伊氏李斯特菌PCR检测试剂盒

PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
产品名称：伊氏李斯特菌PCR检测试剂盒
英文名称：Listeria ivanoviiPCR
编号： FSP1843
分类：PCR检测试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 产品仅供科研从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
数据采集：
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时，吸收光谱在 471nm，结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm，发射光谱在 530nm。
数据处理:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴，以 Ct 值为纵轴，通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
CTBP1C端结合蛋白1抗体特价促销anti- LEPREL2 antibodyNAD浓度比色法定量检测试剂盒丝氨酸/苏氨酸激酶家族成员的基因WNK3抗体

CT DNA(calf thymus DNA)小牛胸腺DNA抗体特价促销anti- leptin antibodyNADPH浓度比色法定量检测试剂盒信号通路Wnt2B抗体

TNFAIP5/Pentraxin 3肿瘤坏死因子α诱导蛋白5特价促销anti- LETM1 antibodyNADP浓度比色法定量检测试剂盒WEE1蛋白抗体

CTCF转录阻抑蛋白CTCF抗体特价促销anti- LETM2 antibody血清/血浆总胆汁酸酶连续循环比色法定量检测试剂盒野生型P53诱导基因1抗体

PROK2/Prokineticin 2前动力蛋白2抗体特价促销anti- LGALS3BP antibody组织总胆汁酸酶连续循环比色法定量检测试剂盒心肌缺血预处理正调节蛋白2抗体

CTGF结缔组织生长因子抗体特价促销anti- LGALS3BP antibody体液总胆汁酸酶连续循环比色法定量检测试剂盒磷酸化WEE1蛋白抗体

CTGFL结缔组织生长因子样蛋白抗体特价促销anti- LGALS3BP antibody组织肾素（renin）活性荧光定量检测试剂盒信号通路Wnt3a抗体

CD150/SLAMF1信号淋巴细胞活化分子CD150抗体特价促销anti- LGI1 antibody血液肾素（renin）荧光定量检测试剂盒信号通路Wnt1抗体
伊氏李斯特菌PCR检测试剂盒PAK-PBD protein, GST-taggedGPVI/Glycoprotein VI  糖蛋白VI/六糖蛋白抗体 高氯酸铜(II)六水合物Linalool；芳樟醇

Wild type RhoC protein, His-taggedSISP1/GI24  应激诱导分泌蛋白1抗体 水杨酰肼Brassinolide；24-表油菜素内酯/芸苔素内酯

Wild type RhoC protein, His-taggedMMRN1/ECM  内皮细胞MMRN1蛋白抗体 左乙拉西坦L-(+)-Lactic acid；L-乳酸

Constitutively active RhoA protein, His-taggedPAFAH1B2  血小板衍化生长因子β抗体 2-氨基-5-溴-4-三氟甲基嘧啶Oxytetracycline；土霉素

Constitutively active RhoA protein, His-taggedPAFAH1B3/PAFAHG  血小板衍化生长因子γ抗体 5-(二氟甲氧基)-2-{[(3,4-二甲氧基-2-吡啶基)甲基]硫}-1H-苯并咪唑Levonorgestrel；左炔诺孕酮

Wild type RhoA protein, His-taggedPleckstrin/p47  血小板47蛋白抗体 2-苯基丙醛Simvastatin；辛伐他汀/辛伐他丁

Wild type RhoA protein, His-taggedSCUBE1  新型血小板相关血管内皮分泌蛋白SCUBE1抗体 4-甲氧基邻苯二胺Forsythoside A；连翘酯苷A

Wild type RhoA protein, GST-taggedIGFALS/ALS  胰岛素样生长因子酸不稳定亚基ALS抗体 2-丁氧基-3,4-二氟苯胺Diammonium Glycyrrhizate；甘草酸二铵盐
储存条件：
仅用于科研14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。