产品名称:猪类圆线虫PCR试剂盒
英文名称:Strongyloides ransomiPCR
编号: FSP2268
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、产品仅供科研制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
数据采集:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm,发射光谱在 530nm。
数据处理:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴,以 Ct 值为纵轴,通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
WDR26心肌缺血预处理正调节蛋白2抗体特价促销anti- SMPX antibody1-苄基-3-羟基哌啶二苯亚甲基甘氨酸甲酯
Wnt3a信号通路Wnt3a抗体特价促销anti- Smtnl1-phospho-S301 antibody二苯甲酮亚胺1H-吡唑-1-甲脒盐酸盐
WIF1Wnt信号抑制因子1抗体特价促销anti- SMTNL2 antibody二苯甲酮亚胺异丁酸-3-羟基-2,2,4-三甲基戊酯
WIP1/PPM1D原癌基因WIP1抗体特价促销anti- SMU1 antibody二苯甲酮亚胺丙基磷酸酐(T3P)
WNT9A信号通路Wnt9a抗体特价促销anti- SMURF1 antibody1-Boc-哌啶-3-甲醛3-甲氧基-2-硝基吡啶
WNT2B信号通路Wnt2B抗体特价促销anti- SMYD1-Specific antibody1-Boc-哌啶-3-甲醛2-肟氰乙酸乙酯
WNT5A信号通路Wnt5a抗体特价促销anti- SMYD2 antibody叔丁氧羰基-N-beta-三苯甲基-L-天门冬酰胺3-硝基-1,2,4-三氮唑
WNT10A信号通路WNT10A抗体特价促销anti- SMYD3 antibody叔丁氧羰基-N-beta-三苯甲基-L-天门冬酰胺碳酸二(2-吡啶)酯
猪类圆线虫PCR试剂盒Porcine Follicle-stimulating hormone,FSH ELISA试剂盒Phospho-NFKB1(Thr932) 磷酸化细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体2-甲氧基-4-甲基苯腈 4-哌嗪哌啶
Porcine gastrin receptor,GsaR ELISA试剂盒Phospho-NFKB1(Ser907) 磷酸化细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体3-甲基四氢苯二甲酸酐 2-氧化吲哚-6-甲酸甲酯
Porcine Glucose transporter 2,GLUT2 ELISA试剂盒Phospho-NFKB1(Ser338) 磷酸化细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体1-十六烷基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐 2-[[叔丁氧羰基]甲基氨基]苯甲酸
Porcine growth hormone releasing hormone,GHRH ELISA试剂盒Phospho-NFKB1(Ser893) 磷酸化细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体5-溴-2-甲基苯甲醛 磺酰磺胺
Porcine Growth Hormone Releasing Peptide,GHRP ELISA试剂盒NFkB p100/p52 细胞核因子p100/p52k基因结合核因子抗体3-吡唑烷基氢氧氯酸 磺胺磺隆
Porcine growth hormone releasing peptide-Ghrelin,GHRP-Ghrelin ELISA试剂盒NGFR/p75NTR 神经生长因子受体抗体2-氰基-3,5-二氟吡啶 S-3-BOC-氨甲基吡咯烷
Porcine growth hormone,GH ELISA试剂盒NGF-β 神经生长因子β抗体4,6-二甲氧基-2-(苯氧基羰基)氨基嘧啶 N,N-二甲基-4-((E)-4-((E)-(4-硝基亚苄基)氨基)苯乙烯基)苯胺
Porcine Heat Shock Protein 20,HSP-20 ELISA试剂盒SDCG1 血清学定义结肠癌抗原1抗体9,9-二[(4-羟乙氧基)苯基]芴 2-Boc-六氢吡咯并[3,4-c]吡咯