储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 产品仅供科研血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
产品名称:尼泊尔葡萄球菌PCR检测试剂盒
英文名称:Staphylococcus nepalensisPCR
编号: FSP2239
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
TIMP-2金属蛋白酶组织抑制因子-2抗体特价促销anti- SH2D1A antibody4-溴噻吩-2-甲醛4-氟苯乙胺
TIMP-3金属蛋白酶组织抑制因子-3抗体特价促销anti- SH2D1B antibody苄基溴化镁2,6-二溴吡啶-4-羧酸
TIMP-4金属蛋白酶组织抑制因子-4抗体特价促销anti- SH2D2A antibody苄基溴化镁5-溴-1H-吲哚-3-甲醛
TLK1调节染色体组装激酶1抗体特价促销anti- SH2D3A antibody苄基溴化镁2-溴喹啉
Phospho-TLK1(Ser695)磷酸化调节染色体组装激酶1抗体特价促销anti- SH2D3C antibody氨基甲酸苄酯重铬酸吡啶盐
TLR1Toll样受体1抗体特价促销anti- SH2D4A antibody氨基甲酸苄酯2-苄氧基苯胺
TLR2/CD282Toll样受体2抗体特价促销anti- SH2D5 antibody氨基甲酸苄酯N-甲基-L-脯氨酸一水合物
TLR3Toll样受体3抗体特价促销anti- SH3BGR antibody苄基二苯基膦2-溴-4-氯氟苯
尼泊尔葡萄球菌PCR检测试剂盒Mouse nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH ELISA试剂盒 MHC class I antigen B 15 组织相关抗原HLA-B15抗体氯化磷酰胆碱钙盐 2-甲基丁醛
Mouse nitric oxide synthase,NOS ELISA试剂盒Microsporidia protien 蜜蜂微孢子虫蛋白抗体5-溴-2-羟甲基吡啶 1,6-萘二磺酸二钠盐
Mouse nitric oxide,NO ELISA试剂盒Midnolin isoform Protein 1 中脑核仁蛋白1抗体8-溴-7-羟基喹啉 N-苄基马来酰亚胺
Mouse N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP ELISA试剂盒MIDN 中脑核仁蛋白抗体4-氟-3-甲氧基苯乙酮 左旋苯甘氨酸邓钾盐
Mouse N-terminal procollagen Ⅲ propeptide,PⅢNP ELISA试剂盒Midkine 中期因子/肝素结合生长因子抗体3-甲硫基-1-己醇 N-氰基乙亚氨酸乙酯
Mouse nuclear factor-κB p65,NF-κB p65 ELISA试剂盒MLK3/RHOE 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶MLK3抗体2-(三氟甲氧基)苯甲酰氯 2,3-二溴丙醇
Mouse omentin ELISA试剂盒Phospho-MLK3(Thr277/Ser281) 磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶MLK3抗体2-(二氟甲氧基)苯甲醛 2,4,6-三叔丁基苯胺
Mouse Oncostatin-M,OSM ELISA试剂盒 MLX 转化因子样蛋白4抗体4-氟-3-三氟甲基苯甲酸 4-(4-氟苯甲酰基)丁酸
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
数据采集:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm,发射光谱在 530nm。
数据处理:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴,以 Ct 值为纵轴,通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。