产品名称：致病性大肠杆菌PCR试剂盒
英文名称：详见说明书
编号： FSP2794
分类：PCR检测试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
储存条件：
仅用于科研14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、产品仅供科研制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
数据采集：
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时，吸收光谱在 471nm，结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm，发射光谱在 530nm。
数据处理:
以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴，以 Ct 值为纵轴，通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
Human HAV-IgM(hepatitis A virus-Immunoglobulin M) ELISA KitHuman F13B(Coagulation Factor XIII B Polypeptide) ELISA Kit2-甲基-3-羟基-4-吡喃酮 细胞CASPASE-10蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒
Human Cytochrome b-245 Beta Polypeptide ELISA KitHuman F5(Coagulation Factor V/Plasma Factor V) ELISA Kit2-[2-(1-哌嗪基)乙氧基]乙醇载玻片细胞CASPASE-10蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
Human NADPH oxidase 5 ELISA KitHuman F7(Coagulation Factor VII) ELISA Kit2-[2-(1-哌嗪基)乙氧基]乙醇冰冻切片组织CASPASE-10蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
Human TRXR3(Thioredoxin reductase 3) ELISA KitHuman F9(Coagulation Factor IX) ELISA KitN-甲基-L-脯氨酸石蜡切片组织CASPASE-10蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
Human PARK2(E3 ubiquitin-protein ligase parkin) ELISA KitHuman FⅫa(Activated Coagulation Factor Ⅻ) ELISA KitN-甲基-L-脯氨酸 载玻片细胞CASPASE-10蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
Human MFN2(Mitofusin-2) ELISA KitHuman FABP7(Fatty Acid Binding Protein 7, Brain) ELISA KitN-甲基-L-脯氨酸 冰冻切片组织CASPASE-10蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
Human NT-proCNP(N-Terminal Pro-C-Type Natriuretic Peptide) ELISA KitHuman FABP8(Fatty Acid Binding Protein 8, Myelin) ELISA Kit4-羟基喹啉 石蜡切片组织CASPASE-10蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
Human VDAC1(Voltage-dependent anion-selective channel protein 1) ELISA KitHuman FAIM3(Fas Apoptotic Inhibitory Molecule 3) ELISA Kit4-羟基喹啉 细胞CASPASE-10蛋白表达比色法定量检测试剂盒
致病性大肠杆菌PCR试剂盒α乳清蛋白检测试剂盒10mg51166-71-3Mouse lipoprotein α, Lp-α Elisa KitHPLC98%α乳清蛋白检测试剂盒10mgVB1gCAS号：封板膜 透明封板膜（易揭白背板）（75μm）133-32-438821-53-396T亲环素D(CYPD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%α乳清蛋白检测试剂盒10mgVB2353-45-9高端化学试剂血管非炎性蛋白3(VNN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)250mgCAS号：封板膜 微透气封板膜（120μm）133-32-461336-70-796T纤溶酶(Fbn)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)GC98%α葡萄糖苷酶检测试剂盒20mgSEB2353-45-9高端化学试剂胰岛素受体底物2(IRS2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
α葡萄糖苷酶检测试剂盒20mg67233-85-6Mouse lipoprotein α, Lp-α Elisa KitGC98%α葡萄糖苷酶检测试剂盒20mgSEB250mgCAS号：封板膜 微透气封板膜（120μm）133-32-461336-70-796T纤溶酶(Fbn)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)GC98%α葡萄糖苷酶检测试剂盒20mgSEB2353-45-9高端化学试剂胰岛素受体底物2(IRS2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)125mgCAS号：孵育盒 单格（WB专用，透明）133-32-4317-34-096T血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%α平滑肌肌动蛋白检测试剂盒20mgSEC2353-45-9高端化学试剂无翅型MMTV整合位点家族成员3A(WNT3A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
α平滑肌肌动蛋白检测试剂盒20mg67233-85-6Mouse Big Endothelin, Big ET Elisa KitHPLC98%α平滑肌肌动蛋白检测试剂盒20mgSEC125mgCAS号：孵育盒 单格（WB专用，透明）133-32-4317-34-096T血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%α平滑肌肌动蛋白检测试剂盒20mgSEC2353-45-9高端化学试剂无翅型MMTV整合位点家族成员3A(WNT3A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)200mgCAS号：WB孵育盒 抗体孵育盒 单格透明 大60096-23-35328-37-096T杀伤细胞凝集素样受体亚家族A成员1(KLRA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)UV98%，鉴别α-内吗啡肽检测试剂盒20mgSEE76-60-8高端化学试剂分泌型卷曲相关蛋白2(SFRP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
α-内吗啡肽检测试剂盒20mg497-76-7Mouse Big Endothelin, Big ET Elisa KitUV98%，鉴别α-内吗啡肽检测试剂盒20mgSEE200mgCAS号：WB孵育盒 抗体孵育盒 单格透明 大60096-23-35328-37-096T杀伤细胞凝集素样受体亚家族A成员1(KLRA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)UV98%，鉴别α-内吗啡肽检测试剂盒20mgSEE76-60-8高端化学试剂分泌型卷曲相关蛋白2(SFRP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)200mgCAS号：WB孵育盒 抗体孵育盒 单格透明中60096-23-3501-30-496T白三烯E4(LTE4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%α肌动蛋白检测试剂盒100mgPGH276-60-8高端化学试剂胃泌素释放肽(GRP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
α肌动蛋白检测试剂盒100mg497-76-7Mouse coagulation factor Ⅷ related antigen, FⅧ-Ag Elisa KitHPLC98%α肌动蛋白检测试剂盒100mgPGH2200mgCAS号：WB孵育盒 抗体孵育盒 单格透明中60096-23-3501-30-496T白三烯E4(LTE4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%α肌动蛋白检测试剂盒100mgPGH276-60-8高端化学试剂胃泌素释放肽(GRP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)15mgCAS号：WB孵育盒 抗体孵育盒 单格透明小60096-23-3 56392-17-796T前列腺素F2α(PGF2α)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)GC98%α-黑色素细胞刺激素检测试剂盒250mgSOD76-60-8高端化学试剂羟烷基辅酶A脱氢酶β(HADHβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
α-黑色素细胞刺激素检测试剂盒250mg497-76-7Mouse coagulation factor Ⅷ related antigen, FⅧ-Ag Elisa KitGC98%α-黑色素细胞刺激素检测试剂盒250mgSOD15mgCAS号：WB孵育盒 抗体孵育盒 单格透明小60096-23-3 56392-17-796T前列腺素F2α(PGF2α)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)GC98%α-黑色素细胞刺激素检测试剂盒250mgSOD76-60-8高端化学试剂羟烷基辅酶A脱氢酶β(HADHβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)25mgCAS号：WB孵育盒 抗体孵育盒 单格透明全套86-87-379-14-196T白介素7(IL7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)GC98%α谷胱甘肽S转移酶检测试剂盒20mgDHPR76-60-8高端化学试剂碳酸酐酶Ⅻ(CA12)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
α谷胱甘肽S转移酶检测试剂盒20mgMouse Fcoagulation factor Ⅸ, FⅨ Elisa KitGC98%α谷胱甘肽S转移酶检测试剂盒20mgDHPR25mgCAS号：WB孵育盒 抗体孵育盒 单格透明全套86-87-379-14-196T白介素7(IL7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)GC98%α谷胱甘肽S转移酶检测试剂盒20mgDHPR76-60-8高端化学试剂碳酸酐酶Ⅻ(CA12)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)50mgCAS号：盖玻片 12*12mm86-87-366778-17-496TToll样受体2(TLR2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)98.0%(T)α干扰素检测试剂盒20mgCD7362625-32-5高端化学试剂细胞色素P450家族成员11A1(CYP11A1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
α干扰素检测试剂盒20mg2592-95-2Mouse Fcoagulation factor Ⅸ, FⅨ Elisa Kit98.0%(T)α干扰素检测试剂盒20mgCD7350mgCAS号：盖玻片 12*12mm86-87-366778-17-496TToll样受体2(TLR2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)98.0%(T)α干扰素检测试剂盒20mgCD7362625-32-5高端化学试剂细胞色素P450家族成员11A1(CYP11A1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)100mgCAS号：盖玻片 18*18mm86-87-354-85-396TToll样受体6(TLR6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC97%α-辅肌动蛋白4检测试剂盒20mgDHCR762625-32-5高端化学试剂周期素依赖性激酶6(CDK6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
α-辅肌动蛋白4检测试剂盒20mg2592-95-2Mouse coagulation factor Ⅹ, FⅩ Elisa KitHPLC97%α-辅肌动蛋白4检测试剂盒20mgDHCR7100mgCAS号：盖玻片 18*18mm86-87-354-85-396TToll样受体6(TLR6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC97%α-辅肌动蛋白4检测试剂盒20mgDHCR762625-32-5高端化学试剂周期素依赖性激酶6(CDK6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)20mgCAS号：盖玻片 20*20mm 50片15165-79-4 60719-84-896T髓样前体细胞抑制因子2(MPIF2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%α-辅肌动蛋白3检测试剂盒20mgMFO224967-52-6高端化学试剂肿瘤易感基因101(TSG101)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
α-辅肌动蛋白3检测试剂盒20mg2320-96-9Mouse coagulation factor Ⅹ, FⅩ Elisa KitHPLC98%α-辅肌动蛋白3检测试剂盒20mgMFO20mgCAS号：盖玻片 20*20mm 50片15165-79-4 60719-84-896T髓样前体细胞抑制因子2(MPIF2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%α-辅肌动蛋白3检测试剂盒20mgMFO224967-52-6高端化学试剂肿瘤易感基因101(TSG101)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)250mgCAS号：盖玻片 24*24mm 100片15165-79-471751-41-296T多巴胺受体D5(DRD5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)98%（T）α-辅肌动蛋白1检测试剂盒100mgECMA-Ab 7114-03-6高端化学试剂A类清道夫受体3(SCARA3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
