产品名称:嗜麦芽窄食单胞菌PCR试剂盒
英文名称:Stenotrophomonas maltophiliaPCR
编号: FSP2244
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、产品仅供科研制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
数据采集:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm,发射光谱在 530nm。
数据处理:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴,以 Ct 值为纵轴,通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
phospho-TOPO II Alpha (Ser1106)磷酸化DNA拓普西异构酶Ⅱ抗体特价促销anti- SHPK antibody2-氟-5-溴烟酸铁酞菁
TPH/Trptophan Hydroxylase 色氨酸羟化酶抗体特价促销anti- SHROOM1 antibody5-溴-2-氯吡啶4-BOC-2-吗啡啉甲酸
phospho-TPH(Ser260)磷酸化色氨酸羟化酶抗体特价促销anti- SIAH1 antibody5-溴-2-氯吡啶1-Boc-4-甲基-4-哌啶甲酸
phospho-TPH(Ser19) 磷酸化色氨酸羟化酶抗体特价促销anti- SIAH2 antibody1-溴代正己烷溴代异辛烷
TPO甲状腺过氧化物酶抗体特价促销anti- SIDT1 antibody溴酚蓝3-溴-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯
TRA16激素受体相关蛋白16抗体特价促销anti- SIGLEC5 antibody溴酚蓝(S)-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-基-甲醇
TRA16激素孤儿受体相关蛋白抗体特价促销anti- SIGLEC6 antibody溴硝醇4-溴-2-氟苄醇
TRADD肿瘤坏死因子受体1相关死亡域蛋白抗体特价促销anti- SIGLEC7 antibody溴硝醇5-甲氧基-2-硝基苯甲酸
嗜麦芽窄食单胞菌PCR试剂盒Mouse platelet factor 3, PF3 ELISA试剂盒MMP19 基质金属蛋白酶18/193-羰基-3,4-二氢-2H-1,4-苯并噻嗪-6-羧酸甲酯 葡乳醛酸钙
Mouse platelet membrane glycoprotein ⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢa ELISA试剂盒MMP20 基质金属蛋白酶205-溴-2-碘苯胺 4-氯-2-甲氧基-3-吡啶甲酸甲酯
Mouse Platelet-Derived Growth Factor AB,PDGF-AB ELISA试剂盒 MMP24/ MMP25/MMP21 基质金属蛋白酶-24抗体1-甲基-1H-吡唑-4-甲醛 2-乙氧基-4-溴苯腈
Mouse Platelet-Derived Growth Factor Soluble Receptor α,PDGFsR-α ELISA试剂盒 MMP-22 基质金属蛋白酶22抗体2-巯基乙氧基乙醇 5-氨基-2,4-二氟苯甲酸甲酯
Mouse Pro Atrial Natriuretic Peptide,Pro-ANP ELISA试剂盒MMP-23 基质金属蛋白酶23抗体5-氯-2-氟-4-碘吡啶 4-溴丁腈
Mouse Procalcitonin,PCT ELISA试剂盒MMP-26 基质金属蛋白酶-26抗体2-氟-4-碘苯甲酸 乙酸异冰片酯
Mouse Progesterone,PROG ELISA试剂盒MMP-28 基质金属蛋白酶28抗体10,10-二甲基蒽酮 盐酸万乃洛韦
Mouse Proinsulin,PI ELISA试剂盒MMP-10 基质金属蛋白酶-10抗体氯苯胍盐酸盐 氯沙坦钾