储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 产品仅供科研血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
产品名称:羊伪结核棒状杆菌PCR试剂盒
英文名称:详见说明书
编号: FSP2759
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
Human AFAP1L1 ELISA KitHuman RHOA(Transforming protein RhoA) ELISA Kit羟丙基甲基纤维素 细胞P21蛋白表达荧光定量检测试剂盒
Human AlaRS ELISA KitHuman ADC(Arginine decarboxylase) ELISA Kit羟丙基甲基纤维素 P21蛋白表达西方杂交分析试剂盒
Human ADAMDEC1 ELISA KitHuman NRTN(Neurturin) ELISA Kit羟丙基甲基纤维素P21蛋白免疫共沉淀分析试剂盒
Human ADH1C ELISA KitHuman AXIN2(Axin-2) ELISA Kit羟丙基甲基纤维素P21蛋白表达ELISA定量检测试剂盒
Human ACTL6A ELISA KitHuman PPP1CA(Serine/threonine-protein phosphatase PP1-alpha catalytic subunit) ELISA Kit羟丙基甲基纤维素 细胞P27蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒
Human ADH4 ELISA KitHuman VASP(Vasodilator-stimulated phosphoprotein) ELISA Kit羟丙基甲基纤维素载玻片细胞P27蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
Human ADH6 ELISA KitHuman TRIM3(Tripartite motif-containing protein 3) ELISA Kit羟丙基甲基纤维素冰冻切片组织P27蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
Human ADHFE1 ELISA KitHuman TOP1(DNA topoisomerase 1) ELISA Kit羟丙基甲基纤维素石蜡切片组织P27蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
羊伪结核棒状杆菌PCR试剂盒凋亡相关半胱氨酸肽酶4检测试剂盒20mg(S)-(-)-3-叔丁基氨基-1,2-丙二醇HPLC98%100mLcaspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase,Casp4 ELISA KitHPLC98%凋亡相关半胱氨酸肽酶4检测试剂盒20mgFABP1gCAS号:XAD-2大孔吸附树脂98079-52-832981-86-596T接触蛋白4(CNTN4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%凋亡相关半胱氨酸肽酶4检测试剂盒20mgFABP72218-68-9高端化学试剂Exophilin 5蛋白(EXPH5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)500mgCAS号:XAD7HP吸附树脂98079-52-8126105-11-196T颗粒酶K(GZMK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%凋亡蛋白酶激活因子1检测试剂盒20mgA-FABP5536-17-4高端化学试剂外切酶体成分1(EXOSC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
凋亡蛋白酶激活因子1检测试剂盒20mg(S)-(-)-3-叔丁基氨基-1,2-丙二醇HPLC98%100mLapoptosis protease activating factor-1,Apaf-1 ELISA KitHPLC98%凋亡蛋白酶激活因子1检测试剂盒20mgA-FABP500mgCAS号:XAD7HP吸附树脂98079-52-8126105-11-196T颗粒酶K(GZMK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%凋亡蛋白酶激活因子1检测试剂盒20mgA-FABP5536-17-4高端化学试剂外切酶体成分1(EXOSC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)400mgCAS号:pET-32a(+) 质粒 载体21462-39-588664-08-896T视网膜母细胞瘤蛋白1(RB1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%淀粉状蛋白β检测试剂盒5mgFABP45536-17-4高端化学试剂Ets变异体3(ETV3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
淀粉状蛋白β检测试剂盒5mg3-溴-4-甲基噻吩HPLC98%100mLFE65 ELISA kitHPLC98%淀粉状蛋白β检测试剂盒5mgFABP4400mgCAS号:pET-32a(+) 质粒 载体21462-39-588664-08-896T视网膜母细胞瘤蛋白1(RB1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%淀粉状蛋白β检测试剂盒5mgFABP45536-17-4高端化学试剂Ets变异体3(ETV3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)200mgCAS号:pET-28a(+) 质粒 载体21462-39-567416-61-996T嗜铬蛋白A(CHGA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%电子转运黄素蛋白-泛醌氧化还原酶/电子转运黄素蛋白脱氢酶检测试剂盒20mgLipo147-94-4高端化学试剂Ets变异体2(ETV2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
电子转运黄素蛋白-泛醌氧化还原酶/电子转运黄素蛋白脱氢酶检测试剂盒20mg3-溴-4-甲基噻吩HPLC98%100mLETFDH ELISA kitHPLC98%电子转运黄素蛋白-泛醌氧化还原酶/电子转运黄素蛋白脱氢酶检测试剂盒20mgLipo200mgCAS号:pET-28a(+) 质粒 载体21462-39-567416-61-996T嗜铬蛋白A(CHGA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%电子转运黄素蛋白-泛醌氧化还原酶/电子转运黄素蛋白脱氢酶检测试剂盒20mgLipo147-94-4高端化学试剂Ets变异体2(ETV2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)100mgCAS号:pET-30a(+) 质粒 载体21462-39-517019-92-096T蕈碱型胆碱受体M2(CHRM2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%电子转移黄素蛋白β肽检测试剂盒5mgLF147-94-4高端化学试剂Ets变异体1(ETV1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
电子转移黄素蛋白β肽检测试剂盒5mg3,5-二碘苯HPLC98%100mLETFB ELISA KitHPLC98%电子转移黄素蛋白β肽检测试剂盒5mgLF100mgCAS号:pET-30a(+) 质粒 载体21462-39-517019-92-096T蕈碱型胆碱受体M2(CHRM2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%电子转移黄素蛋白β肽检测试剂盒5mgLF147-94-4高端化学试剂Ets变异体1(ETV1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)100mgCAS号:pUC18 质粒 载体26016-99-996T缓激肽(BK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%电压门控钾通道抗体检测试剂盒20mgLSA147-94-4高端化学试剂Espin蛋白(ESPN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
电压门控钾通道抗体检测试剂盒20mg3,5-二碘苯HPLC98%100mLvoltage-gated potassium channel antibody,VGKC-ab ELISA KitHPLC98%电压门控钾通道抗体检测试剂盒20mgLSA100mgCAS号:pUC18 质粒 载体26016-99-996T缓激肽(BK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%电压门控钾通道抗体检测试剂盒20mgLSA147-94-4高端化学试剂Espin蛋白(ESPN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)100mgCAS号:Puc19 质粒 载体26016-99-91111088-89-196T纤维蛋白原β(FGβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%电压门控钾通道检测试剂盒20mgAdipoR13083-77-0高端化学试剂表皮生长因子途径底物蛋白1(EPN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
电压门控钾通道检测试剂盒20mg2-氨基-5-溴噻唑HPLC98%100mLvoltage-gated potassium channel,VGKC ELISA KitHPLC98%电压门控钾通道检测试剂盒20mgAdipoR1100mgCAS号:Puc19 质粒 载体26016-99-91111088-89-196T纤维蛋白原β(FGβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%电压门控钾通道检测试剂盒20mgAdipoR13083-77-0高端化学试剂表皮生长因子途径底物蛋白1(EPN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)200mgCAS号:PBR322 质粒 载体26016-99-954113-95-096T松弛肽(RLN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%第八因子相关抗原检测试剂盒5mgAdipoR23083-77-0高端化学试剂表皮生长因子途径底物蛋白2(EPN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
第八因子相关抗原检测试剂盒5mg2-氨基-5-溴噻唑HPLC98%100mLFactor Ⅷ-related Antigen,FⅧAg ELISA KitHPLC98%第八因子相关抗原检测试剂盒5mgAdipoR2200mgCAS号:PBR322 质粒 载体26016-99-954113-95-096T松弛肽(RLN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%第八因子相关抗原检测试剂盒5mgAdipoR23083-77-0高端化学试剂表皮生长因子途径底物蛋白2(EPN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)350mgCAS号:pEGFP-N1 哺乳动物表达载体39831-55-514103-09-496TTGFβ诱导早期应答基因1(TIEG1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%第10号染色体缺失并与张力蛋白同源的酸酶检测试剂盒10mgLTA3083-77-0高端化学试剂表皮生长因子途径底物蛋白3(EPN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
第10号染色体缺失并与张力蛋白同源的酸酶检测试剂盒10mg胆固醇油酸酯HPLC98%100mLPTEN ELISA KitHPLC98%第10号染色体缺失并与张力蛋白同源的酸酶检测试剂盒10mgLTA350mgCAS号:pEGFP-N1 哺乳动物表达载体39831-55-514103-09-496TTGFβ诱导早期应答基因1(TIEG1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%第10号染色体缺失并与张力蛋白同源的酸酶检测试剂盒10mgLTA3083-77-0高端化学试剂表皮生长因子途径底物蛋白3(EPN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)200mgCAS号:pGEX-6P-1质粒 载体39831-55-5681457-46-596T激素脱落酸(ABA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%抵抗素样分子β检测试剂盒20mgACOS3083-77-0高端化学试剂外血小板溶素1(EPPK1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
抵抗素样分子β检测试剂盒20mg4-硝基咪唑HPLC98%100mLRELM-β ELISA KitHPLC98%抵抗素样分子β检测试剂盒20mgACOS200mgCAS号:pGEX-6P-1质粒 载体39831-55-5681457-46-596T激素脱落酸(ABA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%抵抗素样分子β检测试剂盒20mgACOS3083-77-0高端化学试剂外血小板溶素1(EPPK1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)150mgCAS号:DH5α感受态细胞39831-55-582373-94-296T胎盘碱性酸酶(ALPP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%抵抗素检测试剂盒20mgLXA4605-23-2高端化学试剂伊默菌素(EMD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
数据采集:
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm,发射光谱在 530nm。
数据处理:
以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴,以 Ct 值为纵轴,通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。