PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
产品名称:榛子PCR检测试剂盒
英文名称:详见说明书
编号: FSP2786
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 产品仅供科研从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
数据采集:
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm,发射光谱在 530nm。
数据处理:
以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴,以 Ct 值为纵轴,通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
Human TXB2(Thromboxane B2) ELISA KitHuman CRLF1(Cytokine Receptor Like Factor 1) ELISA Kit十六烷基三甲氧基硅烷 细胞CASPASE-4蛋白表达荧光定量检测试剂盒
Human KYN(Kynurenine) ELISA KitHuman esRAGE(Endogenous secretory Receptor for Advanced Glycation End product) ELISA Kit十六烷基三甲氧基硅烷 CASPASE-4蛋白表达西方杂交分析试剂盒
Human FPGS(Folylpolyglutamate synthase) ELISA KitHuman CRY1(Cryptochrome 1) ELISA Kit1-(3-羟丙基)-4-甲基哌嗪CASPASE-4蛋白免疫共沉淀分析试剂盒
Human TXB2(Thromboxane B2) ELISA KitHuman CSF2Rβ(Colony Stimulating Factor 2 Receptor Beta) ELISA Kit1-(3-羟丙基)-4-甲基哌嗪CASPASE-4蛋白表达ELISA定量检测试剂盒
Human OT(Oxytocin) ELISA KitHuman CSNK2A2(Casein Kinase 2, alpha 2 Polypeptide) ELISA Kit(1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑烷亚基)二氯(邻异丙氧基苯亚甲基)合钌 细胞CASPASE-5蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒
Human KYN(Kynurenine) ELISA KitHuman CTAPIII(Connective Tissue Activating Peptide III) ELISA Kit3-羟基异烟酸载玻片细胞CASPASE-5蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
Human RFC1(Reduced Folate Carrier 1) ELISA KitHuman CX26(Connexin 26) ELISA Kit3-羟基异烟酸冰冻切片组织CASPASE-5蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
Human Acetylated p53(Acetylated p53) ELISA KitHuman CX40(Connexin 40) ELISA Kit9-芴基甲基1-苯并三唑基碳酸酯石蜡切片组织CASPASE-5蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
榛子PCR检测试剂盒白介素1α检测试剂盒10mg6-氨基烟酸HPLC98%100mLIL-1α ELISA KitHPLC98%白介素1α检测试剂盒10mgSTA-IgM20mgCAS号:科研用真空采血管 EDTA-K2 玻璃 (紫色) 2-3mL (13*75)73-24-598296-48-196TⅠ型前胶原(PCⅠ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素1α检测试剂盒10mgSTA-IgM860-22-0高端化学试剂解整合素金属蛋白酶17(ADAM17)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)400mgCAS号:科研用真空采血管 EDTA-K2玻璃 (紫色) 5mL (13*100)73-24-534981-26-596TATP结合盒转运蛋白G2(ABCG2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素19检测试剂盒2mgCHLA-IgA Ab860-22-0高端化学试剂低密度脂蛋白受体相关蛋白8(LRP8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
白介素19检测试剂盒2mg4-甲氧基-3-硝基苯甲醛HPLC98%100mLIL-19 ELISA KitHPLC98%白介素19检测试剂盒2mgCHLA-IgA Ab400mgCAS号:科研用真空采血管 EDTA-K2玻璃 (紫色) 5mL (13*100)73-24-534981-26-596TATP结合盒转运蛋白G2(ABCG2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素19检测试剂盒2mgCHLA-IgA Ab860-22-0高端化学试剂低密度脂蛋白受体相关蛋白8(LRP8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)500mgCAS号:科研用真空采血管 EDTA-K2玻璃 (紫色) 4mL (13*75)73-24-552483-02-096T血管紧张素Ⅱ受体2(AGTR2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素18结合蛋白检测试剂盒2mgTOXB76-61-9高端化学试剂Disabled同源物1(DAB1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
白介素18结合蛋白检测试剂盒2mg4-甲氧基-3-硝基苯甲醛HPLC98%100mLIL-18BP ELISA KitHPLC98%白介素18结合蛋白检测试剂盒2mgTOXB500mgCAS号:科研用真空采血管 EDTA-K2玻璃 (紫色) 4mL (13*75)73-24-552483-02-096T血管紧张素Ⅱ受体2(AGTR2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素18结合蛋白检测试剂盒2mgTOXB76-61-9高端化学试剂Disabled同源物1(DAB1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)400mgCAS号:科研用真空采血管 氟化钠/肝素钠 玻璃 (灰色)3mL (13*75)73-24-529550-13-896T神经介素N(NMN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素18检测试剂盒20mgHIV-176-61-9高端化学试剂整合素β3(ITGβ3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
白介素18检测试剂盒20mg4-甲氧基-3-硝基苯甲醛HPLC98%100mLIL-18 ELISA KITHPLC98%白介素18检测试剂盒20mgHIV-1400mgCAS号:科研用真空采血管 氟化钠/肝素钠 玻璃 (灰色)3mL (13*75)73-24-529550-13-896T神经介素N(NMN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素18检测试剂盒20mgHIV-176-61-9高端化学试剂整合素β3(ITGβ3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)25mgCAS号:科研用真空采血管 氟化钠/肝素钠 PET材质 停售 3天货期(灰色) 3mL (13*75)321-30-2124151-33-396T白介素2(IL2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素17F检测试剂盒20mgDEHP62625-21-2高端化学试剂肿瘤坏死因子受体超家族成员1B(TNFRSF1B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
白介素17F检测试剂盒20mg2,5-二噻吩HPLC98%100mLInterleukin17F,IL-17F ELISA KitHPLC98%白介素17F检测试剂盒20mgDEHP25mgCAS号:科研用真空采血管 氟化钠/肝素钠 PET材质 停售 3天货期(灰色) 3mL (13*75)321-30-2124151-33-396T白介素2(IL2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素17F检测试剂盒20mgDEHP62625-21-2高端化学试剂肿瘤坏死因子受体超家族成员1B(TNFRSF1B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)50mgCAS号:科研用真空采血管 枸橼酸钠 1:9 PET材质 停售 3天货期 (蓝色)6-10mL (16*100)321-30-2174972-28-996T白介素4(IL4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素17B检测试剂盒10mgMEHP62625-21-2高端化学试剂二氢乳清酸脱氢酶(DHODH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
白介素17B检测试剂盒10mg2,5-二噻吩HPLC98%100mLIL17B ELISA KitHPLC98%白介素17B检测试剂盒10mgMEHP50mgCAS号:科研用真空采血管 枸橼酸钠 1:9 PET材质 停售 3天货期 (蓝色)6-10mL (16*100)321-30-2174972-28-996T白介素4(IL4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素17B检测试剂盒10mgMEHP62625-21-2高端化学试剂二氢乳清酸脱氢酶(DHODH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)300mgCAS号:科研用真空采血管 枸橼酸钠 1:9 PET材质 停售 3天货期 (蓝色)1.8mL (13*75)321-30-2147972-80-696T抗麦胶蛋白(AGA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素17A检测试剂盒10mgCMV62625-21-2高端化学试剂蛋白L-异天冬氨酸-O-甲基转移酶(PCMT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
白介素17A检测试剂盒10mg4'-溴-3-苯丙酮HPLC98%100mLInterleukin 17A,IL-17A/IL-17 ELISA KitHPLC98%白介素17A检测试剂盒10mgCMV300mgCAS号:科研用真空采血管 枸橼酸钠 1:9 PET材质 停售 3天货期 (蓝色)1.8mL (13*75)321-30-2147972-80-696T抗麦胶蛋白(AGA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素17A检测试剂盒10mgCMV62625-21-2高端化学试剂蛋白L-异天冬氨酸-O-甲基转移酶(PCMT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)200mgCAS号:科研用真空采血管 枸橼酸钠 1:9 PET材质 停售 3天货期 (蓝色)5mL (13*100)321-30-2852068-57-496T蛋白激酶Cθ(PKCθ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素16检测试剂盒5mgRV62625-21-2高端化学试剂补体成分5a受体1(C5aR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
白介素16检测试剂盒5mg4'-溴-3-苯丙酮HPLC98%100mLInterleukin 16 ELISA KITHPLC98%白介素16检测试剂盒5mgRV200mgCAS号:科研用真空采血管 枸橼酸钠 1:9 PET材质 停售 3天货期 (蓝色)5mL (13*100)321-30-2852068-57-496T蛋白激酶Cθ(PKCθ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素16检测试剂盒5mgRV62625-21-2高端化学试剂补体成分5a受体1(C5aR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)50mgCAS号:科研用真空采血管 枸橼酸钠 1:9 PET材质 停售 3天货期 (蓝色) 3mL (13*75)6055-72-788509-91-596T蛋白激酶Cι(PKCι)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素15检测试剂盒20mgHSV-Ag1115-39-9高端化学试剂突触融合蛋白1A(STX1A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
白介素15检测试剂盒20mg4'-溴-3-苯丙酮HPLC98%100mLIL-15 ELISA KITHPLC98%白介素15检测试剂盒20mgHSV-Ag150mgCAS号:科研用真空采血管 枸橼酸钠 1:9 PET材质 停售 3天货期 (蓝色) 3mL (13*75)6055-72-788509-91-596T蛋白激酶Cι(PKCι)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素15检测试剂盒20mgHSV-Ag1115-39-9高端化学试剂突触融合蛋白1A(STX1A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)200mgCAS号:科研用真空采血管 枸橼酸钠 1:9 玻璃 (蓝色)6-10mL (16*100)6055-72-75088-75-596T白三烯A4(LTA4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素13检测试剂盒20mgBRCA-1115-39-9高端化学试剂动力蛋白胞浆1重链1(DYNC1H1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
白介素13检测试剂盒20mg(-)-科里内酯4-苯基苯甲酸醇HPLC98%100mLInterleukin 13 ELISA KITHPLC98%白介素13检测试剂盒20mgBRCA-1200mgCAS号:科研用真空采血管 枸橼酸钠 1:9 玻璃 (蓝色)6-10mL (16*100)6055-72-75088-75-596T白三烯A4(LTA4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素13检测试剂盒20mgBRCA-1115-39-9高端化学试剂动力蛋白胞浆1重链1(DYNC1H1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)150mgCAS号:科研用真空采血管 枸橼酸钠 1:9 玻璃 (蓝色) 1.8mL (13*75)6055-72-77014-39-396T蛋白激酶N1(PKN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%白介素12受体亚基β-1检测试剂盒20mgCMV-IgM 115-39-9高端化学试剂皮屑蛋白样蛋白1(LEPREL1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。