PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
产品名称：沿岸单孢子虫PCR定量试剂盒
英文名称：Haplosporidium costalePCR
编号： FSP1731
分类：PCR检测试剂盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 产品仅供科研从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
数据采集：
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时，吸收光谱在 471nm，结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm，发射光谱在 530nm。
数据处理:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴，以 Ct 值为纵轴，通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
ATG16L2自噬体ATG16L2蛋白抗体特价促销anti- HIST2H2AA4 antibody细胞β氨基己糖苷酶（β-hexosaminidase）活性比色法定量检测试剂盒RAB3-GTP酶激活蛋白催化亚单位1抗体
ATG18/WIPI1自噬相关蛋白18抗体特价促销anti- HIST3H2A antibody组织β氨基己糖苷酶（β-hexosaminidase）活性比色法定量检测试剂盒RAB3-GTP酶激活蛋白催化亚单位2抗体
ATP1b2/Na+K+ATPase钠钾ATP酶通道蛋白抗体特价促销anti- Histamine antibody细胞纤维素酶（cellulase）活性比色法定量检测试剂盒维甲酸诱导蛋白1抗体
ATP1A1钠钾ATP酶蛋白a1抗体特价促销anti- Histone H1 antibody组织纤维素酶（cellulase）活性比色法定量检测试剂盒转录调控因子RFX4抗体
Phospho-ATP1A1(Tyr10)磷酸化钠钾ATP酶蛋白a1抗体特价促销anti- Histone H1.0 antibody细菌纤维素酶（cellulase）活性比色法定量检测试剂盒Rab溶酶体相互作用蛋白样2抗体
Phospho-ATP1A1(Ser16)磷酸化钠钾ATP酶蛋白a1抗体特价促销anti- Histone H1.2 antibody真菌/酵母β1，3 D葡聚糖合成酶活性比色法定量检测试剂盒12号染色体开放阅读框52抗体
Phospho-ATP1A1(Ser23)磷酸化钠钾ATP酶蛋白a1抗体特价促销anti- Histone H1.2 antibody植物β1，3 D葡聚糖合成酶活性比色法定量检测试剂盒梅克尔憩室综合征相关蛋白5抗体
ATXN1/Ataxin-1脊髓小脑失调症蛋白1抗体特价促销anti- Histone H2A.X antibody前列腺素D合成酶（prostaglandin D synthase）活性比色法定量检测试剂盒β1,3-N-乙酰糖基转移酶抗体
沿岸单孢子虫PCR定量试剂盒Lentivirus NFAT luciferase reporter 慢病毒报告基因颗粒 Annexin A10/14 膜粘连蛋白10抗体单核细胞增生李斯特菌探针法荧光定量PCR试剂盒Sulfapyridine；磺胺吡啶
Lentivirus Nanog luciferase reporter 慢病毒报告基因颗粒 Annexin VI 膜粘连蛋白6抗体李斯特菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒Pregnenolone；孕甾烯醇酮
Lentivirus Myc luciferase reporter 慢病毒报告基因颗粒 Annexin A7 膜粘连蛋白7抗体罗布罗布芽生菌探针法荧光定量PCR试剂盒Isochlorogenic acid B；异绿原酸B
Lentivirus MTF1 luciferase reporter 慢病毒报告基因颗粒 PRKCQ/PKC theta 蛋白激酶C theta抗体疙瘩皮肤病病毒探针法荧光定量PCR试剂盒Taurocholic acid Sodium Salt；牛磺胆酸钠
Lentivirus MEF2 luciferase reporter 慢病毒报告基因颗粒 phospho-PRKCQ(Ser676) 磷酸化蛋白激酶C theta抗体长须白蛉探针法荧光定量PCR试剂盒Heterophyllin B；太子参环肽B
Lentivirus LXR luciferase reporter 慢病毒报告基因颗粒 phospho-PRKCQ(Ser695) 磷酸化蛋白激酶C theta抗体犬巨球菌探针法荧光定量PCR试剂盒Sophocarpine；槐果碱
Lentivirus KLF4 luciferase reporter 慢病毒报告基因颗粒 phospho-PRKCQ(Thr538) 磷酸化蛋白激酶C theta抗体溶酪巨球菌探针法荧光定量PCR试剂盒Endothall；草多索/内氧环己邻二甲酸/内氧草索
Lentivirus KLF4 luciferase reporter 慢病毒报告基因颗粒 Annexin V 重组膜粘连蛋白5抗体巨球菌探针法荧光定量PCR试剂盒Tauroursodeoxycholic acid 牛磺熊去氧胆酸
储存条件：
仅用于科研14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
