储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 产品仅供科研血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
产品名称:猪等孢球虫通用PCR试剂盒
英文名称:Isospora suisPCR
编号: FSP1805
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
Phospho-CDK2 (Thr160)磷酸化周期素依赖性激酶2抗体特价促销anti- JNK antibody细胞EGFR激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)肿瘤蛋白D53抗体
Phospho-CDK2 (Thr14)磷酸化周期素依赖性激酶2抗体特价促销anti- jnk antibody组织EGFR激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)血栓素B2抗体(一种新发现的抑癌基因)
CDK3周期素依赖性激酶3抗体特价促销anti- JNK2 antibody细胞EPHA1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)新型抑癌基因抗体
CDK4周期素依赖性激酶4抗体特价促销anti- JNK2 antibody组织EPHA1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)微管相关蛋白抗体
CNTROB癌易感基因2相互作用蛋白抗体特价促销anti- JP45/JSRP1 antibody细胞EPHA3激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)酪氨酸激酶A/B/C抗体
HEC1癌细胞高表达蛋白Hec1抗体特价促销anti- JPH1 antibody组织EPHA3激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)凝血调节蛋白/血栓调节素抗体
CDK5周期素依赖性激酶5抗体特价促销anti- Jph2 antibody细胞EPHB2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)肿瘤坏死因子受体相关蛋白3抗体
HURP/DAP5肝癌上调蛋白抗体特价促销anti- JTV1 antibody组织EPHB2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)肿瘤坏死因子受体相关因子6抗体
猪等孢球虫通用PCR试剂盒通用组蛋白乙酰化H3-K56定量试剂盒(Colorimetric) EpiQuik™ Global Acetyl Histone H3-K56 Quantification Kit (Colorimetric)REF-1/APEX1 多功能DNA修复酶抗体Super Fluor 750 SEFriedelin;木栓酮
通用乙酰化组蛋白H3-K56定量试剂盒(Fluorometric) EpiQuik™ Global Acetyl Histone H3-K56 Quantification Kit (Fluorometric)C16orf48 16号染色体开放阅读框48抗体DiR碘化物Sucralose;三氯蔗糖
通用乙酰化组蛋白H3-K56定量试剂盒(Fluorometric) EpiQuik™ Global Acetyl Histone H3-K56 Quantification Kit (Fluorometric)phospho-ATG3 (Tyr18) 磷酸化自噬相关蛋白3抗体腔肠素nativeγ-aminobutyric acid;γ-氨基丁酸
通用基因敲除定量试剂盒QuantiSir General Gene Knockdown Quantification Kit C16orf57 16号染色体开放阅读框57抗体腔肠素cpAcarbose;阿卡波糖
通用基因敲除定量试剂盒 QuantiSir General Gene Knockdown Quantification KitATH III 抗凝血酶3抗体腔肠素f(±)-Terpinen-4-ol;4-松油烯醇
特异基因敲除定量试剂盒(表观遗传调控)QuantiSir Specific Gene Knockdown Quantification Kit For Epigenetic Regulators ATG3 自噬相关蛋白3抗体腔肠素hL-Glycine;L-甘氨酸
特异基因敲除定量试剂盒(DNA损伤/修复)QuantiSir Specific Gene Knockdown Quantification Kit For DNA Damage/Repair PDZD9 PDZ结构域PDZK9蛋白抗体腔肠素hcpL-Alanine;L-丙氨酸
特异基因敲除定量试剂盒(细胞死亡/凋亡)QuantiSir Specific Gene Knockdown Quantification Kit For Cell Death/Apoptosis ITFG3/C16orf9 整联蛋白重复蛋白3抗体腔肠素nDoxycycline;强力霉素
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
数据采集:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm,发射光谱在 530nm。
数据处理:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴,以 Ct 值为纵轴,通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。