储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 产品仅供科研血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
产品名称:地霉属通用PCR检测试剂盒
英文名称:Geotrichum spp.PCR
编号: FSP1694
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
MAP1B微管相关蛋白1B抗体特价促销anti- GPR132 antibody血液诱导型巨噬细胞一氧化氮合成酶((iNOS /NOS2/mNOS))活性比色法定量检测试剂盒磷酸化前整合位点蛋白1抗体
MID2/RNF60/Midline-2环指蛋白60抗体特价促销anti- GPR137 antibody体液诱导型巨噬细胞一氧化氮合成酶((iNOS /NOS2/mNOS))活性比色法定量检测试剂盒肽基脯氨酞顺反异构酶Pinl抗体
RP1/DCDC4A视网膜色素变性蛋白1抗体特价促销anti- GPR137B antibody细胞结构型内皮细胞一氧化氮合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性比色法定量检测试剂盒磷酸化肽基脯氨酞顺反异构酶Pinl抗体
STAU2双链RNA结合蛋白Staufen2抗体特价促销anti- GPR139-Specific antibody组织结构型内皮细胞一氧化氮合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性比色法定量检测试剂盒磷酸化孕激素受体抗体
Gliomedin/COLM神经胶质蛋白(肝癌相关基因2)抗体特价促销anti- GPR142 antibody血液结构型内皮细胞一氧化氮合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性比色法定量检测试剂盒磷酸化富含脯氨酸的酪氨酸激酶2抗体
KIF1B驱动蛋白家族成员1B抗体特价促销anti- GPR161 antibody体液结构型内皮细胞一氧化氮合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性比色法定量检测试剂盒磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶p90RSK蛋白抗体
MYBPC1肌球蛋白结合蛋白C抗体特价促销anti- GPR162 antibody细胞结构型神经元一氧化氮合成酶(cNOS/NOS1/nNOS)活性荧光定量检测试剂盒DNA修复蛋白NBS1抗体
Neurexin 1轴突蛋白1(Neurexin 1α)抗体特价促销anti- GPR17 antibody组织结构型神经元一氧化氮合成酶(cNOS/NOS1/nNOS)活性荧光定量检测试剂盒神经丛蛋白A2抗体
地霉属通用PCR检测试剂盒L-Threonine L-苏氨酸RDH13 视黄醇脱氢酶13抗体牛痘病毒探针法荧光定量PCR试剂盒莱卡818刀片 80mm long x 14mm high x 0.35mm
L-Tryptophan L-色氨酸NIMP/RTN4IP1 NOGO相互作用线粒体蛋白1抗体伯氏立克次氏体(柯克斯体)探针法荧光定量PCR试剂盒Lipofectamine® MessengerMAX™ Transfection Reagent
L-Valine L-缬氨酸TMEM173 跨膜蛋白173抗体克罗诺杆菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒Yeast 酵母粉
L-Alanine L-丙氨酸TMEM147 跨膜蛋白147抗体马克洛菌探针法荧光定量PCR试剂盒Tryptone 胰蛋白胨
L-Isoleucine L-异亮氨酸PANK1 泛酸激酶1抗体刺激隐核虫探针法荧光定量PCR试剂盒Papain 木瓜蛋白酶 细胞培养级别
ER-Tracker Green (BODIPY® FL Glibenclamide), for live-cell imaging 内质网绿色荧光探针(活细胞)PANK2 泛酸激酶2抗体新生隐球菌探针法荧光定量PCR试剂盒人外周血淋巴细胞分离液 内毒素<0.5EU 科研
ER-Tracker Blue-White DPX, for live-cell imaging 内质网蓝色荧光探针(活细胞)PANK3 泛酸激酶3抗体贝氏隐孢子虫探针法荧光定量PCR试剂盒Taq DNA 聚合酶 Promega原装
Fixogum Rubber Cement Fixogum橡胶胶水 PANK4 泛酸激酶4抗体小隐孢子虫探针法荧光定量PCR试剂盒M-mLV 反转录酶 高温度下不稳定
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
数据采集:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm,发射光谱在 530nm。
数据处理:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴,以 Ct 值为纵轴,通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。