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%P0蛋白抗体检测试剂盒100mgGHbA1c207738-08-7高端化学试剂抗髓过氧化物酶抗体(Anti-MPO)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
P0蛋白抗体检测试剂盒100mg1414-45-5Mouse Endothelial nitric oxide synthase, eNOS Elisa KitHPLC98%P0蛋白抗体检测试剂盒100mgGHbA1c50mgCAS号：滤膜 水系 25mm（200张/盒）0.22um 3387-36-867-99-296T山梨醇脱氢酶(SDH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%P0蛋白抗体检测试剂盒100mgGHbA1c207738-08-7高端化学试剂抗髓过氧化物酶抗体(Anti-MPO)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)15mgCAS号：滤膜 水系 50mm （50张/盒）0.22um 3387-36-825899-70-196T基膜聚糖(LUM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%OJ抗体/抗异亮氨酰tRNA合成酶抗体检测试剂盒100mgrHMGB-1207738-08-7高端化学试剂纤维蛋白肽A(FPA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
OJ抗体/抗异亮氨酰tRNA合成酶抗体检测试剂盒100mg31886-41-6Mouse Histamine, HIS Elisa KitHPLC98%OJ抗体/抗异亮氨酰tRNA合成酶抗体检测试剂盒100mgrHMGB-115mgCAS号：滤膜 水系 50mm （50张/盒）0.22um 3387-36-825899-70-196T基膜聚糖(LUM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%OJ抗体/抗异亮氨酰tRNA合成酶抗体检测试剂盒100mgrHMGB-1207738-08-7高端化学试剂纤维蛋白肽A(FPA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)100mgCAS号：滤膜 水系 100mm（50张/盒）0.22um3387-36-8127-79-796T蛋白二化物异构酶A3(PDIA3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸检测试剂盒500mgHSV2-IgG207738-08-7高端化学试剂黏膜地址素细胞黏附分子(MAdCAM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸检测试剂盒500mg31886-41-6Mouse Histamine, HIS Elisa KitHPLC98%N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸检测试剂盒500mgHSV2-IgG100mgCAS号：滤膜 水系 100mm（50张/盒）0.22um3387-36-8127-79-796T蛋白二化物异构酶A3(PDIA3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸检测试剂盒500mgHSV2-IgG207738-08-7高端化学试剂黏膜地址素细胞黏附分子(MAdCAM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)25mgCAS号：滤膜 水系 150mm（50张/盒）0.22um3387-36-880-35-396T蛋白二化物异构酶A2(PDIA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶检测试剂盒250mgHSV2-IgM3326-32-7高端化学试剂D-氨基酸氧化酶(DAO)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶检测试剂盒250mg3326-34-9Mouse lipoprotein-associated phospholipase A2, Lp-PL-A2 Elisa KitHPLC98%N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶检测试剂盒250mgHSV2-IgM25mgCAS号：滤膜 水系 150mm（50张/盒）0.22um3387-36-880-35-396T蛋白二化物异构酶A2(PDIA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶检测试剂盒250mgHSV2-IgM3326-32-7高端化学试剂D-氨基酸氧化酶(DAO)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)500mgCAS号：滤膜 水系 25mm（200张/盒）0.45um21931-53-3 624-49-796T载脂蛋白B100(APOB100)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%N-甲基-D-天冬氨酸受体检测试剂盒250mgHSV6-IgG3326-32-7高端化学试剂MutL同源物1(MLH1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
N-甲基-D-天冬氨酸受体检测试剂盒250mg3326-34-9Mouse lipoprotein-associated phospholipase A2, Lp-PL-A2 Elisa KitHPLC98%N-甲基-D-天冬氨酸受体检测试剂盒250mgHSV6-IgG500mgCAS号：滤膜 水系 25mm（200张/盒）0.45um21931-53-3 624-49-796T载脂蛋白B100(APOB100)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%N-甲基-D-天冬氨酸受体检测试剂盒250mgHSV6-IgG3326-32-7高端化学试剂MutL同源物1(MLH1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)15mgCAS号：滤膜 水系 50mm （50张/盒）0.45um 21931-53-37786-61-096T载脂蛋白E(APOE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%N钙黏蛋白/神经钙黏蛋白检测试剂盒250mgHSV6-IgM3326-32-7高端化学试剂酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(PCK1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
储存条件：
仅用于科研14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
