柯萨奇病毒A型PCR检测试剂盒

储存条件：
仅用于科研14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 产品仅供科研血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
产品名称：柯萨奇病毒A型PCR检测试剂盒
英文名称：详见说明书
编号： FSP2552
分类：PCR检测试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
Human LIMS1 ELISA KitHuman C1QC(Complement C1q subcomponent subunit C) ELISA Kit2,3-二甲基吡嗪AtT-20

Human LGI2 ELISA KitHuman SIRT4(NAD-dependent ADP-ribosyltransferase sirtuin-4) ELISA Kit亚氨基二乙酸二乙酯Neuro-2a[N2a;Neuro-2a]

Human LGP2 ELISA KitHuman GDF11(Growth/differentiation factor 11) ELISA Kit亚氨基二乙酸二乙酯Mouse podocyte

Human LGI3 ELISA KitHuman FABP5(Fatty acid-binding protein, epidermal) ELISA Kit铅试剂CHL

Human LGR5 ELISA KitHuman PFN2(Profilin-2) ELISA Kit3,6-二碘-9H-咔唑AR42J

Human LDLRAD1 ELISA KitHuman NCOR1(Nuclear receptor corepressor 1) ELISA Kit3,6-二碘-9H-咔唑GH3

Human LDOC1 ELISA KitHuman NDN(Necdin) ELISA Kit二苯并呋喃MA104

Human LEF1 ELISA KitHuman HNRNPK(Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K) ELISA Kit二苯并呋喃CCC-SMC-1
柯萨奇病毒A型PCR检测试剂盒Homo sapiens, humanRabbit Anti-MK IgM/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647标记的兔抗猴IgM 5-氯戊酸Cytokeratin 5/CK5细胞角蛋白5抗体特价促销

Homo sapiens, humanRabbit Anti-MK IgM/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5标记的兔抗猴IgM 4-氨基-3-戊烯-2-酮5-HT5-羟色胺抗体特价促销

Coprinus cinereus (Schaeffer : Fries) Gray, ..Rabbit Anti-MK IgM/PE-Cy7  PE-Cy7标记的兔抗猴IgM 辛酸己酯HRPT2/CDC73/Parafibromin甲状旁腺功能亢进蛋白2抗体（细胞分裂周期73）特价促销

Delacroixia coronata (Costantin) Saccardo e ..Rabbit Anti-Monkey IgM/Bio  生物素标记的兔抗猴IgM 4-二甲胺基丁醛缩二乙醇5-HTR1A5-羟色胺受体1A抗体特价促销

Mus musculus (B cell); Mus musculus (myeloma ..Rabbit Anti-Monkey IgM/AP  碱性磷酸酶（AP）标记的兔抗猴IgM 乙二醇二乙酸酯THOC2转录因子THOC2抗体特价促销

Mesanophrys chesapeakensis Messick and SmallRabbit Anti-Monkey IgM/Gold  胶体金标记的兔抗猴IgM 烯丙基羟乙基醚VEGF血管内皮生长因子抗体特价促销

Burkholderia glathei (Zolg and Ottow) Vanda ..Rabbit Anti-Monkey IgM/HRP  辣根过氧化物酶标记的兔抗猴IgM 4-甲氧基-1-丁醇DNA Ligase IV/LIG4DNA连接酶4抗体特价促销

Homo sapiens, humanRabbit Anti-Monkey IgM/PE-Cy3  PE-Cy3标记的兔抗猴IgM 反-4-BOC-氨基环己醇5-HTR1B5-羟色胺受体1B抗体特价促销
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
数据采集：
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时，吸收光谱在 471nm，结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm，发射光谱在 530nm。
数据处理:
以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴，以 Ct 值为纵轴，通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。