产品名称：猪肺炎支原体PCR试剂盒
英文名称：详见说明书
编号： FSP2800
分类：PCR检测试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
储存条件：
仅用于科研14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、产品仅供科研制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
数据采集：
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时，吸收光谱在 471nm，结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm，发射光谱在 530nm。
数据处理:
以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴，以 Ct 值为纵轴，通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
Human EZH2(Enhancer of zeste homolog 2) ELISA KitHuman GADL1(Glutamate Decarboxylase Like Protein 1) ELISA Kit高三尖杉酯碱 细胞CREB蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒
Human HBcAb(hepatitis B virus Core antibody) ELISA KitHuman GAL12(Galectin 12) ELISA KitL-(+)-对羟基苯甘氨酸载玻片细胞CREB蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
Human τPK1(Tau-Protein Kinase) ELISA KitHuman GAL14(Galectin 14) ELISA KitL-(+)-对羟基苯甘氨酸冰冻切片组织CREB蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
Human VEGF165(Vascular Endothelial Growth Factor165) ELISA KitHuman GAL8(Galectin 8) ELISA KitL-(+)-对羟基苯甘氨酸石蜡切片组织CREB蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
Human VEGF-B(Vascular Endothelial Cell Growth Factor B) ELISA KitHuman GARS(Glycyl tRNA Synthetase) ELISA Kit2-正已基噻吩 载玻片细胞CREB蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
Human VASPIN(Visceral Adipose Specific Serine Protease Inhibitor) ELISA KitHuman GATA4(GATA Binding Protein 4) ELISA Kit2-正已基噻吩 冰冻切片组织CREB蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
Human VEGF-D(Vascular Endothelial Growth Factor D) ELISA KitHuman GCLM(Glutamate Cysteine Ligase, Modifier Subunit) ELISA KitL(+)-2,3-二氨基丙氨酸盐酸盐 石蜡切片组织CREB蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
Human VIL1(Villin 1) ELISA KitHuman GCSFR(Colony Stimulating Factor Receptor, Granulocyte) ELISA KitL(+)-2,3-二氨基丙氨酸盐酸盐 细胞CREB蛋白表达比色法定量检测试剂盒
猪肺炎支原体PCR试剂盒STEAP家族成员1检测试剂盒0.1ml58-71-9Mouse Pyruvate Kinase, M2-PK Elisa KitHPLC98%STEAP家族成员1检测试剂盒0.1mlVE-CAD25mgCAS号：进口半透明 耐高温 塑料瓶 进口 500mL987-65-5 7295-85-496T唾液淀粉酶α1(AMY1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%STEAP家族成员1检测试剂盒0.1mlVE-CAD64071-86-9高端化学试剂促甲状腺素受体(TSHR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)500mgCAS号：进口棕色 耐高温 塑料瓶 进口 125mL 厚34369-07-8 753-73-196T胰弹性蛋白酶(ELA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%Stathmin 1检测试剂盒100mgSdase53760-27-3高端化学试剂烟碱型胆碱受体α3(CHRNα3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
标准品Stathmin 1检测试剂盒100mg58-71-9Mouse Pyruvate Kinase, M2-PK Elisa KitHPLC95%Stathmin 1检测试剂盒100mgSdase500mgCAS号：进口棕色 耐高温 塑料瓶 进口 125mL 厚34369-07-8 753-73-196T胰弹性蛋白酶(ELA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%Stathmin 1检测试剂盒100mgSdase53760-27-3高端化学试剂烟碱型胆碱受体α3(CHRNα3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)eaCAS号：半透明 PP 小口瓶 100ML34369-07-8 767-00-096T成骨生长肽(OGP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%STAT3蛋白抑制分子检测试剂盒100mgsCD14-ST53760-27-3高端化学试剂腭/肺/鼻上皮癌关联蛋白(PLUNC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
STAT3蛋白抑制分子检测试剂盒100mg58-71-9mouse prolactin, PRL Elisa KitHPLC98%STAT3蛋白抑制分子检测试剂盒100mgsCD14-STeaCAS号：半透明 PP 小口瓶 100ML34369-07-8 767-00-096T成骨生长肽(OGP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%STAT3蛋白抑制分子检测试剂盒100mgsCD14-ST53760-27-3高端化学试剂腭/肺/鼻上皮癌关联蛋白(PLUNC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)1.2mLx5ampulesCAS号：棕色HDPE 塑料瓶 125mL 厚34369-07-879660-72-396T白介素1α(IL1α)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%Spondin-2 ELISA试剂盒250mgPF5486-84-0高端化学试剂GLI家族锌指蛋白1(GLI1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Spondin-2 ELISA试剂盒250mg62571-86-2mouse prolactin, PRL Elisa KitHPLC98%Spondin-2 ELISA试剂盒250mgPF1.2mLx5ampulesCAS号：棕色HDPE 塑料瓶 125mL 厚34369-07-879660-72-396T白介素1α(IL1α)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%Spondin-2 ELISA试剂盒250mgPF5486-84-0高端化学试剂GLI家族锌指蛋白1(GLI1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)250mgCAS号：进口棕色 耐高温 塑料瓶 进口 500mL 厚71-30-7 80-08-096T氧化还原蛋白(Trx)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%SPARC相关模块化钙结合蛋白2检测试剂盒250mgCasp-65486-84-0高端化学试剂非转移细胞1表达NM23A蛋白(NME1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
标准品SPARC相关模块化钙结合蛋白2检测试剂盒250mg62571-86-2Mouse Resistin Elisa KitHPLC98%SPARC相关模块化钙结合蛋白2检测试剂盒250mgCasp-6250mgCAS号：进口棕色 耐高温 塑料瓶 进口 500mL 厚71-30-7 80-08-096T氧化还原蛋白(Trx)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%SPARC相关模块化钙结合蛋白2检测试剂盒250mgCasp-65486-84-0高端化学试剂非转移细胞1表达NM23A蛋白(NME1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)15mgCAS号：棕色HDPE 塑料瓶 500mL 厚71-30-7 8025-81-896T氧化还原蛋白(Trx)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%SPARC相关模块化钙结合蛋白1检测试剂盒250mgzonulin5486-84-0高端化学试剂90kDa热休克蛋白αA1(HSP90αA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
SPARC相关模块化钙结合蛋白1检测试剂盒250mg62571-86-2Mouse Resistin Elisa KitHPLC98%SPARC相关模块化钙结合蛋白1检测试剂盒250mgzonulin15mgCAS号：棕色HDPE 塑料瓶 500mL 厚71-30-7 8025-81-896T氧化还原蛋白(Trx)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%SPARC相关模块化钙结合蛋白1检测试剂盒250mgzonulin5486-84-0高端化学试剂90kDa热休克蛋白αA1(HSP90αA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)50mgCAS号：塑料瓶 500mL 蓝盖71-30-7 82-28-096T氧化还原蛋白(Trx)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%SMAD3 ELISA试剂盒250mgTFR214726-29-5高端化学试剂成纤维细胞激活蛋白α(FAPα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
SMAD3 ELISA试剂盒250mg62571-86-2Mouse acetylcholine receptor antibody, AChRab Elisa KitHPLC98%SMAD3 ELISA试剂盒250mgTFR250mgCAS号：塑料瓶 500mL 蓝盖71-30-7 82-28-096T氧化还原蛋白(Trx)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%SMAD3 ELISA试剂盒250mgTFR214726-29-5高端化学试剂成纤维细胞激活蛋白α(FAPα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)25mgCAS号：塑料瓶 500mL 白盖71-30-7 84-15-196T氧还蛋白还原酶1(TrxR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%SMAD2 ELISA试剂盒250mgNicotine14726-29-5高端化学试剂黑素瘤缺乏因子2(AIM2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
SMAD2 ELISA试剂盒250mg651-06-9Mouse acetylcholine receptor antibody, AChRab Elisa KitHPLC98%SMAD2 ELISA试剂盒250mgNicotine25mgCAS号：塑料瓶 500mL 白盖71-30-7 84-15-196T氧还蛋白还原酶1(TrxR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%SMAD2 ELISA试剂盒250mgNicotine14726-29-5高端化学试剂黑素瘤缺乏因子2(AIM2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)200mgCAS号：无菌 PET带刻度诊断瓶 nelgen 125mL 96个/箱 24个1板65-46-3 85-68-796T氧还蛋白还原酶1(TrxR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%SHC转化蛋白1检测试剂盒100mgBrucella14726-29-5高端化学试剂Apelin 13蛋白(AP13)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
SHC转化蛋白1检测试剂盒100mg651-06-9Mouse Osteocalcin/Bone gla protein, OT/BGP Elisa KitHPLC98%SHC转化蛋白1检测试剂盒100mgBrucella200mgCAS号：无菌 PET带刻度诊断瓶 nelgen 125mL 96个/箱 24个1板65-46-3 85-68-796T氧还蛋白还原酶1(TrxR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%SHC转化蛋白1检测试剂盒100mgBrucella14726-29-5高端化学试剂Apelin 13蛋白(AP13)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)20mgCAS号：无菌 PET带刻度诊断瓶 nelgen 650mL 48个/箱 24个1板65-46-3 89-65-696T氧还蛋白还原酶1(TrxR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%SH2携带蛋白检测试剂盒250mgC1q1064-48-8高端化学试剂跨膜4域亚家族A成员1(MS4A1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
SH2携带蛋白检测试剂盒250mg24916-51-6Mouse Osteocalcin/Bone gla protein, OT/BGP Elisa KitHPLC98%SH2携带蛋白检测试剂盒250mgC1q20mgCAS号：无菌 PET带刻度诊断瓶 nelgen 650mL 48个/箱 24个1板65-46-3 89-65-696T氧还蛋白还原酶1(TrxR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%SH2携带蛋白检测试剂盒250mgC1q1064-48-8高端化学试剂跨膜4域亚家族A成员1(MS4A1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)400mgCAS号：离心管 0.5mL 国产65-46-3 90-98-296T孤啡肽(OFQ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%Seryl- tRNA合成酶，细胞质检测试剂盒250mgMTX Ab1064-48-8高端化学试剂铜离子转运ATP酶β肽(ATP7β)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
