储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 产品仅供科研血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
产品名称:寻常圆线虫PCR检测试剂盒
英文名称:Strongylus vulgaris PCR
编号: FSP2270
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
F1 protein (YERSINIA PESTIS)鼠疫F1蛋白/鼠疫耶尔森氏菌荚膜抗原F1单克隆抗体特价促销anti- SNAP29 antibody[1,3-双(2,6-二异丙基苯)咪唑-2-叉](3-氯吡啶)二氯化钯6-氯苯并三氮唑-1,1,3,3-四甲基脲四氟硼酸酯(TCTU)
XIAP/BIRC4X-连锁凋亡蛋白/性连锁凋亡抑制蛋白抗体特价促销anti- SNAPC5 antibody[1,3-双(2,6-二异丙基苯)咪唑-2-叉](3-氯吡啶)二氯化钯2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸酯(TATU)
YY1核转录调节因子YY1抗体特价促销anti- SNAPIN antibody[1,3-双(2,6-二异丙基苯)咪唑-2-叉](3-氯吡啶)二氯化钯2,6-二叔丁基吡啶
XAF1/FBXO39XIAP相关因子1凋亡抑制蛋白抗体特价促销anti- SNCAIP antibody双(三环己基磷)钯(0)间三甲基苯磺酰咪唑
XRCC1X射线修复交叉互补蛋白抗体特价促销anti- SNCB antibody双(三环己基磷)钯(0)三吡咯烷基氯化鏻六氟磷酸盐
XRCC3X射线修复交叉互补蛋白3抗体特价促销anti- SND1 antibody2-氯-3-硝基-5-溴-6-甲基吡啶1-(氯-1-吡咯烷基亚甲基)吡咯烷鎓六氟磷酸盐
XBP-1细胞核转录因子X盒结合蛋白抗体特价促销anti- SND1 antibody2-氯-3-硝基-5-溴-6-甲基吡啶(3H-1,2,3-三-唑并[4,5-b]吡啶-3-氧基)三-1-吡咯烷基磷六氟磷酸盐
ZAP-70zeta相关蛋白70抗体特价促销anti- SNF5 antibody2-溴-1H-咪唑伍德沃德氏试剂K
寻常圆线虫PCR检测试剂盒Porcine Immunoglobulin G,IgG ELISA试剂盒NKA 神经激肽A抗体1,1-二溴-3,3,3-三氟丙酮 六氰钴酸锌
Porcine Immunoglobulin M,IgM ELISA试剂盒NKB 神经激肽B抗体3,5-二硝基苯甲酸甲酯 盐酸奥洛他定
Porcine Influenza viruses A,FLU A ELISA试剂盒NKG2A NK细胞受体2A抗体5,6-二甲氧基-2-(4-吡啶基)亚甲基-1-茚酮 1-(N-Boc-氨乙基)哌嗪
Porcine Insulin,INS ELISA试剂盒NKG2C NK细胞受体2C抗体3,5-吡啶二甲酸二乙酯 4-氯苯基脲
Porcine insulin-like growth factors 2,IGF-2 ELISA试剂盒NKG2D/CD314/KLRK1 NK细胞受体2D抗体1-甲基-1H-咪唑-2-甲醛 乙二胺四乙酸铜钠二水合物
Porcine insulin-like growth factors binding protein 3,IGFBP-3 ELISA试剂盒NKR/Neurokin B receptor 神经激肽B受体抗体肉桂基氯 苯基胍碳酸盐
Porcine insulin-like growth factors-1,IGF-1 ELISA试剂盒Nm23/NME1/NME2 肿瘤转移抑制基因抗体N-乙基异丙基胺 5-甲基-2-呋喃甲胺
Porcine intercellular adhesion molecule 2,ICAM-2 ELISA试剂盒NME1/Nm23-H1/NDKA 肿瘤抑制基因抗体3-羧基哒嗪 2,2-二甲基-3-羟基丙酸甲酯
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
数据采集:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm,发射光谱在 530nm。
数据处理:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴,以 Ct 值为纵轴,通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。