储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 产品仅供科研血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
产品名称:火鸡出血性肠炎病毒PCR试剂盒
英文名称:Turkey Hemorrhagic Enteritis Virus(TuHEV)PCR
编号: FSP2358
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
Rabbit Anti-Goat IgM/PE-Cy7PE-Cy7标记的兔抗羊IgM特价促销anti- TMEFF2 antibody溴代环戊烷11-溴十一酸
Rabbit Anti-Goat IgM/RBITC罗丹明标记的兔抗羊IgM特价促销anti- TMEM102 antibody2-氯-4,5-二氟苯甲酸溴三氯甲烷
Rabbit Anti-Goat IgM/FITCFITC标记的兔抗羊IgM特价促销anti- TMEM106B antibody2-氯-4,5-二氟苯甲酸2-溴-1,3,5-三甲基苯
Rabbit Anti-Guinea pig IgG/FITCFITC标记的兔抗豚鼠IgG特价促销anti- TMEM106B antibody2-氯-1,3-二甲基氯化咪唑鎓4-溴三苯胺
Rabbit Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 555Alexa Fluor 555标记的兔抗豚鼠IgG特价促销anti- TMEM108 antibody2-氯-1,3-二甲基氯化咪唑鎓2-溴噻唑
Rabbit Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 647Alexa Fluor 647标记的兔抗豚鼠IgG特价促销anti- TMEM11 antibody2-氯-1,3-二甲基氯化咪唑鎓4-溴-2-噻吩甲醛
Rabbit Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy5.5PE-Cy5.5标记的兔抗豚鼠IgG特价促销anti- TMEM120A antibody(3-氯吡嗪-2-基)甲胺盐酸盐2-溴噻吩
Rabbit Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy7PE-Cy7标记的兔抗豚鼠IgG特价促销anti- TMEM120B antibody(3-氯吡嗪-2-基)甲胺盐酸盐5-溴-2-氰基吡啶
火鸡出血性肠炎病毒PCR试剂盒Rat matrix metalloproteinase 13,MMP-13 ELISA试剂盒RPS6 S6核糖体蛋白抗体1-氯乙基乙基碳酸酯偶发分枝杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
Rat matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA试剂盒Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser235+Ser236) 磷酸化S6核糖体蛋白抗体4-二甲氨基偶氮苯-4'-磺酰-L-色氨酸人分枝杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
Rat matrix metalloproteinase 3,MMP-3 ELISA试剂盒 Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser240/244) 磷酸化S6核糖体蛋白抗体8-氯-1-辛醇堪萨斯分枝杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
Rat matrix metalloproteinase 4,MMP-4 ELISA试剂盒 Rb/P105 RB 成视网膜细胞瘤基因抗体5-氯-1-戊醇麻风分枝杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
Rat matrix metalloproteinase 5,MMP-5 ELISA试剂盒 phospho-Rb/p105-Rb(Ser780) 磷酸化成视网膜细胞瘤抑癌蛋白抗体六甲基二锡玛尔摩分枝杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
Rat matrix metalloproteinase 7,MMP-7 ELISA试剂盒phospho-FXYD1 (Ser83) 磷酸化磷酸神经膜抗体2,4-二溴噻唑海鱼分枝杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
Rat matrix metalloproteinase 8/Neutrophil collagenase,MMP-8 ELISA试剂盒RRAD RRAD抗体2,5-二溴噻唑田鼠分枝杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
Rat matrix metalloproteinase 9/Gelatinase B,MMP-9 ELISA试剂盒 phospho-FXYD1 (Ser88) 磷酸化磷酸神经膜抗体4-溴-3-甲基苯甲腈副结核分枝杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
数据采集:
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm,发射光谱在 530nm。
数据处理:
以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴,以 Ct 值为纵轴,通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。